夏永辉 汝昆（通讯作者） 李勇 慕悦意
【摘 要】 目的 探讨一例假性血小板减少的影响因素及解决办法。方法 抽取静脉血分别采用EDTA-K2、柠檬酸钠、肝素三种抗凝剂抗凝，采血后10分钟内及于4℃-8℃冰箱放置2天后分别在XN-9000血液分析仪上进行PLT—I、PLT—O、PLT—F三种方法的检测，同时分别进行血涂片的复检及人工显微镜下计数血小板。结果 三种抗凝血立即于XN-9000血液分析仪的PLT—I法计数的血小板结果分别为19×109/L,11×109/L,13×109/L，PLT—O法计数结果分别为40×109/L,35×109/L,35×109/L，PLT—F法计数结果分别为44×109/L,39×109/L,41×109/L，显微镜下复检可见大血小板及血小板聚集。于4℃-8℃冰箱放置2天后在XN-9000血液分析仪的PLT—I法计数的血小板结果分别为43×109/L,29×109/L,36×109/L，PLT—O法计数结果分别为144×109/L,116×109/L,163×109/L，PLT—F法计数结果分别为52×109/L,51×109/L,45×109/L，显微镜下复检可见大血小板、血小板聚集、皱缩小红细胞及红细胞碎片，人工显微镜血小板计数结果为50×109/L。结论 为此进行血细胞分析，最好采血后尽快进行测试，当血小板直方图异常时可增加PLT—O及PLT—F通道进行复检，而PLT—F法测定的血小板结果对于大血小板及红细胞碎片等因素的影响程度相较小，结果更可信。
【关键词】 血小板； XN-9000血液分析仪； PLT—I； PLT—O； PLT—F
传统的全自动血液分析仪检测血小板的原理主要是采用电阻抗的方法(PLT—I)，其不能很好地识别大血小板、红白细胞碎片、血小板卫星现象、血小板聚集、假性血小板减少等现象，而Sysmex XN-9000全自动血液分析仪检测血小板除采用电阻抗的方法(PLT—I)外尚可采用光学法(PLT—O)和荧光色素染色法(PLT—F)检测血小板，大大地弥补了电阻抗方法检测血小板的不足，极大地提高了血小板检测的准确性，避免了大量样本的镜检复查。我们对应用XN-9000全自动血液分析仪检测血小板假性降低的一个案例进行研究，分析探讨此例假性血小板减少的影响因素及解决办法。
材料和方法
1．器材 Sysmex XN-9000全自动血液分析仪（日本Sysmex公司）；EDTA-K2抗凝管，柠檬酸钠抗凝管，肝素抗凝管，Olympus BX-31显微镜（日本Olympus公司）。
2．试剂 Sysmex XN-9000血液分析仪配套试剂（日本Sysmex公司）；草酸铵稀释液及瑞氏染液，CAL质控血。
3．病例简介 患者，男，23岁，腹泻，血小板减少70天，肺部感染20天入院，进行血细胞分析：白细胞11.57×109/L，红细胞4.10×1012/L，血红蛋白133g/L，PLT19×109/L。PLT触发仪器复检规则，经观察发现血小板直方图异常，加做PLT—O、PLT—F两种方法检测，结果分别为40×109/L和44×109/L。患者临床无明显出现倾向，尿常规，肝肾功能检查均正常。
4．方法与步骤 首先由两位经验丰富的主管检验师对此患者再重新抽取静脉血2ml，分别采用柠檬酸钠和肝素抗凝，连同EDTA-K2抗凝血分别于采血后10分钟内及冰箱放置2天后在XN-9000血液分析仪上进行PLT—I、PLT—O、PLT—F三种方法的血小板检测，其次每种抗凝血分别推血涂片2张，瑞氏吉姆萨染色镜下观察，再者取未抗凝血20ul加入含0.38ml草酸铵稀释液的试管中，严格按照全国临床检验操作规程（第2版）进行血小板人工显微镜计数[1]。
结 果
1．三种检测方法采血后立即测定EDTA-K2、柠檬酸钠、肝素抗凝血结果
讨 论
从本病例可以看出，此患者的静脉血（EDTA-K2抗凝）血细胞分析结果血小板数量为19×109/L，查看直方图发现直方图异常(有拖尾现象),血小板数据后带“※”，提示结果不可信，追加PLT—O和PLT—F法检测结果为40×109/L、44×109/L。经推血涂片复检和人工显微镜下血小板计数均显示与后两种方法的计数结果相符。考虑此患者是由于血小板体积较大和易聚集导致电阻抗法（PLT—I）计数结果偏低。电阻抗原理进行血小板计数，仪器检测血小板阈值在2-30fl范围内，正常的血小板多集中在3-20fl范围。当血小板体积大于30fl时，血小板会被误认为小红细胞而不纳入血小板计数范围，当做红细胞计数，从而导致血小板计数偏低[2]。由于PLT—O和PLT—F两种方法由于是采用荧光染色的方法，因此对于此类血小板异常情况抗干扰能力较强，结果更加可信。为排除此患者是EDTA依赖性聚集，特抽取该患者的静脉血采用柠檬酸钠及肝素抗凝，于XN-9000血液分析仪上进行检测，结果电阻抗法（PLT—I）法测定的血小板结果依旧偏低，而PLT—O和PLT—F两种方法测定结果更能反映血细胞板的真实情况。该标本于4℃-8℃冰箱放置2天后用三种方法测试，显示PLT—F方法测定结果更加稳定可靠，由此可见XN-9000全自动血液分析仪对于血小板的三种测试方法，PLT—F法测定结果更加稳定、可靠，更接近真实的血小板结果。
综上所述，为避免假性血小板干扰实验结果，得到准确可靠的血小板计数，实验室应对血小板较少时制定精确的复检标准，对于首次血小板检测结果减少的标本，用PLT-F法复检或进行推片复检[3]，以得到准确、可靠的测定结果。当用PLT-F法检测仍不增高，同时涂片发现血小板大量聚集，用手工法计数亦不能很好解决[4]，此时，可以考虑用流式细胞术确认。
参考文献
[1]叶应妩等全国临床检验操作规程[M].第二版南京：东南大学出版社，189：22-23.
[2]魏青．贝克曼血细胞分析仪检测假性血小板减少的原因分析[J].中华临床医学研究杂志，2007，13(12)：1751．
[3]刘昕鸣，赵丽艳，庞孟煜，等．83例假性血小板减少症的临床分析与应对措施[J]．中国实验诊断学，201l，15(1)：160．
[4]常菁华，王剑飚．EDTA依赖性假性血小板减少的实验室解决思路[J]．检验医学杂志，2014，7(29)：733．
论文作者:夏永辉,汝昆（通讯作者）,李勇,慕悦意
论文发表刊物:《中华临床医师杂志》(电子版)2016年4月第7期
论文发表时间:2016/7/19
标签：血小板论文; 分析仪论文; 方法论文; 血液论文; 三种论文; 分别为论文; 肝素论文; 《中华临床医师杂志》(电子版)2016年4月第7期论文;