陈淑琼
（湖北省咸宁市结核病防治院检验科 437100）
【摘要】目的 对2013年5月8日门诊出现一例假性全血细胞减少的原因进行分析，了解造成血细胞分析仪血液分析结果偏低的原因，最大限度减少人为因素对血细胞计数结果产生影响，做好分析前质量控。方法 首先检查检验结果全血偏低的病人血样,发现采血量不足1ml，故重新采集病人血样，仍使用含EDTA—K2液体抗凝剂的真空采血管，采血量为1ml，再用ABX MICROS 60-OT自动三分类血细胞分析仪分析。结果 各项指标均接近正常。再取第二次采集的病人血样制备血涂片镜检，未发现异常。结论 在血常规分析的过程中，标本的正确采集十分重要，在使用含液体抗凝剂的真空采血管时，一定要充分考虑EDTA—K2浓度对结果的影响，严格控制采血量（≥1ml)，防止因血液与抗凝剂比例失调造成检验结果的异常。
【关键词】 ABX MICROS 60-OT自动三分类血液细胞分析仪 EDTA—K2浓度 假性全血细胞减少
【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）05-0053-02
血常规检查是临床疾病诊断和治疗的重要参考指标之一，分为手工法和血细胞分析仪法。血细胞分析仪法具有同时测定PLT、MPV及PDW 等多个指标的优点且快速准确，适用于临床。[1]虽然全自动血细胞分析仪在临床检验中的应用越来越广，但由于仪器检测受多种因素的影响，计数结果会产生一定的误差。在临床实际工作中，经常遇到病人两次相近的血液分析其结果之间存在一定的差异。[2]这种差异可能是由于各种生理因素，但还可能是因为标本采集、贮存等原因对血细胞分析仪计数结果产生影响。本文就近期门诊出现的一例假性异常血象的原因进行了分析，引起对EDTA—K2浓度对结果影响的重视，严格控制采血量，以保证检验结果的准确可靠。
临床资料
2013年5月8日，有1例标本结果引起关注：白细胞为2.80×109／L，红细胞为2.93×1012／L，血小板为90×109／L，血红蛋白为80g／L。检查静脉血样发现采血量不足1ml（约0.2ml左右）,重新采集静脉血,采样量为1ml,再用三分类血细胞分析仪进行血液分析,结果接近正常。血涂片镜检可见红、白细胞的分布、形态及着色均正常，且无异常细胞出现；血小板数量不少且分布正常。后经复查确认初次检验结果为采血量不足所致的假性全血细胞减少，因采血量不足致血液与抗凝剂比例失调可能为主要原因。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
法国产ABX MICROS 60-OT自动三分类血细胞分析仪；显微镜，瑞氏染液。
1.2 测定方法
用ABX MICROS 60-OT自动三分类血细胞分析仪检测病人的第二份血样，同时取该血样制备血涂片镜检，将结果与第一份血样的检测结果相比较，分析前后两次结果有显著差异的原因。
2 结果
两份血样血常规检验主要指标对比
注：患者为57岁男性，以上各项指标均以男性参考值为参照。
取第二份血样制备血涂片镜检，见红、白细胞的分布、形态及着色均正常，且无异常细胞出现；血小板数量不少且分布正常。
3 讨论
第一份血样与第二份血样相比，其血常规检验的几项主要指标（WBC、RBC、BPC、HB）相对误差均大于35%，其中以BPC为著，其后依次为RBC、HB、大细胞群细胞和WBC。经询问，发现病人临床表现与血象不符，检查血样后考虑采血量不足可能为主要因素，但不排除还有其他原因的可能。
重新采集足量的血样（1ml）上机检测，同时辅以血涂片镜检确认，仪器分析的结果接近正常，血涂片镜检的结果与仪器检测的结果相符。结合问诊和血涂片镜检的结果，可以排除病人本身全血细胞减少的可能。两份血样来自同一天的同一名患者，仅因采血量不同产生如此大的差异，可见抗凝剂的浓度在血常规检验中是相当重要的，必须引起足够的重视。
