(乌鲁木齐市中医院药学部 新疆 乌鲁木齐 830000)
【摘要】目的：建立分光光度法测定山楂中总黄酮含量。方法：以芦丁为标准品，硝酸铝-亚硝酸钠为显色剂，于碱性条件下500nm波长处测定吸光度。结果：通过方法学考察，芦丁在所试的8～48μg/ml范围内有良好的线性关系，其回归方程为C=0.0936A+0.0012(r=0.9989)平均回收率为102.09%。结论：试验表明，方法可靠，数据准确，操作简便易行。
【关键词】山楂；含量测定；方法学考察
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）01-0354-02
山楂为蔷薇科植物山里红、山楂或野山楂的干燥成熟果实[1]。山里红和山楂习称“北山楂”，野山楂习称“南山楂”。全国各地均有栽培，为药食同源植物。山楂性酸、甘、微温，归脾、胃肝经，具有消食化滞，行气散淤的功效，临床用于食滞不化及产后淤阻腹痛等证。近年来临床常以生山楂用于高血压、冠心病及高血脂症的治疗[2]。山楂化学成分复杂，南山楂富含苷类、黄酮类、山楂酸、齐墩果酸、胡萝卜素、鞣质、蛋白质、果糖、脂肪油、熊果酸等。北山楂含酒石酸、枸橼酸、山楂酸、黄酮类、解脂酶、齐墩果酸、熊果酸等[3-4]。据文献报道山楂起消导作用的有效成分主要是有机酸[5]，而黄酮类成分有降血脂、扩张冠状动脉及缓解心绞痛等功效[6]。
1.仪器与试剂
1.1 实验仪器：澳大利亚Cintra—20紫外分光光度仪，梅特勒—托利多仪器厂产十万分之一电子分析天平，浙江产XYJ80—1电动离心机。
1.2 药材由新疆自治区中医医院提供；芦丁标准品(0080-9705)由中国药品生物制品鉴定所提供；实验中其他试剂均为分析纯。
2.实验内容
2.1 样品溶液的制备
精密称取山楂药材细粉（70目）1g，置锥形瓶中，精密量取溶剂60%乙醇20ml，加热回流提取1h，放冷。
提取液高速离心（3000转/分、15min），上清液过滤，滤液用60%乙醇定容至25ml。取出1ml滤液，用60%乙醇定容至5ml，作为样品溶液待用。
2.2 标准品溶液的制备
精密量取芦丁标准品25mg置50ml容量瓶中，加乙醇适量，超声30min使溶解，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取20ml，置50ml容量瓶中，用水定容，即得0.2mg/ml的标准品[7]。
2.3 标准曲线的绘制
2.3.1最大吸收波长的选择 精密量取标准品溶液、样品溶液各1ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝1ml，混匀，静置6min，加4%氢氧化钠10ml，用水定容，混匀，静置15min。均以相应溶液为空白（标准品以水，样品以60%乙醇为空白），在紫外-可见分光光度计下400～700nm处扫描。[1]标准品最大吸收波长为502.02nm，样品液最大吸收波长为499.46nm。综合上述实验拟定500nm为最大吸收波长。（结果与药典中文献相符）
2.3.2芦丁标准曲线的绘制 精密量取标准品溶液0、1、2、3、4、5、6ml，分别置25ml容量瓶中各按最大吸收波长项下标准品溶液处理方法操作，以相应溶液为空白，在500±2nm处测定吸光度，结果见表1。
3.讨论
3.1 显色稳定性考察的目的是考察被测组分在加入显色剂后在一定时间内吸光度的变化情况。实验数据表明吸光度在2h内基本不变。
3.2 精密度考察的目的是考察仪器的误差和稳定性。从实验数据和结果看，吸光度的标准偏差仅为0.001，表明仪器误差极小，稳定性高，为下一步实验提供保证。
3.3 加样回收率实验的目的是为了检测实验前处理过程中被测组分的损耗程度。加样回收率实验有着重要的意义，是检验样品前处理方法可行性的一种重要的手段，是确定样品前处理方法必须的过程。从实验数据看，平均加样回收率为102.09%，用分光光度法测定山楂中总黄酮含量，方法可行。
3.4 在实验过程中要保证实验条件和操作方法的一致性，避免增加实验的系统误差和人为误差，确保实验的真实性和准确性。
【参考文献】
[1]凌一揆.上海科技出版社[M].上海中药学，1983：129.
[2]成都中医学院主编.上海科技出版社[M].上海中药鉴定学，1979：315.
[3]全国中等卫生学校试用教材《中药学》[M].成都：四川人民出版社，1983.67.
[4]何心亮.北山楂与南山楂化学成分的比较[J].中草药，1990，21：4.
[5]方正规，葛传吉.国外对山楂制剂的研究[N].山东中医学院学报[增刊]，1982，6：104.
[6]高光跃，等.国外医药、植物药分册，1994；9（2）：57.
[7]中华人民共和国药典（一部）1995年版[M].北京.人民卫生出版社，1995：22.
论文作者:陈尚鑫
论文发表刊物:《医药前沿》2017年1月第1期
论文发表时间:2017/2/8
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