云南汉族、彝族躯体攻击行为与MAOA μ-VNTR多态性的关联性分析
聂爱婷1），计艾岑2），胡利平2），张秀峰2），刘林林2），李佳珏2），聂胜洁2）
（1）淄博市医疗急救指挥中心，山东淄博 255095；2）昆明医科大学法医学院，云南昆明 650500）
［摘要］ 目的 探讨云南汉族、彝族人群躯体攻击行为（aggressive behavior，AB）与单胺氧化酶A 基因（Monoamine oxidase-A，MAO-A）启动子区域30bp-VNTR（MAOA μ-VNTR）多态性的关联性，以及其与文化程度、婚姻状况、吸烟、饮酒4 个潜在风险因素之间是否存在交互作用。方法 对495 例男性躯体攻击行为者和527 例男性健康对照，应用荧光标记引物结合毛细管电泳分型技术进行MAOA μ-VNTR 基因分型。运用SPSS 软件进行数据统计。结果 云南汉族、彝族群体的MAOA μ-VNTR 多态性与躯体攻击行为无直接相关性（P ＞0.05），且与4 个潜在风险因素之间不存在交互作用；躯体攻击行为的风险因素为有无吸烟史以及低文化程度（P ＝0.001）。结论 云南汉族、彝族群体的MAOA μ-VNTR 多态性与躯体攻击行为不存在相关性；两个群体的躯体攻击行为发生的风险因素为低文化程度和吸烟史。
［关键词］ 法医物证学；躯体攻击行为；关联性分析；MAOA μ-VNTR；多态性
有目的、有意图地伤害或试图伤害另一个体身体或心理状况及破坏其它目标（物体或社会规范）的行为称为攻击行为（aggressive behavior，AB），AB 的极端形式就是暴力[1]。暴力攻击行为是一种复杂的社会行为，既是很多精神疾病的共同特征，又是严重的社会行为问题[2-5]。
单胺氧化酶A（Monoamine oxidaseA，MAOA）是一种位于线粒体外膜和突触前膜的酶类，其催化单胺类神经递质降解的特殊作用决定了它是研究躯体攻击行为的候选基因。研究发现单胺氧化酶A基因启动子区域30bp-VNTR（MAOA μ-VNTR）多态位点，具有降低MAOA 降解外周组织中5-羟色胺、多巴胺及去甲肾上腺素的能力，升高上述神经递质的外周浓度，进而影响个体的精神行为[6-8]。因此本文将选择研究MAOA μ-VNTR 多态性与躯体攻击行为的相关性，分别探讨文化程度、婚姻状况、吸烟史、饮酒史4 个影响因素与MAOA μ-VNTR 基因型对躯体攻击行为的发生是否存在交互作用，为AB 的预防控制，风险预测以及设计相关药物提供理论基础，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究样本
MAOA 基因位于X 染色体上，为方便观察，所有研究对象均选择男性。获得研究对象知情同意并签署知情同意书。
当前的实验实训教学大多数以验证性的为主，而设计性、综合性实验实训极少，验证性实验多是让学生进行简单的插接线或是简单修改程序端口，基本不用思考就可以按照操作步骤完成，之后测量数据和书写实验报告，此类的实验方法会严重挫伤学生的积极性和创新能力的培养，使学生对验证类实验课产生抵触情绪。传统的实验室之间衔接少或无关联，只完成相应课程的知识点的验证和巩固，而设计性、综合性的实验知识少，导致学生掌握基础知识面单一。因此，新的实验教学应该改进教学方法，激发学生学习兴趣，提高学生的创新能力[4]。
1.1.1 攻击组样本 选择采集昆明某监狱因暴力犯罪服刑的个体共495 例，其中汉族315 例，彝族180 例。
针对MAOA μ-VNTR 多态位点，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物，使用Primer Premier 5.0 软件设计引物。采用BIO-RAD T100TM扩增仪（美国BIO-RAD 公司）进行扩增，扩增条件为：95℃5 min；94℃30 s，60℃30 s，72℃40 s，30 个循环；72℃5 min，4℃保存。利用前期课题组已构建的MAOA μ-VNTR 自动分型体系进行分型检测[11]。
入组标准为：（1）18 岁及以上的具有完全的刑事责任能力者；（2）云南户籍的汉族或彝族；（3）入狱罪名符合故意伤害或者故意杀人者；（4）无以下任一病史：酒精依赖史、精神疾病家族病史、药物滥用史或成瘾史；（5）未合并有明显的躯体疾病、神经系统疾病及其他精神障碍；
在云南2 个人群中探讨MAOA μ-VNTR 多态性与文化程度、婚姻状况、饮酒史及吸烟史的交互作用与AB 的相关性，用SPSS 软件进行X2 检验，结果显示均不存在与AB 相关的交互作用，见表2。进一步将4 个潜在风险因素分组，根据有无攻击行为进行分层分析，也未发现与MAOA μ-VNTR 多态性存在交互作用，见表3。
应用SPSS 软件进行拟合优度X2 检验分析云南2 群体攻击与非攻击组之间基因型频率分布差异，同时分析4 个潜在风险因素与MAOA μ-VNTR 基因型对躯体攻击行为的发生的交互作用，运用Logistic 回归评估非攻击组和攻击组对象发生AB 的风险度。
1.2 研究方法
研究过程中Pujol 等[12]发现AB 发生的风险可能与携带低活性等位基因（3R）有关。但Hung 等[13]探讨自杀行为与MAOA μ-VNTR 位点的关联性，结果并未发现两者的相关性。Yang 等[14]对311 例具有反人格障碍的男性患者研究发现反社会人格障碍与MAOA μ-VNTR 位点无关。Linkowska 等[15]对波兰66 例自杀男性，51 例健康对照男性进行基因检测，亦发现MAOA μ-VNTR 位点与自杀行为无关，与本研究结论一致。
