舒学香1 隋明1 刘根娣2
1.四川工商职业技术学院 四川省都江堰 611800；2.西北民族大学生命科学与工程学院 甘肃兰州 730030
【摘 要】目的：对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药的乙醇提取物的体外抗氧化及美白活性进行研究。方法：采用乙醇提取法对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药分别进行萃取并进行一系列相关的处理，对其体外抗氧化及美白活性进行研究。结果：黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶；清除DPPH自由基能力为：黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶；抑制酪氨酸酶活性为芦荟叶＞怀山药＞白芷＞黄芩；抑制B16细胞增殖的能力为黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶；抑制黑色素生成能力为黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶。结论：黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药乙醇提取物均具有一定的抗氧化美白功效，但是与目前市场上的产品相比活性较低，所以可以对其进行进一步的分离和纯化，促进其抗氧化的美白活性得到提高。
【关键词】中草药；乙醇提取物；体外抗氧化；美白活性
本次研究我们将采用乙醇提取法对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药分别进行萃取并进行一系列相关的处理，对其体外抗氧化及美白活性进行研究，现在进行如下报道。
1.实验
1.1主要试剂与仪器
本次研究采用的4种中草药分别为黄芩、怀山药、白芷和芦荟叶，其中黄芩产自陕西，怀山药产自河南，白芷产自四川，芦荟叶产自福建；采用上海生工生物工程股份有限公司生产的酪氨酸酶及BC；采用美国适马公司生产的MTT及AR；采用碧云天公司生产的总抗氧化能力检测试剂盒及Brandford蛋白定量试剂盒；采用国药集团化学试剂有限公司生产的聚乙二醇辛基苯基醚、AR、DPPH、BHT；采用上海生工生物工程股份有限公司生产的左旋多巴、AR；采用来自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞脑库的黑色素B16细胞；采用日本东京理化器械株式会社生产的旋转蒸发仪；采用美国Molecular Devices公司生产的MD酶标仪；采用梅特勒-托利多国际股份有限公司生产的电子天平；采用美国LABCONCO公司生产的冷冻干燥仪。
1.2实验方法
1.2.1乙醇提取法
采用乙醇提取法对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶进行萃取，将以上4种中草药均磨碎，过40目筛后各取100g，按照1：10的比例与7%乙醇将入容量为2L的三角锥形瓶，于常温下防止48小时，期间需不定时进行多次震荡和摇匀，进行过滤之后对其进行真空旋转使其能够蒸发和浓缩，最后在真空冷冻干燥机下进行处理至粉末。
1.2.2 抗氧化活性评估
采用ABTS试剂盒方法对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药的总抗氧化活性进行测试，采用标准曲线方程y=-0.1142x-0.4640，R2=0.99，对4种中草药提取物的抗氧化活性进行计算。
1.2.3 清除DPPH自由基能力评估
采用DPPH自由基清除实验对黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药的自由基清除能力进行评估，自由基清除强度与517nm波长处的A值具有线性关系。
1.2.4抑制酪氨酸酶活性评估
将L-DOPA作为反应底物，对酪氨酸酶催化后的底物进行检测，可见有色物质多巴醌，即能够对酪氨酸酶的抑制活性进行间接的反映。
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1.2.5抑制B16细胞增殖和黑色素生成能力评估
使用黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药的乙醇提取物对B16细胞进行48小时的处理，于显微镜下对细胞数量及形态进行观察；之后采用专业软件Prism对4种中草药的乙醇提取物抑制黑色素能力进行评估。
2.结果
2.1 4种中草药乙醇提取物的抗氧化活性
黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药乙醇提取物的抗氧化活性的trolox的质量浓度分别为：黄芩（3.82±0.22）、怀山药（1.51±0.04）、白芷（1.42±0.03）、芦荟叶（1.24±0.01），所以4种中草药乙醇提取物的抗氧化活性为：黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶。
2.2 4种中草药乙醇提取物的清除DPPH自由基能力
黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药乙醇提取物的DPPH自由基IC50分别为（0.24±0.03）、（1.64±0.05）、（1.54±0.03）和（4.20±0.02），所以4种中草药乙醇提取物的清除DPPH自由基能力为：黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶。
2.3 4种中草药乙醇提取物的抑制酪氨酸酶活性能力
4种中草药乙醇提取物抑制酪氨酸酶活性IC50分别为：黄芩（2.71±0.02）、怀山药（1.71±0.01）、白芷（1.82±0.03）、芦荟叶（0.77±0.02），因为抑制酪氨酸酶活性IC50越低，相应的抑制酪氨酸酶活性越强，所以4种中草药乙醇提取物抑制酪氨酸酶活性为芦荟叶＞怀山药＞白芷＞黄芩。
2.4 4种中草药乙醇提取物的抑制B16细胞增殖和黑色素生成能力
48小时之后，B16细胞数量明显减少，并且发生不同程度的固缩、崩解和碎片，4种中草药乙醇提取物抑制B16细胞增殖的IC50为：黄芩（0.30±0.03）、怀山药（1.14±0.03）、白芷（1.04±0.03）、芦荟叶（2.06±0.02），所以4种中草药乙醇提取物抑制B16细胞增殖的能力为黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶；4种中草药乙醇提取物抑制黑色素生成IC50为：黄芩（0.54±0.02）、怀山药（1.98±0.04）、白芷（2.15±0.02）、芦荟叶（5.23±0.05），可见4种中草药乙醇提取物抑制黑色素生成能力为黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶。
3.讨论
随着时代的发展和我国人民经济实力的不断提升，人们对外在的形象越来越注重，并且白皙的皮肤越来越受到重视，所以市场上的美白产品层出不穷，目前已经占据我国美容产品约30%的份额[1]，使各个化妆品的生产企业与研发机构更加积极的对美白产品进行研发和推广。但是就目前的情况来看，市场上数量众多的美白产品质量良莠不齐[2]，为了对消费者的安全性提供保障，我们有必要对中草药乙醇提取物的体外抗氧化及美白活性进行研究[3]。
本次研究结果显示：4种中草药乙醇提取物的抗氧化活性为：黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶；清除DPPH自由基能力为：黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶；抑制酪氨酸酶活性为芦荟叶＞怀山药＞白芷＞黄芩；抑制B16细胞增殖的能力为黄芩＞白芷＞怀山药＞芦荟叶；抑制黑色素生成能力为黄芩＞怀山药＞白芷＞芦荟叶。
综上我们认为，黄芩、怀山药、白芷、芦荟叶4种中草药乙醇提取物均具有一定的抗氧化美白功效，但是与目前市场上的产品相比活性较低，所以可以对其进行进一步的分离和纯化，促进其抗氧化的美白活性得到提高。
参考文献：
[1]黄立森，庞海月，吴黉坦等.4种中草药乙醇提取物体外抗氧化及美白活性研究[J].日用化学工业，2016，46（6）：349-352.
[2]张智萍.川芎美白活性成分的提取分离及在化妆品中的应用研究[D].广东药学院，2014.
[3]蒋雯雯.不同产地不同时期刺山柑活性成分含量消长规律及生理活性的研究[D].石河子大学，2012.
作者简介：舒学香，女，硕士研究生，实验师，研究方向：生物制药。
论文作者:舒学香1,隋明1,刘根娣2
论文发表刊物:《中国蒙医药》2018年第2期
论文发表时间:2018/6/5
标签：黄芩论文; 白芷论文; 山药论文; 芦荟论文; 中草药论文; 乙醇论文; 提取物论文; 《中国蒙医药》2018年第2期论文;