强永在
（内蒙古医科大学附属医院药剂部 内蒙古 呼和浩特 010050）
【摘要】目的：制备板蓝根口服液，并进行定量分析，对各项指标进行检测。方法：采用水提醇沉法制备板蓝根口服液，薄层色谱法进行定性鉴别，高效液相色谱法进行定量测定。结果：腺苷在4.14～33.12mg/ml内线性良好，平均回收率为99.16%，RSD为0.46%。 结论：所建立的定量方法分离效果好，灵敏度高，重现性好，简便、准确，可以作为板蓝根口服液中腺苷的含量测定方法。
【关键词】板蓝根口服液 质量标准
【中图分类号】R286 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）27-0030-02
The preparation and the quality inspection of Banlangen oral liquid Qiang Yongzai.
Pharmacy Department of the Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, Inner Mongolia Hohhot 010050
【Abstract】Objective To prepare Banlangen oral liquid, perform quantitative analysis and tests. Methods Water extraction and ethanol precipitation was used to prepare Banlangen oral liquid, Thin layer chrom atography (TLC) was used for qualitation and identification. HPLC was used to determine the content. Results The polysaccharides contents showed a linear property with in a range of 4.14 to 33.12mg. The recovery rate was 99. 16%, and RSD was 0.46%. Conclusion This method is simple and feasible with stable results, which can be used to detect the content of polysaccharides in the Banlangen oral liquid.
【Key words】Banlangen oral liquid; Quality standard
板蓝根口服液由板蓝根单味药组成，具有清热解毒、凉血功效。临床上常用于治疗流感、扁桃体炎、腮腺炎等。文献有用HPLC法测定靛蓝、靛玉红的报道[1-2]，但靛蓝、靛玉红为脂溶性成分，而本制剂采用水提醇沉工艺，难于客观表征其内在质量， 腺苷是板蓝根所含的一种天然成分，具有抗凝血、扩张冠状动脉、松弛支气管平滑肌、镇静中枢神经和抗心率不齐的作用[3]。腺苷性质比较稳定，具水溶性。因此，参照有关文献[4-5]，试采用高效液相色谱法测定板蓝根口服液中腺苷的含量，结果准确，操作方便，可用于该制剂的质量控制。现将实验开展情况及结果作一介绍。
1.仪器与试药
岛津SCL-10Avp 高效液相色谱仪；甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）；其他试剂均为分析纯；水为蒸馏水；腺苷对照品（批号为110879-200202，含量测定）由中国药品生物制品检定所提供；板蓝根对照药材（产地：河北，批号：140311）。
2.板蓝根口服液的制备
将板蓝根饮片500g，加8～10倍量水，煎煮2次，第一次2h，第二次1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.1，放冷至室温，加入乙醇至含醇量为60%，静置12h，取上清液过滤，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.10的清膏，加甜菊素0.4g，搅匀，加水调整总量至1000ml，过滤，灌装（10mL/支），灭菌，罐装，即得。按此工艺制备3批板蓝根口服液。
3.质量标准研究
3.1 定性分析
3.1.1供试液的制备 板蓝根口服液成品液，作为供试液。
3.1.2对照药材液的制备 取板蓝根对照药材5g，加水50ml，煎煮1h，滤过，滤液加乙醇使含乙醇量为60%，静置。取上清液，回收乙醇，浓缩至10ml，作为对照药材溶液。
3.1.3薄层鉴别 按照薄层色谱法（中国药典2015年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液2～6μL，对照药材溶液2～4μL，分别点于同一含0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水（4:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷2%茚三酮乙醇溶液，于105℃烘约数分钟。结果供试品与对照药材色谱在相应的位置上显相同颜色的斑点。
