（1深圳市龙华新区人民医院 广东 深圳 518000）
（2化州市妇幼保健院 广东 化州 525100）
【摘 要】目的：定量测定分析溶血对18项血清常规生化指标检测结果的影响，探讨其干扰机制。方法：选取我院门诊健康体检正常者300例作为研究对象，采用日本（希森美康）SYSMEX-XT4000i全自动血细胞分析仪测定溶血标本其血清血红蛋白（Hb）的含量作为判定溶血的程度。采用德国罗氏P800型全自动生化分析仪检测正常血清标本和溶血标本中ALT、AST、LDH、GGT、CHOL、TG、Scr、ALP、GLU、SUA、CK、BUN、TB、DB、TP、ALB、K＋、Cａ２＋１8项生化指标的含量。结果：轻度溶血(0.3g/L～3g/L)，血清中CHOL、CK、ALB增高（P＜0.05）；AST、 LDH 、K+ 显著升高（P＜0.01）；GGT、ALP 、TB、DB降低（P＜0.05）；ALT、TG、Scr、GLU、BUN、TP、SUA、Ｃａ２＋无显著性变化（P＞0.05）。重度溶血（Hb﹥3.0/L），血清中CHOL、ALB、TP增高（P＜0.05）；ALT、AST、LDH、CK、K＋显著升高（P＜0.01）；GGT、TB、降低（P＜0.05）；ALP 、DB显著降低（P＜0.01）；TG、Scr、GLU、BUN、SUA、Ｃａ２＋无显著性变化（P＞0.05）。结论：针对临床血液标本溶血前后及不同溶血程度生化检测结果进行定量测定分析, 比较标本溶血对不同检测项目影响程度的大小,探讨其干扰机制,对提高临床生化检验的准确性和可靠性具有重要参考价值。
【关键词】溶血；定量测定；生化指标；影响分析
【中图分类号】R446.12+2 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）5-0205-01
溶血，是指血液标本在采集、运送、保管和分离过程中，因红细胞膜破裂，细胞内血红蛋白等成分释放到血浆或血清中的现象。判定标本有没有溶血，较严格的定义是检出血红蛋白的浓度，对于血浆超过20 mg/L 或血清超过50 mg/L 即认为标本溶血[1] ，但一般的定义是血浆或血清中检出血红蛋白的浓度超过0.3g/L（18.8 μmol/L）称为溶血，这也刚好是视觉上检出粉红色调的界限[2]。标本溶血是临床日常生化检验面临的较为常见的问题之一, 溶血后细胞内物质进入到血清，可以使血清部分检测指标的浓度发生改变，导致检验结果升高或降低，从而对临床检验报告的准确性造成的影响较大[3]。同时，由于溶血还可干扰测定过程及比色，溶血的程度与检测的指标变化程度存在一定的相关性。为此，本研究选择门诊健康体检正常者血液标本，对溶血前后及不同溶血程度血清生化检测结果进行定量测定分析, 比较标本溶血对不同检测项目影响程度的大小, 探讨其干扰机制, 为减少标本溶血对生化检验结果的影响,提高临床生化检验的准确性和可靠性，提供一定的理论参考依据和技术支持。
1 研究对象与方法
1.1研究对象
选取我院门诊健康体检正常者300例作为研究对象，所有血液标本均来自于空腹肘静脉血共3ml，分别置于4支一次性干燥负压试管各1.5 ml。其中2支标本做冷冻处理，放置于-20 ℃低温冰箱冰冻，取出融化，离心分离血清，通过冷冻时间不同，造成溶血程度差异;根据血红蛋白浓度确定轻度溶血为（Hb0.3～3.0g/L）、重度溶血为（Hb﹥3.0/L）。另2支标本置室温放置10min后离心取血清作为正常对照，无肉眼可见的黄疸、脂浊和溶血。
1.2研究方法
采用日本（希森美康）SYSMEX-XT4000i全自动血细胞分析仪测定溶血标本其血清血红蛋白（Hb）的含量作为判定溶血的程度。采用德国罗氏P800型全自动生化分析仪检测正常血清标本和溶血标本中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、γ－谷氨酰转移酶（GGT）、总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、肌酐（Scr）、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖（GLU）、血尿酸（SUA）、肌酸激酶（CK）、尿素氮(BUN)、总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、K＋离子、Cａ２＋离子等１8项生化指标的含量。每份标本检测3次，取均值。
