（南安市疾病预防控制中心 362300）
摘要：目的 评价采用细胞培养法以及实时荧光定量PCR法在流感病毒检测中的临床价值。方法 选择我中心于2018年6月-2019年8月收集采集到的流感样病例的350份咽拭子样本为研究对象，对其分别采取细胞培养法以及实时荧光定量PCR法进行检测，比较两种检验方式的阳性检出率。结果 实时荧光定量PCR法阳性检出率为11.43%高于细胞培养法的2.86%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 实时荧光定量PCR法在临床检测中具有简单快捷、简单快捷以及灵敏度高等优势，可应用于流感爆发初期大面积快速筛查。
关键词：细胞培养法；实时荧光定量PCR法；流感病毒检测；阳性检出率
流感病毒也可称之为流行性感冒，具有一定的传染性，可能导致急性呼吸道疾病。尽管现阶段临床上可有效监测流感病毒，但仍旧无法对流感病毒予以完全控制，因而需临床加强对流感病毒准确鉴定及分离，以提高检出率[1]。基于此，本文选择我中心于2018年6月-2019年8月收集采集到的流感样病例的350份咽拭子样本为研究对象，对其分别采取细胞培养法以及实时荧光定量PCR法进行检测，比较两种检验方式的阳性检出率。现分析如下：
1 资料与方法
1.1基线资料
选择我中心于2018年6月-2019年8月收集采集到的流感样病例的350份咽拭子样本为研究对象。男性217例，女性133例；年龄3-59岁，平均年龄（32.07±7.22）岁。纳入标准：体温＞38℃，发热症状在3d内，同时伴有咳嗽或咽痛症状。将所收集到的咽拭子样本置于MEM采样液中，并于2-4℃保存运送至实验室。
1.2方法
对咽拭子样本采取细胞培养法与实时荧光定量PCR法检测，具体方式如下：①细胞培养法：取1.5mLEDTA胰酶加入至细胞培养瓶中，摇动1min后倒掉EDTA胰酶，加入1.5mL EDTA胰酶，并于37℃下行4min温浴后将EDTA胰酶倒掉。加入1mL牛血清与4 mL细胞生长液，于每个细胞培养瓶中加入1mL细胞后，并补充5-5.5mL生长液，培养2-3d[2]。②实时荧光定量PCR法：采用核酸提取试剂盒提取流感病毒RNA，严格按照试剂盒说明书进行操作。于50℃下反应0.5h，95℃下反应10min，95℃下反应15 s，55 ℃下反应30 s。流感病毒及分型均采用FAM通道。
1.3 观察指标
比较两种检验方式的阳性检出率。
1.4 数据分析
观察指标数据进行SPSS22.0统计学处理。计数型指标占比率以例（n）、率（%）表示，计量型指标以均数±标准差（?x±s）描述，检验分别采用（x2）和（t）。P值＜0.05，表示有统计学意义。
2 结果
实时荧光定量PCR法阳性检出率为11.43%高于细胞培养法的2.86%，见表1。阳性检出率比较，P<0.05，具有统计学意义。
3 讨论
在流感病毒检测中，细胞培养法作为最为常用、最为准确以及高度敏感的一种手段，是现阶段上临床上快速诊断方式中无法替代的。尽管细胞培养法具有周期长以及复杂操作等特点，但检测结果具有准确性与可靠性，且特异性高，仍旧成为诊断流感病毒诊断的金标准，但该种方式在对流感疫情暴发行快速诊断上会受到一定制约。因此，提高检测方式灵敏度以及准确度，可在一定程度上减少临床医师工作量，在流感病毒检测中实时荧光定量PCR法属于初筛手段[3]。在临床检测中应用实时荧光定量PCR法可直接采用电脑软件收集荧光信号，并于电脑上较为直观且清楚地显示扩增曲线，在实际中可对条带采用紫外灯进行观察，具有简单操作、高重复性、结果准确以及较强敏感性与特异性等多种优势[4]。
本次研究结果表明，实时荧光定量PCR法阳性检出率为11.43%高于细胞培养法的2.86%，P<0.05，具有统计学意义。这表明，实时荧光定量PCR法在临床检测中具有简单快捷、简单快捷以及灵敏度高等一定的优势，一般情况下广泛应用于流感爆发初期大面积快速筛查中，该种方式可及时且准确地为流感疫情处置提供依据。而细胞培养法一般于实验室诊断中，且主要针对的是流感病原监测，在流感病毒抗原性以及耐药性等方面的研究中更为显著，但具有耗费时间长、操作复杂、需要活体病毒样本等缺点，同时对于标本运输采集等环节具有非常明显的限制且要求高，因此在流感爆发时细胞培养法检测会收到较大限制[5]。
综上所述，细胞培养法以及实时荧光定量PCR法作为流感病毒检测手段具有不同优势，于流感爆发初期需实时荧光RT-PCR法检测，以提高阳性检出率，值得大量临床推广。
参考文献
[1]朱紫衣，王文博，江忠勇，等.人主动脉平滑肌细胞感染甲型和乙型流感病毒后细胞因子表达的变化[J].医学研究生学报，2019，32（2）：132-137.
[2]王宁红，程艳君.流感病毒检测中细胞培养法与实时荧光定量PCR法效果比较[J].家庭医药，2019，（9）：89.
[3]张群，刘超，李蕾，等.实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析[J].健康大视野，2019，（9）：197.
[4]周唯.实时荧光PCR方法在A型流感病毒检测中的应用[J].中国保健营养，2019，29（16）：341.
[5]董悦.流感病毒细胞分离培养阳性检出的主要影响因素分析[J].安徽卫生职业技术学院学报，2018，17（6）：105-106.
论文作者:叶招兴,杨兴斌
论文发表刊物:《航空军医》2019年11期
论文发表时间:2019/11/14
标签：流感论文; 荧光论文; 定量论文; 实时论文; 病毒论文; 检出论文; 细胞培养论文; 《航空军医》2019年11期论文;