全自动血液分析仪从设计上要求使用抗凝静脉血来检测。[3]在目前的众多抗凝剂中，EDTA盐（EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3）是对白细胞形态和血小板影响相对较小的抗凝剂，一般1.0－2.0mg可阻止1ml血液凝固。根据国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐EDTA—K2为全血细胞计数的抗凝剂，推荐浓度为1.5—2.2mg／ml[4]。用于血常规分析的真空定量采血管内含有恒量的EDTA—K2，多数情况下，血样的质量取决于血液和抗凝剂的比例。多数专家建议，在制备全血标本时，应使用定量的含EDTA盐的真空采血管采集静脉血并严格控制采血量。[5]血液比例过高时，由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块的可能性增加，微凝血块可能阻塞仪器，同时影响一些检验指标。
ABX MICROS 60-OT是一种半自动的三分类血液分析仪，检测效率高，全血用量仅需l0ul,重复性、实验准确度与精密度均能达到仪器规定的性能指标。它是以电阻抗为原理的三分群自动血细胞分析仪。电阻抗法白细胞分群只是根据体积的大小分群。第一群(35-90f1)是小细胞区，主要是淋巴细胞；第二群(90-160f1)是中间细胞区，包括单核细胞、嗜碱嗜酸细胞，当核左移或白血病时，可有各阶段幼稚细胞及白血病细胞出现于此区；粒细胞区位于第三群(160fl以上)。[6]
稀释液的使用情况如下：WBC标本由l0ul全血加上2.5ml的稀释液混匀稀释为l：250，计数前再加入0.52ml溶血素，最终稀释倍数为l：300。RBC、PLT由30ml稀释比率为l：250的稀释液中再加入2.5ml稀释液，最终稀释到1：15000倍的溶液。如果血液比例过低，抗凝剂相对过剩，EDTA的浓度过高，中性粒细胞会肿胀、分叶消失，血小板会在其诱导下发生聚集。根据血液分析仪的血小板计数原理，红细胞聚集可使血小板受限引起血小板计数假性降低，过量的大血小板可超过血小板计数的高限域值而不被血小板计数，引起血小板计数假性降低。[7]故这种EDTA依赖性全血细胞减少应该受到广泛重视，这一点在用自动血细胞分析仪时尤为重要。
造成假性全血细胞减少的原因复杂，临床上出现静脉抗凝血检测血细胞显著减少的病例时首先应检查标本是否合格，包括采血是否顺利，血量是否足够等。血样不合格时应重新采集合格血样进行复查，若仪器复查结果正常且结合临床检查又无相应的症状和体征时，应立即考虑EDTAK2所致假性全血细胞减少的可能，并辅以血涂片镜检确认，必要时还要用手工方法计数做对照。
由该病例可见在血常规检验乃至所有实验室检查项目中做好检验前质量控制的重要性，严格说来，由于标本不合格得出的异常检验结果会导致误诊。门诊检验要求迅速准确，但采血不畅或因患者原因停止采血的情况时有发生，此时检验人员应和患者沟通，建议其重新采血复查，经复查确认检验结果正确时再将检验报告发出。日常工作中要足够重视采血量不足致血液与抗凝剂比例失调而严重影响血细胞计数结果引起的误差。严格执行操作规程。有特殊情况发生时应及时采取补救措施，例如某些病人采血量过少时，可改用装有,EDTA-K2粉剂的离心管，放置15分钟后再检测，最大限度地减少人为因素对检验结果造成的影响。
参考文献
[1] 曾照芳,洪秀华.临床检验仪器[M].北京：人民卫生出版社，2007：100
[2] 曾静，程多智．不同存放时间对血液分析结果的影响.郧阳医学院学报，2003；22(2)：100
[3] 陈高远，周文良．用静脉血做全血细胞计数势在必行．贵州省检验医学工作动态，2004；19(2)：12-13．
[4] 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程第三版.南京：东南大学出版社，2006：137-142
[5] 章小红.采血量不足对全血细胞计数结果的影响.安徽医学，2008；29（2）：194
[6] 谢振纪.ABX micros 60三分群血细胞分析仪白细胞分类与手工镜检法比较.医学信息，2006；19(3):481
[7] 刘健．不同抗凝剂和取血方式影响血小板计数准确性的探讨[J]．右江医学，2002；30(6):520．
论文作者:陈淑琼
论文发表刊物:《医药前沿》2014年第5期供稿
论文发表时间:2014-5-5
标签：血细胞论文; 血样论文; 血小板论文; 分析仪论文; 涂片论文; 血液论文; 细胞论文; 《医药前沿》2014年第5期供稿论文;