1.3 统计学分析
样本检测所得数据均采用Excel 2003进行数据录入，采用SPSS13.0统计软件进行数据处理，计量资料以（ｘ±ｓ）表示，两组间样本均数比较采用t检验。
2 研究结果分析
2.1研究结果
表1 标本未溶血、轻度溶血、重度溶血状况下测得的结果均值
由表可见，溶血程度不同，对于生化检测项目会产生不同的干扰：
轻度溶血(0.3g/L～3g/L)，血清中CHOL、CK、ALB增高（P＜0.05）；AST、 LDH 、K+ 显著升高（P＜0.01）；GGT、ALP 、TB、DB降低（P＜0.05）；ALT、TG、Scr、GLU、BUN、TP、SUA、Ｃａ２＋无显著性变化（P＞0.05）。
重度溶血（Hb﹥3.0/L），血清中CHOL、ALB、TP增高（P＜0.05）；ALT、AST、LDH、CK、K＋显著升高（P＜0.01）；GGT、TB、降低（P＜0.05）；ALP 、DB显著降低（P＜0.01）；TG、Scr、GLU、BUN、SUA、Ｃａ２＋无显著性变化（P＞0.05）。
2.2原因分析
2.2.1 红细胞内AST 浓度是血浆的38 倍[4], LDH浓度是血浆的180倍[5]，K+浓度差较大，是血浆的22 倍,因此轻微溶血就可导致结果增高。红细胞内ALT、ALB浓度高于血浆中，随着溶血程度的增加，使得结果出现增高的趋势。同时，血红蛋白对蛋白质的干扰（释放到血清中的有色物质Hb中的珠蛋白）使TP、TB、ALB的分析浓度趋于增大，高于实际浓度。红细胞中不含CK, 但含有大量腺苷酸激酶(AK)[6],可干扰CK测定中的酶偶联反应体系, 引起CK 结果升高，同时，红细胞中CK的活性是血浆的15倍[7]，这也可能是导致其结果升高的因素之一。
2.2.2 对于ALP,GGT,由于红细胞内含量低, 溶血对标本的稀释作用及对反应体系氧化剂的消耗, 造成负干扰；溶血对TB ,DB产生负干扰, 是由于血清胆红素的测定临床多采用改良J2G 法, 而溶血后HGB 可竞争性地抑制胆红素与重氮试剂的偶氮反应, 使测定结果低于真值[8],但轻度溶血对TB影响较轻, 可能是由于HGB 在测定波长处的光吸收作用所致。因此, 应选择合适的测定波长如600 nm ，以避开其吸收峰或采用双波长法减少血红蛋白的干扰, 近年来实验室采用钒酸盐方法测定胆红素, 其原理是钒酸盐将胆红素氧化为胆绿素。采用双试剂及双波长法, 通过测定其吸光度变化来计算胆红素含量, 消除HGB 的干扰。
2.2.3 溶血对Scr无明显干扰；本研究结果中UA虽无显著性变化(P＞0.05),但是，随着溶血程度的增高，出现降低的趋势。提示重度溶血UA检验结果有降低的可能性。有文献报道，这主要是溶血后红细胞内含物谷胱甘肽可竞争尿酸检测反应体系中过氧化氢而导致结果偏低[9] 。本研究结果未发现后Cａ２＋、GLU、BUN、TG 指标出现显著性改变(P＞0.05)。
2.2.4结果讨论 探讨溶血会引起一些生化项目结果假性升高或降低，对检验医师减少失误和误差, 提高检验结果的准确性, 更好地服务于临床有着重要的意义。通过实验研究发现，溶血程度不同的标本对常规化学检验的不同检测项目产生不同的影响及干扰。从本研究结果及相关文献资料提示，溶血标本不适合AST、LDH 、K+、CK的检测，应舍弃。其他由于溶血影响结果的指标，在紧急情况下，作为诊断的参考依据时，一定要结合临床检验医师的临床经验及循证医学的结果做出合理推断，本研究在临床实际工作中可以为标本检测结果分析提供一定的参考依据，避免判断的误差。
3 结论
客观定量测定分析标本溶血对常规生化检验结果的干扰及影响，并采取有针对性的防控措施，对临床诊断具有十分积极的作用。本研究针对临床血液标本溶血前后及不同溶血程度生化检测结果进行定量测定分析, 比较标本溶血对不同检测项目影响程度的大小,探讨其干扰机制,为减少标本溶血对生化检验结果的影响,提高临床生化检验的准确性和可靠性，提供一定的理论依据和技术支持，并可为临床医生正确分析判断溶血标本检测结果提供参考。
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论文作者:吴建芬1,吴春兰2
论文发表刊物:《河南中医》2015年5月供稿
论文发表时间:2015/10/13
标签：标本论文; 血清论文; 生化论文; 干扰论文; 程度论文; 血红蛋白论文; 血浆论文; 《河南中医》2015年5月供稿论文;