湖南省张家界市人民医院 427000
【摘 要】目的：了解磷霉素对多重耐药肠杆菌科细菌的体外抗菌活性，指导临床合理用药。方法：采用VITEK 2-compact全自动细菌鉴定药敏系统对血标本、清洁中段尿标本中分离的315株肠杆菌科细菌进行鉴定，MIC、K-B法进行药敏试验和ESBLs的检测，结果按CLSI 2016年版标准判断；应用WHONET 5.6软件分析病原菌的分布及耐药情况。结果：315株肠杆菌科细菌对磷霉素的敏感率为87.4%，其中大肠埃希菌245株（77.8%）、肺炎克雷伯菌38株（12.1%）和其他肠杆菌科细菌32株（10.1%）对磷霉素的敏感率分别为93.1%、52.6%和84.4%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和其他肠杆菌科细菌ESBLs的检出率分别为73.6%、61.1%和41.7%。产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对磷霉素的敏感率分别为93.3%和45.4%。结论：血标本、清洁中段尿标本培养获得的肠杆菌科细菌以大肠埃希菌为主，磷霉素对这些标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌等肠杆细菌科细菌具有良好的体外抗菌活性，可作为临床经验用药之一。
【关键词】多重耐药；超广谱β-内酰胺酶；肠杆菌科细菌；磷霉素
中图分类号：R978文献标志码：A
血流感染、泌尿道感染是临床常见的感染性疾病，也是主要的医院获得性感染疾病。磷霉素是一种广谱抗菌药物，在欧美很多国家作为临床非复杂性尿路感染的经验用药已使用多年，但迄今为止，细菌对其耐药率仍然很低，并且该药对多重耐药的肠杆菌科细菌也具有良好的抗菌活性[1]。本研究旨在探讨磷霉素对临床血、尿标本中肠杆菌科细菌的体外抗菌活性，并与其他抗菌药物进行对比，以期指导临床用药。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1菌株来源 选择2015年1月—2015年12月我院住院以及门急诊患者的血液、尿液连续、不重复的临床标本，共分离到315株肠杆菌科细菌。
1.1.2试剂与仪器 使用VITEK 2-compact全自动细菌鉴定药敏系统，操作均按使用说明书进行。K-B法进行磷霉素及ESBLs的检测。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922由湘雅医院惠赠。
1.2方法
将血液标本接种在血培养瓶中上BACT/ALERT 3D 240全自动血培养仪培养，尿标本接种血平皿、麦康凯平皿，35℃培养24—48h。根据菌落特点、行革兰染色、氧化酶试验，在VITEK 2-compact全自动细菌鉴定药敏系统中进行鉴定和药敏试验，K-B法进行磷霉素及ESBLs的检测。结果采用2016年的CLSI文件判读。
1.3数据处理
使用WHONET5.6统计软件进行分析处理。
2 结果
2.1 2015年1月—12月从血液、尿液标本中分离到的315株肠杆菌科细菌的菌株构成情况
本研究中分离到的315株肠杆菌科细菌主要为大肠埃希菌，其次是肺炎克雷伯菌肺炎亚种，其他肠杆菌科细菌有32株（奇异变形杆菌10株、阴沟肠杆菌10株、柠檬酸杆菌6株、嗜水气单胞菌3株、粘质沙雷菌2株及沙门氏菌属1株，因菌株数较少，未进一步分析），具体见表1。
2.2 肠杆菌科细菌对磷霉素及其他抗菌药物的耐药性
本研究结果显示，血液、尿液标本中分离的肠杆菌科细菌对磷霉素的敏感率为87.4%，对其他抗菌药物敏感率高于87.0%的有亚胺培南（96.2%）、阿米卡星（96.2%）、厄他培南（95.2%）和哌拉西林－他唑巴坦（88.2%），而对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢曲松、头孢吡肟和氨曲南的敏感率均较低，分别为22.3%、24.1%、29.7%、37.8%和38.8%。从单个菌种来看，大肠埃希菌对磷霉素的敏感率最高（93.1%），其次为其他肠杆菌科细菌（84.4%），最低为肺炎克雷伯菌（52.6%）。具体数据见表2、表3。
