邵阳市食品药品检验所 邵阳 422000
【摘 要】目的：探讨口服液类保健品中山梨酸和苯甲酸含量应用HPLC法检测价值。方法：选择口服液类保健品包括惠血营养液、雪芙蓉口服液等，应用高效液相色谱仪（Waters2695-2996）完成山梨酸、苯甲酸含量检测。结果：苯甲酸平均回收率为103.8%，RSD为1.7%；山梨酸平均回收率为95%，RSD为1.9%。结论：应用HPLC法检测，可将口服保健食品中含有的山梨酸、苯甲酸有效检出，为限量控制提供有力参考。
【关键词】HPLC法；口服液类保健食品；苯甲酸；山梨酸；含量
食品添加剂为在食品生产过程中加入可起到保鲜、改善食品品质、防腐等作用的天然或人工合成物质，对食品工业的迅猛发展有强有力的促进作用［1］。食品添加剂虽可使食品感官特性改变，但若过量摄入，代谢产物在人体中结构呈较为稳定显示，分解困难，可对机体造成一定程度危害，故含量的监测为相关部门关注的重点［2-3］。山梨醇和苯甲酸均为广泛应用于各类食品中的防腐剂，因口服液类保健品含糖量高，易发生霉变，故上述两项物质常在制备过程中添加，对此类食品中山梨醇、苯甲酸的具体含量进行测定，可保障使用安全，保护患者权益[4]。本次研究就此展开探讨，现回顾结果如下。
1 仪器与试药
1.1仪器
应用高效液相色谱仪（Waters2695-2996）完成相关检测，含美国Waters公司提供的Waters2695 DAD检测器、2996泵系统；德国梅特勒公司提供的AL204/01型电子天平（感量0.1mg）。
1.2样品及试剂
由中国计量科学研究院提供的苯甲酸和山梨酸溶液标准物质，批号均为：11001，含量均为：1.00mg/ml。；口服液类保健品包括惠血营养液，20ml/次；雪芙蓉口服液，10-20ml/次；生物健口服液（10ml/次），阿胶浆口服液（10-20ml）。水为去离子水，甲醇为色谱纯，其它均为分析纯。
1.3 方法
（1）色谱条件及适用性测试：应用Agilent ZOBAX C18色谱柱，柱温设置为30°C；检测波长设置为230nm；甲醇－0.02mol/L乙酸铵溶液（3：97）为流动相，流速调整至1.0ml·min-1。在上述条件下，苯甲酸峰以1.01为对称因子，山梨酸峰以1.02为对称因子，理论板数计算均>4000；
（2）制备溶液：①制备单一成分储备液：对苯甲酸和山梨酸标准溶液各精密量取10ml，于20ml量瓶中放置，对单一成分对照品储备液制备完成。②制备混合对照品储备液：分别对山梨酸和苯甲酸储备液各2ml精密量取，在同一量瓶中放置，量瓶规格为10ml，取水加入做稀释处理，至所需刻度，充分混合均匀，混合对照品储备液即制作完成，浓度均为100μｇ·ml-1。供试品溶液：取一次服用剂量的样品，混合均匀，量取5ml，在量瓶中放置，量瓶规格为100ml，取流动相加入稀释至刻度，充分混合均匀，完成滤过操作后，即对供试品溶液获取。
2 结果
2.1精密度测试
对混合对照品同一份溶液选取，连续行5次进样，对各成分峰面积记录，并对RSD计算，山梨酸RSD为0.6%；苯甲酸为0.3%，均不及2.0%。
2.2 重复性检测
对批号相同的样品共取5份，对供试品溶液制备，对对照品溶液及供试品溶液精密量取，各进样10μL，含量用外标法计算，RSD均<1.0%，提示此方法有较好重复性。见表1。
2.3 稳定性检测
取阿胶浆口服液和雪芙蓉口服液供试品溶液，各配置完成后，于0h、2h、4h、8h、12h、24h予以进样考察，对各成分峰面积记录，对山梨酸RSD计算，为1.7%，对苯甲酸RSD计算，为1.1%，均不及2.0%；提示在24h内，供试品溶液可保持稳定。
2.4 回收率测定
（1）苯甲酸：雪芙蓉口服液2ml、2.5m、3ml分别取3份，取苯甲酸对照品储备液2ml、2.5ml、3.ml分别加入，制备所需溶液，经计算，平均回收率为103.8%，RSD为1.7%。（3）山梨酸：阿胶浆口服液2ml、2.5ml、3ml分别取3份，取山梨酸对照品储备液2ml、2.5ml、3ml加入，经计算，平均回收率为95%，RSD为1.9%。
2.5 检出限测定
应用信噪比法，稀释混合对照品溶液至含山梨酸和苯甲酸各0.25μg·ml-1行进样处理，对各峰信噪比计算，就信噪比为3：1的相应质量换算，得出山梨酸检出限约3.03ng，苯甲酸检出限约3.63ng。
2.6 测定检品含量
对5批样品选取，对供试品溶液制备，用外标法对含量计算，结果见表2。
3 讨论
本次研究选取的口服液类保健食品共5批，应用HPLC法对山梨酸、苯甲酸进行检查，结合试验结果示，苯甲酸平均回收率为103.8%，RSD为1.7%；山梨酸平均回收率为95%，RSD为1.9%。此类防腐剂在其中3批口服液类保健食品中均有添加，提示山梨酸、苯甲酸在口服类保健食品中应用较普遍，需对其限量予以适当控制［5-6］。应用HPLC法检测，可将口服保健食品中含有的山梨酸、苯甲酸有效检出，为限量控制提供有力参考。
参考文献：
[1]食品山梨酸、苯甲酸的测定[S].GB/T 5009，29-2003.
[2]Yonggang Zhao，Meiqiang Cai，et al.Analysis of nine food additives in wine by dispersive solid-phase extraction and reversed-phase high performance liquid chromatography[J].Food Research International，2013，52：350-358.
[3]吴春敏，朱精英，池文杰，等.HPLC法快速检测苦参素注射液中8种抑菌剂及苯甲醛[J].药物分析杂志，2012，32（3）：451-454.
[4]孙文军，杜振霞，等.三相中空纤维液相微萃取/超高效液相色谱-串联质谱法检测饮品中的苯甲酸和山梨酸[J].分析测试学报，2012，31（12）：1487-1492.
[5]张雪梅，池利民.高效液相色谱法测定熟肉制品中苯甲酸和山梨醇酸含量[J].安徽农业科学，2009，37（13）：5823-5824.
[6]Xiaohong Chen，Yonggang Zhao，et al.Application of dispersive solid-phase extraction and ultra-fast liquid chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry in food additive residue analysis of red wine[J].Journal of Chromatography A，2012，1263：34-42.
论文作者:陈萍
论文发表刊物:《中国蒙医药》2018年第4期
论文发表时间:2018/7/25
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