（北京昌平中医医院 北京 102200）
【摘 要】目的：探讨zeste同源增强子2 (EZH2)在正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌中的表达及意义。方法：应用免疫组化法检测了185例正常宫颈鳞状上皮、CIN及宫颈鳞癌中EZH2的表达情况，并分析其与相关病变程度的关系。结果：EZH2在62例正常宫颈鳞状上皮样本中，仅有3例阳性表达，在CIN I，CIN II，CINIII及宫颈的鳞癌中的阳性表达比例分别为3%，40%，57%，80%。EZH2在正常组织、癌前病变及癌中的阳性率分别为0.5%,41%及80%，从正常、癌前到癌，表现出逐渐增高的阳性率。在癌前病变组中，CIN I,CIN II及CIN III的阳性率分别为3%，40%，57%，表现为在癌前病变中，随着病变程度的加重，阳性率明显增高。结论：EZH2的表达在正常宫颈鳞状上皮到CIN再到宫颈癌的发展过程中逐步升,可能参与了宫颈鳞癌的发生和发展。
【关键词】EZH2；CIN；宫颈癌
【中图分类号】R737.33 【文献标识码】B 【文章编号】1004-6194（2015）02-0384-02
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤，其中鳞癌占90％以上，在女性生殖系统肿瘤中占第1位，且其发病率呈逐年上升和年轻化的发展趋势[1]。宫颈鳞癌是由癌前病变宫颈上皮内瘤变（CIN）逐步发展形成的。CIN根据鳞状上皮异型增生的程度分为CIN I、CIN II和CIN III三个级别。上述病变在临床检查中无法区分，必须通过活检病理诊断才得以确诊。早期诊断和治疗CIN对于预防宫颈鳞癌意义重大。EZH2可以抑制细胞的分化和靶基因的表达，诱导肿瘤细胞的增殖、转移和永生化，EZH2 在多种恶性肿瘤组织中高表达，与肿瘤恶性程度相关[2-6]。本研究中，我们应用免疫组化方法检测EZH2在正常宫颈鳞状上皮、CIN及宫颈鳞癌中的表达情况，探讨其表达差异的意义。
1 材料与方法
1.1病例选择 选取我院病理科2005—2014年间存档的宫颈活检石蜡包埋标本185例，年龄17～76岁，中位年龄45.7岁。按组织学分类，慢性宫颈炎62例，CIN I 45例，CIN II 30例；CIN III 28，宫颈鳞癌 20例。所有标本均经10％中性甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm厚连续切片，分别进行HE和免疫组化染色。
1.2方法 免疫组化染色采用两步法。EZH2抗体、二抗检测系统及DAB显色剂均从北京中杉生物技术开发公司购买。将制好的组织切片经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱水后行3 %过氧化氢孵育10min阻断内源性过氧化物酶，采用高压锅进行高温抗原修复，抗原修复液为枸橼酸盐缓冲液，余步骤按试剂盒说明书进行操作。PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照｡各步之间均用PBS缓冲液冲洗｡
1.3结果判定 免疫组化染色结果按如下标准评价 ：EZH2的表达部位为胞核，以细胞出现棕黄色着色为阳性着色，取阳性细胞占全部病变细胞的百分比计数（正常鳞状上皮以阳性细胞占所观察上皮的比例）：≤10％计为0分，11％～25％为1分，26％～50％为2分，>50％为3分；按着色强度计，不着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。上述两者得分相乘为最后结果，0～1分为阴性表达，≥2分为阳性表达。
2 结果
2.1 EZH2正常宫颈鳞状上皮及CIN中的表达情况 EZH2阳性部位为细胞核，表现为胞核呈棕黄色（图1-2）。EZH2在62例正常宫颈鳞状上皮样本中，仅有3例阳性表达，在CIN I，CIN II，CINIII及宫颈的鳞癌中的阳性表达比例分别为3%，40%，57%，80%（见表1)。
图2 正常宫颈鳞状上皮阴性（免疫组化EZH2染色，×300）
2.2 EZH2在正常宫颈鳞状上皮、CIN及宫颈鳞癌中的表达情况与病变程度的关系
EZH2在正常组织、癌前病变（CIN I-CIN III）及癌中的阳性率分别为0.5%,41%及80%，从正常、癌前到癌，表现出逐渐增高的阳性率。在癌前病变组中，CIN I,CIN II及CIN III的阳性率分别为3%，40%，57%，表现为在癌前病变中，随着病变程度的加重，阳性率明显增高。
3 讨论
宫颈鳞癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，其死亡率居女性肿瘤的第一位。近几年来，宫颈鳞癌的发病率呈上升趋势,我国宫颈鳞癌患病率和病死率占世界总和的三分之一。研究发现，CIN与宫颈鳞癌的发生关系密切,是宫颈鳞癌的癌前病变。CIN I级发展到CIN III级的平均时间为9年,再发展到浸润性癌则需要3个月到2年，宫颈癌5年存活率为67% 宫颈上皮内瘤样变存活率为100%，故宫颈癌的早期筛查和诊断是降低发生的关键[7]。
EZH2是聚硫蛋白复合物基因家族(PcG)重要成员之一，在PcG基因家族中，EZH2起着核心作用。EZH2蛋白是PRC2的催化活性成分，具有组蛋白甲基转移酶活性，主要催化组蛋白H3 氨基尾端的第27位赖氨酸发生三甲基化，三甲基化的H3K27作为锚定点结合HPC，再招募PRC1的其他蛋白结合到靶基因的polycomb反应元件，PRCs与PRE结合后阻断转录活化因子与启动子区结合，从而抑制靶基因的转录[5]。
自从基础研究发现EZH2是一个染色质修饰酶后，出现很多EZH2癌细胞特性改变相关的报道。很多研究者都发现相对正常组织来说，EZH2在癌组织中表达异常增高，且其表达越高，肿瘤恶性度越高，预后越差。在乳腺癌、前列腺腺癌的癌前病变组织中也报道EZH2 的过表达，表现为随着癌前病变程度的严重，EZH2的表达越高[6]。本研究结果显示，宫颈鳞癌组织中EZH2的表达显著高于正常宫颈鳞状上皮，这一结果与此前文献报道的相一致。提示，EZH2可能在宫颈鳞癌的发生中起到了重要的作用。此外，本研究还发现，在癌前病变组中，CIN I,CIN II及CIN III的阳性率分别为3%，40%，57%，表现为在癌前病变中，随着病变程度的加重，阳性率明显增高。这一现象在其他学者的研究中同样可以见到[7]。提示，在正常鳞状上皮，CIN 到宫颈癌的演进过程中，EZH2同样起到了较为重要的作用。
综上，本研究发现，EZH2在正常宫颈鳞状上皮、癌前病变（CIN I-CIN III）及宫颈鳞癌中的阳性率逐渐增高，且在癌前病变中，随着病变程度的加重，EZH2的阳性率亦明显增高，提示EZH2可能参与了宫颈鳞癌的发生和发展。
参考文献：
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[7]张惠民,陈淑琴,牛刚, et a1.Zeste同源增强子2和p53蛋白在宫颈鳞癌及癌前病变中的表达及临床意义[J].中华肿瘤杂志,2014,36:597-601.
论文作者:齐焕然
论文发表刊物:《中国慢性病预防与控制》2015年2期
论文发表时间:2016/3/18
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