在本研究中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和其他肠杆菌科细菌ESBLs的检出率分别为73.6%、61.1%和41.7%。产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、复方新诺明等抗菌药物的敏感率均低于非产ESBLs株。但存在一个奇怪的现象：产ESBLs的大肠埃希菌对磷霉素的敏感率高于非产ESBLs的大肠埃希菌，产ESBLs的大肠埃希菌对磷霉素的敏感率为93.3%，仅低于亚胺培南、厄他培南、阿米卡星；对哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、呋喃妥因、妥布霉素、庆大霉素的敏感率分别为91.6%、91.4%、77.2%、53.4%和52.2%，对其余受试抗菌药物的敏感率均低于50.0%。产ESBLs的肺炎克雷伯菌对磷霉素的敏感率为45.4%，低于亚胺培南、阿米卡星、厄他培南、左旋氧氟沙星、头孢替坦和庆大霉素；对其余受试抗菌药物的敏感率均低于40.0%。磷霉素对产ESBLs与非产ESBLs肠杆菌科细菌的敏感率差别不大，与文献[2]报道不一致，可能与地域、用药习惯等有关，有待于进一步研究。具体见表4、表5。
3 讨论
本研究结果显示，从尿标本中分离的肠杆菌科细菌最常见的菌种为大肠埃希菌（77.8%），其次为肺炎克雷伯菌（12.1%），二者共占肠杆菌科细菌的89.9%，与近年全国细菌耐药监测网的监测数据相似。总体而言，肠杆菌科细菌对磷霉素的敏感率为87.4％，其中大肠埃希菌对磷霉素氨丁三醇的敏感率为93.1％，高于肺炎克雷伯菌（52.6％），这与国内外的报道相一致。而本研究中肠杆菌科细菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类及复方新诺明的总体敏感率均低于60.0％，显著低于磷霉素。因此，磷霉素可作为经验性治疗肠杆菌科细菌（尤其是大肠埃希菌）引起的单纯性尿路感染药物之一。导致尿路感染的革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性日益严重，其中产ESBLs是其重要的耐药机制，该酶可水解青霉素类、头孢菌素类（包括第三、四代头孢菌素）和氨曲南，使难治性尿路感染日益增加。本研究结果显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs检出率分别为73.6％和61.1％，处于较高水平。除了对碳青霉烯类抗生素外，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对其他抗菌药物的敏感率均显著低于非产ESBLs株，但在本研究中，产酶和非产酶的肺炎克雷伯菌对磷霉素氨丁三醇的敏感率分别为45.4％和57.1％，与张祎博等[1]的研究结果不同。本研究发现产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对少数抗菌药物（包括碳青霉烯类、磷霉素、阿米卡星、头孢替坦和哌拉西林/他唑巴坦）均保持较高敏感率，其中碳青霉烯类抗生素属于限制性抗菌药物，阿米卡星的不良反应较大，不能口服，而磷霉素仅需单剂治疗，依从性高，故可作为治疗产ESBLs菌株引起的轻中度尿路感染药物。
磷霉素是1969年从链霉菌中分离的一种磷酸衍生物，具有独特的化学结构与抗菌机制，可使细菌细胞壁合成的第一步受到抑制而导致细菌灭亡，从而发挥抗菌作用。该药属于细菌繁殖期快速杀菌剂，抗菌谱广，具有抗炎作用、良好的酶稳定期、体内分布广、不降解以及用药安全性高等优势。本试验中肠杆菌科细菌对磷霉素的敏感率为87.4%，这与有关文献[1]报道的结果接近。在ESBL（+）的肠杆菌科细菌中，磷霉素对大肠埃希菌的敏感率为93.3%，对肺炎克雷伯菌肺炎亚种的敏感率为45.4%，提示磷霉素治疗产ESBL的肠杆菌科细菌引起的感染具有一定疗效。考虑到磷霉素主要经肾脏代谢，因此可以在复杂性泌尿系感染治疗中，应用碳青霉烯类抗生素或酶抑制剂复方制剂之前，采取磷霉素策略性轮换使用[3]。
本研究结果显示，磷霉素对肠杆菌属细菌引起的尿路感染有良好的体外抗菌活性，但体内疗效还有待更多的临床研究加以证实。
参考文献：
[1] 张祎博，查庆华，倪语星等.磷霉素氨丁三醇对尿标本中肠杆菌科细菌体外抗菌活性研究[J].中国感染与化疗杂志，2014，14（2）：153-156.
[2] 袁梁，隋文君，岳燕，等.磷霉素对尿标本中分离细菌的药物抗菌活性分析[J].中国医药导报，2014，11（31）：14-17.
[3] 孟甄，金建玲，刘玉庆，等.细菌耐药性的诱导与消除[J].中国药理学通报，2003，19（9）：1047-1050.
基金项目：省科技计划项目（C2014-55、B2015-165），张家界市科技计划项目（2014YB01）
作者简介：杨怀德（1971-），男，湖南怀化人，硕士，微生物副主任检验师，研究方向：细菌耐药性。E-mail：yanghuaide168@163.com 通信地址：湖南省张家界市人民医院检验科，邮编：427000 *共同作者
论文作者:杨怀德,张进军,李雪梅,向雪琼,宋超群,付华
论文发表刊物:《航空军医》2017年第6期
论文发表时间:2017/5/15
标签：细菌论文; 杆菌论文; 大肠论文; 磷霉素论文; 肺炎论文; 头孢论文; 敏感论文; 《航空军医》2017年第6期论文;