本研究在2 个群体中均只观察到3R 和4R 等位基因，用SPSS 软件对MAOA μ-VNTR 的基因型频率进行X2 检验，发现云南2 人群MAOA μ-VNTR 位点的基因型分布在攻击组和非攻击组间中差异无统计学意义（P ＞0.05），见表1。
把两种根本对立的角色放在一起进行描述，对比鲜明，好坏鲜明，使读者很容易分辨出好坏、分辨是非、明确立场。运用这种手法，有利于充分展示双方的矛盾立场，突现事物的本质特征，加强文章的艺术效果和感染力，有效地传递了人物的情感特点，从而把感情抒发得淋漓尽致，凸显人物特点。
1.3 统计学处理
除上述（1）（2）（4）（5）外，入组还需经修订版外显攻击行为量表（modified overt aggression scales，MOAS）测评为无攻击行为，且无官方违法犯罪记录。MOAS 量表共有四个分量表，按严重程度分为0～4 级评分，加权系数分别为1～4，总分为各分量表加权分之和；MOAS 加权总分＜4 分，且表中/体力攻击0 项为0 分纳入非攻击组[9-10]。
2 结果
2.1 MAOA μ-VNTR 多态性与躯体攻击行为的相关性
由于表现良好，公司不仅免除了他的试用期，还与成锐签订了劳动合同。双方签订的最后一份劳动合同的起止日期为2015年7月1日至2019年6月30日。成锐说，由于人手紧张，他在公司当过操作工、干过喷漆工，但从事铆工、点焊等工作时间最长，到离职时已达7年。
表1 MAOA μ-VNTR 位点与躯体攻击行为相关性分析［n（%）］
Tab.1 Correlation analysis between MAOA μ-VNTR and aggressive behavior ［n（%）］
2.2 潜在风险因素与MAOA μ-VNTR 多态性的交互作用研究
1.1.2 非攻击组（对照组）：选择收集昆明某疾病预防控制中心的健康个体，共527 例样本包括366例汉族及161 例彝族。
2.3 4 个影响因素与MAOA 基因分型交互作用的Logistic 回归分析
使用Logistic 回归分析，基因分型和四个影响因素的交互作用与躯体攻击行为的相关性。结果显示无任何交互作用。在剔除交互作用后，发现两个群体犯罪人群的文化程度和吸烟史是其躯体攻击行为发生的两个风险因素（P =0.001），见表4、表5。
表2 MAOA μ-VNTR 位点与潜在风险因素交互分［n（%）］
Tab.2 Interaction analysis between MAOA μ-VNTR and potential risk factors ［n（%）］
表3 云南汉族、云南彝族群体MAOA μ-VNTR 位点与潜在风险因素分层分析［n（%）］
Tab.3 Stratification analysis between MAOA μ-VNTR and potential risk factors in Yunnan Han population and Yi population ［n（%）］
表4 Logistic 回归分析云南彝族、汉族人群MAOA μ-VNTR 与潜在风险因素
Tab.4 Multiple logistic analysis between MAOA μ-VNTR and potential risk factors in Yunnan Yi population and Han population
表5 Logistic 回归分析云南彝族、汉族人群MAOA μ-VNTR 与潜在风险因素
Tab.5 Multiple logistic analysis between MAOA μ-VNTR and potential risk factors in Yunnan Yi population and Han population
3 讨论
3.1 云南汉族、彝族群体MAOA μ-VNTR 多态性与躯体攻击行为关联性
本课题采用Chelex-100 法提取滤纸血卡样本DNA，使用NanoDrop ND-1000 核酸蛋白检测仪（美国ThermoFisher 公司）进行DNA 定量。
田朵最烦小宁说她矫情，在她看来，那不是矫情，那叫精致。她举着被小宁“腰斩”了的牙膏从洗手间出来，“我不用，要用你用，给你！”她想都没想，就一把将手里的牙膏扔了过去。
记录两组产妇麻醉起效时间、至胎儿娩出时间,针刺法测定两组产妇最高阻滞平面,用VAS法评价两组患者镇痛指数,分数越高,镇痛效果越好。
课题前期研究表明云南汉族、彝族群体间的MAOA μ-VNTR 位点基因型频率分布存在显著差异[16]。但本次研究在两个群体中均未发现MAOA μ-VNTR 多态与躯体攻击行为的相关性。考虑AB是一种受遗传控制的复杂性状，今后研究应采用单基因多位点联合分析以及MAOA 基因与其它神经递质基因（多巴胺、5-HT 等）的基因-基因多位点联合分析。
3.2 MAOA μ-VNTR 多态性与潜在风险因素交互作用分析结果
Veronica 等[17]部分学者认为基因-环境交互作用对AB 有影响，在其对欧洲白种人群展开的研究中发现携带3R 等位基因的个体更易发生AB，且研究结论中也支持低文化程度存在对AB 的促进作用。Fergusson[18]对新西兰398 例男性的相关研究中发现具有低活性等位基因（3R）且儿童期有被虐待经历的男性，存在明显的反社会行为。Steve 等[19]对20 745 例高加索男性青少年和15 000 例健康非攻击组进行病例-对照研究，结果为携带高活性MAOA 基因型且遭受过儿童期负性生活事件的男性个体更易出现反社会行为。Enoch 探讨早期生活压力与MAOA μ-VNTR 多态性交互作用对AB影响，选择美国3 182 例男性儿童和2 947 例女性儿童为研究对象，研究结果显示携带低活性等位基因且遭受早期强大压力的个体其发生AB 的风险性更高[20]。但如Haberstick 等[21]学者不支持基因-环境交互作用对AB 存在影响，其选择了3 356 例白种人和960 例黑种人进行相关研究，结果未发现MAOA 基因与儿童期虐待对AB 存在交互作用。Ma 等学者对394 例中国汉族人群进行病例-对照研究结论亦支持不存在交互作用[22]。
