【关键词】：肿瘤及血液病患者；盐水法；凝聚胺法；微柱凝胶法；交叉配血
Effect evaluation of several cross matching methods
【 abstract 】 : objective to improve the safety of clinical blood transfusion through comparative analysis of three kinds of cross matching tests including saline method, gelling method and microcolumn gel method.Methods blood samples from 500 patients with tumor and hematopathy were selected for three kinds of cross matching test.Results 1 positive result was found by saltwater method, 7 positive result was found by condensation amine method, and 6 positive result was found by microcolumn gel method.
【 key words 】 : patients with tumor and hematology;Brine method;Condensation amine method;Microcolumn gel method;With blood
输血是一种常见且重要的临床治疗及抢救手段。为保证临床输血的安全性，需提前进行输血前交叉配血试验。现将2018年8月～2019年8月在我院输血的500例肿瘤及血液病患者血液标本用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶法进行交叉配血试验。结果报道如下：
1 资料和方法
1.1一般资料
本院2018年8月～2019年8月住院的500例肿瘤及血液病患者血液标本。
1.2试剂与仪器
抗筛谱细胞和ABO反定型试剂为上海血液生物医药有限责任公司产品；pohybrene试剂为台湾Baso公司产品；0.9%氯化钠溶液为安徽丰原药业股份有限公司产品；ABO、Rh（D）血型检测卡、不规则抗体筛检卡和抗人球蛋白交叉配血卡为长春博迅生物技术有限责任公司产品；FYQ型免疫微柱孵育器和TD-3A型血清学用离心机为长春博研科学仪器有限责任公司产品；LC-10C低速离心机为安徽中科中佳科学仪器有限公司产品。
1.3方法
三种方法均严格按说明书和我院输血科操作规程进行操作。
2 结 果
实验结果见表 1
凝聚胺法出现配血不合共 7 例，其中因冷凝集引起1例，因红细胞悬液浓度过高引起1例，因自身凝集引起1例，因疾病和药物原因引起4例；微柱凝胶法出现配血不合共6例，其中因自凝引起1例，因骨髓衰竭患者直抗阳性引起1 例，因疾病和药物原因引起4例。
3 讨 论
盐水介质法是天然IgM类血型抗体与对应的红细胞抗原相遇，在室温下盐水介质中出现凝集反应。通过离心，观察受血者血清与供血者红细胞以及受血者红细胞与供血者血清之间有无凝集现象，判断供、受血者之间有无ABO血型不相合的情况。主、次侧均无凝集只说明受、供者间无不相合IgM类抗原抗体反应，不能排除IgG类免疫性抗体所致的不相合情况，因其仅能检测天然存在的IgM类血型抗体，故只适用于初次输血病人的交叉配血。20世纪90年代前，输血前的交叉配血工作只使用盐水法，这种方法通常不能发现不规则抗体。在输血过程中或输血后，可能会发生一些不良的输血反应，其中最有临床诊断意义的是免疫性溶血性输血反应，造成此反应的发病机制就是由于输入不相容的全血、红细胞或血浆时，红细胞与相应的抗体结合，直接激活补体，使大量红细胞在血管内凝集破坏，形成溶血性输血反应，严重者可危及病人的生命。说明盐水介质法虽操作简便，但敏感性低，只能检测出血清中存在的完全抗体及ABO血型不合引起的凝集，无法检测血清中存在的不完全抗体，这也是其逐渐被其他方法取代的主要原因。对有异体血液输入史(特别是有过输血反应的病人)、妊娠免疫病史和器官移植史者不宜使用本法。但此方法材料易得价廉，操作方便简单，适合用来初检。
凝聚胺介质法是凝聚胺分子带有高价阳离子的多聚季铵盐，溶解后带有很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，有利于红细胞聚集，低离子强度溶液也能降低红细胞的Zeta电位，可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除凝聚胺的正电荷，由IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不会散开，出现凝集，产生阳性结果；如血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使非特异性凝集消失。本试验2例含IgG不规则抗体的标本在加入解聚液仍有凝集，表现为阳性结果。此结果和盐水介质法对比表明该法操作简便、快速、敏感性强、结果准确可靠，能检测除天然IgM类血型抗体以外的其他类型抗体及不规则抗体，被广泛采用，适用于各类输血病人的配血。但操作要求相对较高，配血过程中加样比例、反应时间、离心速度，试验温度、细菌污染等都会导致出现假阳性结果，结果观察也带有一定的主观性，特别从凝集到不凝集过程的把握，因操作者的不同有判断差异，部分阳性结果会随着放置时间延长而消失，工作中必须要认真、严谨、快捷。本实验出现的假阳性4例应将血结果置于37℃水浴箱温浴之后反复观看找出原因分析。
微柱凝胶法是利用葡萄糖凝胶具有分子筛效应或亲和效应，将红细胞和血清加在凝胶的表面发生反应，离心后凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停留在凝胶微柱的表面或凝胶中，发生凝集反应，可判为凝集反应阳性；反之，红细胞停留在凝胶微柱底部，证明未发生凝集反应，则可判为凝集反应阴性。本实验2例含IgG不规则抗体标本中的红细胞悬浮于微柱凝胶表面，表现为阳性结果。此结果和前两种配血法对比，具有以下特点:①检测项目齐全、应用广(包括常规血型鉴定、特殊血型检查、交叉配血、抗体筛检、直接抗球蛋白及间接抗球蛋白试验等)。②灵敏度高，特别在交叉配血时，能捕捉到非常微弱的抗原抗体反应。③特异性强，试剂中含有抗人球蛋白，能促进红细胞的特异性凝集。④重复性好，采用标准化定量操作，最大限度减少操作人员的随意性。⑤客观性好，由于采用了凝胶分子筛技术，将凝集红细胞和游离红细胞分开，使结果一目了然，避免了显微镜下主观判断的影响。⑥可节省样品红细胞、血清和试剂，检测结果可以较长时间保存。⑦操作方式可以采用手工、半自动及全自动模式 ，灵活方便。尤其是自动化操作，可减少人为误差，保障安全输血，并可实现计算机管理。但是成本较昂贵，需要专用的孵育器及离心机，难以普及推广应用。
综上所述，可根据三种方法的不同特点及优点进行适当使用。例如盐水介质发配合凝聚胺法交叉配血可用于急诊受血者；用微柱凝胶法进行交叉配血复查后若发现有阳性结果标本，再用两种方法进行测评，这样既能保证临床用血的安全性，也能减少输血反应情况的发生。三种方法不能互相取代，且缺一不可。输血工作者在工作中需细心、谨慎、认真的进行操作，以提升输血配血的安全性，保证临床输血安全。
参考文献
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论文作者:徐立刚
论文发表刊物:《中国结合医学》2019年10期
论文发表时间:2019/12/10
标签：红细胞论文; 抗体论文; 凝胶论文; 阳性论文; 盐水论文; 血清论文; 血型论文; 《中国结合医学》2019年10期论文;