3.2 相对密度及pH测定
相对密度按相对密度法（中国药典2015年版一部附录Ⅶ A比重瓶法）测定，每批口服液平行测定3次，记录结果。pH测定使用酸度计对口服液进行pH 测定， 每批口服液平行测定3次，结果见表1。
3.3 定量分析
3.3.1色谱条件
色谱柱：DiamonsidT M C18柱（5μm，4.6mm×200mm）；流动相：硫酸盐缓冲液（pH6.5）{取0.01mol/L硫酸二氢钠68.5ml与0.01mol/L硫酸氢二钠31.5ml混合}—甲醇（17:3）；流速：1mL/min-1；检测波长：260 nm；柱温：30℃；进样量：20μL。理论塔板数按腺苷峰计算应不低于4000。
3.3.2对照品溶液的制备 精密称取腺苷对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含50μg的溶液，取上述溶液适量加流动相制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得。
3.3.3供试品溶液的制备 精密吸取本品1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
3.3.4标准曲线的绘制 精密称取腺苷对照品10.6mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声溶解并稀释至刻度，遥匀，分别精密吸取1、2、3、4、6、8mL，置50mL量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，得腺苷对照品系列标准浓度的溶液，按上述色谱条件，分别进样20μL，测定峰面积，以峰面积积分值（y）为纵坐标、腺苷量（x）为横坐标绘制标准曲线，计算，得回归方程。结果表明腺苷溶液在4.14～33.12μg/mL之间有良好的线性关系。回归方程：Y=915006X-326170，R2=0.9991。
3.3.5精密度试验 精密吸取腺苷对照品溶液20μL在同一实验条件下，重复进样5次，RSD值为0.47%（n=5）。结果表明本方法精密度好。
3.3.6重复性试验 取同一批号样品，精密称取6份，按3.3.3项制备方法制备，按3.3.1项的色谱条件测定，结果：腺苷的峰面积的RSD为1.82%（n=6）。说明本方法重现性良好。
3.3.7稳定性试验 取同一批号供试样品5份，按上述（3.3.3供试品溶液的制备方法），在常温下制备成供试液， 在常温下放置12h，每间隔2h测定1次，连续共测定6次， RSD为1.5%， 结果表明样品溶液中的腺苷，在12h内稳定性良好。
3.3.8回收率试验 取已知含量的板蓝根口服液共6份，分别精密加入一定量的腺苷对照品，混匀，按（3.3.3样品溶液的制备）项下制备方法，在腺苷的线性范围内分别制成低、中、高3种不同浓度的溶液。（每一种浓度2份）分别进样，测定腺苷的回收率，其结果见表2。
4.讨论
目前，板蓝根及其制剂的质量控制多以靛蓝、靛玉红的含量测定为指标，而靛蓝、靛玉红是脂溶性成分，不能被现行水提醇沉工艺提取出来，从而影响板蓝根口服液的临床疗效。故我们选择了含量较高、化学稳定性较好的腺苷作为板蓝根口服液的含量测定指标。
本文建立了板蓝根口服液中腺苷的定量分析方法，方法操作简单，重复性好，准确性高。为板蓝根口服液的质量控制提供了一个准确而可靠的方法。
【参考文献】
[1]倪亚娜,孙立丽.HPLC法测定板蓝根颗粒中靛玉红的含量[J].中国医药指南,2012(35):76-77.
[2]王金鹏,孙翠萍,林海霞,等.HPLC测定复方南板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红的含量[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(21):128-130.
[3]许润春,杨明,苏艳桃.HPLC测定板蓝根中腺苷含量[J].中成药,2005,27(6):742-743.
[4]肖春霞,黄晓婧,文永盛,等.HPLC法同时测定板蓝根颗粒中腺苷和(R,S)-告依春的含量[J].中国药物评价,2017,34(02):81-85.
[5]储继红,吴婷,许美娟,等. UPLC-MS/MS法同时测定蓝芩口服液中鸟苷、腺苷和胞苷的含量[J].药物分析杂志,2017(12):2167-2172.
作者简介：强永在,（1978.02-）男,主管药师,硕士.
论文作者:强永在
论文发表刊物:《医药前沿》2018年27期
论文发表时间:2018/11/21
标签：腺苷论文; 板蓝根论文; 口服液论文; 溶液论文; 含量论文; 精密论文; 色谱论文; 《医药前沿》2018年27期论文;