而本研究在将4 个潜在风险因素（文化程度、婚姻状况、饮酒和吸烟）分别与在云南汉族、彝族人群的MAOA μ-VNTR 进行交互分析分析后，结果显示未发现交互作用（P ＞0.05）。采用双因素分层分析其结果无统计意义，仅多因素Logistic 回归分析得出文化程度和吸烟史是AB 发生的风险因素，说明AB 可能受多因素影响。为今后的研究提供了方向，可进一步深入了解少数民族的AB 相关基因多态性及基因-环境交互作用。
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Correlation Analysis between the Physical Aggression Behavior of Yunnan Han and Yi Nationalities and MAOA μ-VNTR Polymorphism
NIE Ai-ting1），JI Ai-cen2），HU Li-ping2），ZHANG Xiu-feng2），LIU Lin-lin2），LI Jia-jue2），NIE Sheng-jie2）
（1）Zibo Medical Emergency Command Center，Shandong 255095；2）School of Forensic Medicine，Kunming Medical University，Kunming Yunnan 650500，China）
[Abstract] Objective To analyse the genetic relationship between MAOA μ-VNTR polymorphism and physical aggressive behavior（AB）in Yunnan Han and Yi populations and to test whether there are gene-risk factors interactions in MAOA μ-VNTR polymorphism and degrees of education，marital status，drinking and smoking.Methods Health controls were made between 495 male with AB and another 527 males，MAOA μ-VNTR genotyping was performed using fluorescent-labeled primers combined with capillary electrophoresis typing.Data statistics were performed using SPSS software.Results MAOA μ-VNTR polymorphism has no direct correlation with AB and has no interaction with the four potential risk factors.The risk factors for AB are the history of smoking and low levels of education.Conclusion There was no correlation between MAOA μ-VNTR polymorphism and physical aggression behavior in Yunnan Han and Yi nationalities；the low education levels and smoking history of the two groups are risk factors for physical aggression behavior.
[Key words] Forensic genetics；Physical aggressive behavior；Correlation analysis；MAOA μ-VNTR；Polymorphism
［中图分类号］ R89
［文献标志码］ A
［文章编号］ 2095－610X（2019）10－0175－06
［收稿日期］ 2019－06－11 收稿
［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目（31660310，31860300）；云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项面上项目[2017FE467（-022）]；昆明医科大学科技创新团队项目（CXTD201803）；云南省中青年学术后备人才项目（2018HB104）
[作者简介] 聂爱婷（1989～），女，山东东营人，硕士，护师，研究方向为法医生物学。计艾岑与聂爱婷对本文有同等贡献。
［通信作者］ 聂胜洁，E-mail:497402252@qq.com
标签：法医物证学论文; 躯体攻击行为论文; 关联性分析论文; MAOA论文; μ-VNTR论文; 多态性论文; 淄博市医疗急救指挥中心论文; 昆明医科大学法医学院论文;