（云南白药集团分析检测中心微生物组 云南 昆明 650000）
【摘要】 目的：建立HPLC法测定消炎止咳片中罂粟壳有效成分吗啡的含量。方法：采用HPLC法对处方中罂粟壳主要成分吗啡的含量进行测定。结果：吗啡在0.55～8.31μg/ml范围内线性关系良好，吗啡平均回收率为99.83%，RSD为1.89%。结论：方法简便、准确、重复性好。
【关键词】 吗啡；HPLC法
【中图分类号】R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）32-0342-02
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析[1]。
1.仪器与试药
岛津LC-10A高效液相色谱仪，KQ-250DB型数控超声波清洗器，Sartorius CP225D电子天平，BL610型电子天平，TDL80-2B型台式离心机，strata X-C型固相萃取柱。消炎止咳片，乙腈，水为超纯水，其它试剂均为分析纯，吗啡对照品。
2.色谱条件
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱。柱温：30℃。流速：1.0ml/min。
3.检测波长
选择测定检测波长为220nm。
4.流动相
选择乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠溶液（8：46：46）为流动相。
5.系统适应性试验及专属性考察
对照品溶液的制备：取吗啡对照品适量，精密称定，加甲醇，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇-氨水溶液（5→100）（30：70）稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备：取本品25片，除去包衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5%醋酸的20%甲醇溶液25ml，密塞，称重，超声处理，放冷，再称重，用含5%醋酸的20%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液滤过，精密量取续滤液10ml，加在固相萃取小柱上，依次以0.2mol/L盐酸溶液、甲醇各5ml洗脱，弃洗脱液，放5分钟，用甲醇-氨水溶液（5→100）（30：70）5ml洗脱于5ml量瓶中，加该洗脱溶剂至刻度，摇匀，滤过，即得。阴性对照溶液的制备：按各药味比例取不含罂粟壳的群药，自配阴性样品后，按正文供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。药材溶液的制备：取罂粟壳药材粉末约0.5g，精密称定，下面制备具体步骤同供试品溶液的制备。得到药材溶液分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液及药材溶液各10μl，注入液相色谱仪，进行测定。
由试验结果可知，供试品中的吗啡均来自于罂粟壳药材，理论板数按吗啡峰计算应不低于3000。
6.线性关系的考察
经计算吗啡的回归方程为y=64154.20x+7212.23，R2=0.9996，结果表明吗啡在0.554μg/ml～8.31μg/ml范围内线性关系良好。
7.精密度与稳定性试验
取吗啡对照品溶液，连测6次，记录峰面积积分值，考察精密度，测定结果吗啡峰面积的RSD为0.92%，仪器精密度良好。取本品（批号：20090102）25片，除去包衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备后，分别在0、1、4、8、24小时进样测定，考察其稳定性，结果可知，吗啡峰面积的RSD为1.48%样品溶液在24小时内基本稳定。
8.回收率试验
采用加样回收法，取本品（批号：20090102）25片，除去包衣，精密称定，研细，取6份，每份约0.75g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，加入吗啡对照品溶液5ml，再精密加入含5%醋酸的20%甲醇溶液20ml后，按供试品溶液制备方法制备后，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，以下式计算回收率，即得，测定结果见表。
由以上实验结果可知，吗啡的回收率均在95～105%之间，RSD%均小于3%，结果表明回收率良好。
9.样品测定
取本品三批样品，按正文供试品溶液制备方法制备后，进行测定，结果显示，三批样品中吗啡含量的平均值为9.50μg/片。
10.转移率的计算
根据以上测定结果，计算吗啡的转移率。批号20090101、20090102、20090103，成品中吗啡含量（μg/片）分别为9.51、9.58、9.43；吗啡理论含量11.46μg/片；转移率（%）分别为82.98、83.60、82.29。结果可知，三批样品中吗啡的平均转移率为83%。
11.结论
实验表明，高效液相色谱法能较为准确的测定消炎止咳片中罂粟壳有效成分吗啡的含量。为控制产品质量，保证药物疗效和安全，故采用高效液相色谱法对消炎止咳片中的吗啡进行含量测定。
【参考文献】
[1]田野，陈玉敏，曹红.HPLC法测定安嗽化痰丸中吗啡的含量[J].解放军药学学报，2008，24（3）：260-262.
论文作者:陈杨
论文发表刊物:《医药前沿》2017年11月第32期
论文发表时间:2017/11/9
标签：吗啡论文; 溶液论文; 精密论文; 甲醇论文; 含量论文; 样品论文; 回收率论文; 《医药前沿》2017年11月第32期论文;