湖南省张家界市人民医院 湖南张家界 427000
摘要：目的：观察分析结核感染T细胞斑点试验诊断在肺结核诊断中的应用价值。方法：择取我院感染科在近期接诊的37例患者组成A组，另择取同期接诊并明确诊断为肺结核的36例患者组成B组，对全部患者进行结核感染T细胞斑点试验、皮肤结核菌素试验、结核抗体和痰液或肺泡灌洗涂片，比较各类检查结果。结果：结核感染T细胞斑点试验的敏感性及特异性均高于皮肤结核菌素试验，阳性率比较显示，结核感染T细胞斑点试验的阳性率也明显高于其他检查。结论：结核感染T细胞斑点试验是一种简单易行的诊断手段，应用该种诊断对肺结核进行诊断具有良好的稳定性，值得临床推广应用。
关键词：结核感染T细胞斑点试验；肺结核；诊断价值
肺结核是一种严重的公共卫生问题之一，据世界卫生组织统计显示，全球约有1/3的人口受到结核分枝杆菌感染。在我国，肺结核的发病率较高，位居世界第二，且近年来其发病率有逐年递增的趋势。既往肺结核的诊断多采取结核抗体、结核菌素皮试及影像学检查进行，其敏感性及特异性不高，易出现误诊、漏诊现象，从而导致患者错过最佳的临床治疗时机，进而加重患者的病情甚至引起患者死亡。结核感染T细胞斑点试验是一种通过检测是否存在结核感染T淋巴细胞后分泌的特异性细胞因子干扰素来明确患者是否存在结核感染的诊断手段[1]，目前该技术手段在临床应用较为普遍。本文就结核感染T细胞斑点试验在肺结核诊断中的应用价值进行了深入研究，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料：择取我院感染科在2015年5月至2017年5月间接诊的37例非结核呼吸系统疾病患者组成A组，该组中男性20例、女性17例；者年龄21岁到62岁不等，平均年龄（50.5±15.7）岁；患者疾病情况，其中肺炎11例、慢支炎19例、肺脓肿7例。另择取同期明确诊断为肺结核的36例患者组成B组，该组中男性19例、女性17例；患者年龄23岁到64岁不等，平均年龄（51.3±14.9）岁；本组患者均符合肺结核诊断标准，且影像学检查及痰涂片显示阳性，同时伴有低热、咳痰、咳血等相关症状及体征。组间在性别、年龄方面比较，无明显差异，具有可比性（P>0.05）。
1.2方法：分别对两组患者实施结核感染T细胞斑点试验，皮肤结核菌素试验，结核抗体和痰液或肺泡灌洗涂片检查。其中结核感染T细胞斑点试验采取上海复兴公司提供试剂盒，操作过程严格按照说明书进行。采集患者外周静脉血液离心分离外周单核细胞，并通过计算机辅助成像分析系统进行斑点计数，对阳性对照孔数低于6，总检测孔数-阴性对照孔数大于或等于6的可判断标本为阳性；对阴性对照孔点数大于或等于6，总检测孔点数是阴性对照孔点数2倍的可判断为阳性[2]。皮肤结核菌素试验，于患者前臂内侧注射0.1ml结素纯蛋白衍生物，72小时后观察是否出现硬结，对硬结平均直径小于5mm者可判定为阴性，对硬结大于5mm或皮试区出现水泡或坏死的判断为阳性。结核抗体试验，采取上海奥普生物医药有效公司生产的结核分歧抗体胶体金法诊断试剂盒进行，操作方法及诊断标准均参照试剂盒说明书进行。
1.3统计学处理：数据应用统计学软件SPSS16.0进行，检验方式采取X2检验，组间比较采取t检验，以P<0.05表示具有统计学意义。
2结果
表1：表示各方法数据的比较情况[n（%）]
结核感染T细胞斑点试验的敏感性及特异性均高于皮肤结核菌素试验，阳性率比较显示，结核感染T细胞斑点试验的阳性率也明显高于其他检查（P<0.05），详见表1。
注：与其他检验方法比较，*P<0.05具有统计学意义。
3讨论
近年来，在我国肺结核感染的几率出现了明显的升高趋势。肺结核是一种严重的传染性疾病，及时有效的治疗是至关重要的，但实际上肺结核患者常会因误诊或漏诊而错过最佳的治疗时机，从而加重病情，甚至危及患者的生命安全。因此，及时、明确的诊断是至关重要的。肺结核的感染源头及病理类型较为复杂，患者临床表现差异性较大，因此早期诊断难度较大。酶联免疫斑点试验是一种高敏感性、高特异性的检验方法，具有操作简单、经济要求低，并可进行高通量筛查等特点[3]，目前广泛应用与癌症、自身免疫疾病及过敏性疾病的研究中。
结核感染T细胞斑点试验与酶联免疫斑点发技术原理一致，该种方法目前普遍应用于临床肺结核的诊断。结核感染T细胞斑点试验是先将无毒、不含内毒素和亲和力高的单克隆抗体提前置于贴有聚偏氟乙烯膜或硝酸纤维膜的96孔微孔板上。再将经过抗原刺激后的免疫细胞加入微孔，在一定条件和特异性抗原刺激下，捕获T细胞分泌的细胞因子，并洗掉该结合后的成分，在使用被标记的第二抗体结合被捕获的细胞因子。最后将生物素与酶标亲和素结核，通过显色反应形成局部斑点，从而对应每个分泌细胞因子的细胞。结核感染T细胞斑点试验技术通过计算斑点的数量推测体内结核杆菌产生反应的效应T细胞是否存在，从而进行诊断[4]。因此，无论患者是否出现症状或症状是否典型，都能通过检测效应T淋巴细胞水平来确定患者是否存在结核感染。本次研究中对目前临床常用的几种肺结核诊断方法进行了研究，其中皮肤结核菌素检验的假阳性率较高，其仅能表示患者曾经有过结核分枝杆菌感染或对结核杆菌存在免疫力。而痰液或肺泡灌洗液涂片的特异性很高，但敏感性较低，对潜伏性肺结核的筛查意义不大。本次研究显示，结核感染T细胞斑点试验的阳性率83.33%明显高于其他检查，同时其特异性与敏感性也较高，此结果与国内学者报道相似[5]，提示结核感染T细胞斑点试验诊断肺结核意重大。
综上所述，笔者认为，结核感染T细胞斑点试验具有操作简单、敏感度高等优点，可快速准确的诊断肺结核，值得临床推广应用。
参考文献：
[1]彭春仙，郑晓燕，钱峰，等.T细胞斑点试验技术在结核病诊断方面的应用[J].中国卫生检验杂志，2011，11（4）：918-920.
[2]乐军，梁莉，李苏辉.酶联免疫斑点试验快速诊断结核分枝杆菌感染的临床应用价值[J].中华检验医学杂志，2012，29（11）：1005-1008.
[3]Kalyuzhny AE.ELISPOT assay on membrance micro-plates[J].Methods Mol Biol，2009，536：355-3 65.
[4]付茂英，顾雪峰，倪慧慧.结核抗体对肺结核诊断价值[J].中华实用诊断与治疗杂志，2008，22（9）：685-686.
[5]朱国勇.结核感染T细胞斑点试验诊断肺结核临床价值探讨[J].检验医学与临床，2013，10（14）：1822-1823.
论文作者:向薛名
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年7月21期
论文发表时间:2018/9/4
标签：结核论文; 斑点论文; 肺结核论文; 细胞论文; 患者论文; 结核菌素论文; 特异性论文; 《中国误诊学杂志》2018年7月21期论文;