兰慧1 阳敬2 李安华3 熊磊4 刘韬5 红河卫生职业学院 云南红河661199
2016年1月《中国医学人文》
[摘 要]目的： 研究柴藿颗粒中挥发油的最佳包合工艺条件。方法：采用L9(34)正交试验法，以挥发油的包合率及包合物的收得率为指标对影响包合工艺的因素进行考察。结果：柴藿颗粒中挥发油最佳包合工艺条件为：挥发油(ml)：β-CD(g)＝1：10，包合时间为60 min，包合温度为40℃。结论：该工艺条件稳定，质量可控，可作为柴藿颗粒中挥发油包合工艺的条件参数。
[关键词]柴藿颗粒；挥发油；β-环糊精（β-CD）；包合物；包合工艺
柴藿颗粒处方来源于云南中医学院熊磊教授的临床经验方柴胡藿香汤[1]，由柴胡﹑藿香等中药提取制成颗粒剂。经临床使用具有解表透热，利咽消肿的功效。用于治疗小儿暑湿感冒引起的发热，咽痛，咳嗽，苔腻等。方中藿香的挥发油含量较高，其主要成分为百秋李醇[2] ，除此之外方中的另两味药也提取到挥发油。据报道百秋李醇具有扩张血管、发汗、促进胃液分泌、增强消化、健胃止呕、解痉等作用［3］。制剂中挥发油成分的挥发性使得稳定性差，从而影响成品质量的稳定性和有效性。为保证制剂质量，并避免直接服用挥发油对胃肠道的刺激[4]，作者采用近年来中药制剂生产中应用的新技术对挥发油进行β-环糊精包合技术[5]的研究。
1. 仪器与试药
岛津GC-2010气相色谱仪(岛津国际贸易有限公司)，挥发油提取器（北京中西泰安技术服务有限公司）；HJ-4A多头磁力加热搅拌器；DHG-907电热恒温干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；AUW220型电子天平（日本岛津）；SK250HP超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司) ；β-环糊精（β-CD）（鸿基生物有限公司），所用中药购于云南白药天紫红饮片厂
2．方法与结果
2.1挥发油的提取及空白回收实验
2.1.1 挥发油的提取：取三种中药饮片各100g加水浸泡，放入圆底烧瓶中，将烧瓶置于电热套上，在连接挥发油测量器和回流冷凝管。缓慢加热，至沸腾后观察，从第一滴溜出液滴出开始计时，分别在0.5h、1h、2h、3h、4h、5h测定挥发油体积。结果见表1
表1水蒸气蒸馏时间与挥发油得率考察表（n=5）
由表可知，最佳提取时间为180min，挥发油得率为0.73%。
2.1.2.空白回收实验：精密量取混合挥发油2 mL，置200 mL圆底烧瓶中，加入蒸馏水500 mL，按2010版药典挥发油测定法测定，至油量不再增加时停止。挥发油空白回收收率= [收集挥发油量(mL)／加入挥发油量(mL)]×100％．结果如下：见表2
表2挥发油空白回收实验考察表（n=5）
2.2 乙醇对挥发油溶解效果的考察
量取挥发油3份，每份1ml于小烧杯中，向小烧杯中滴加无水乙醇。结果表明，1ml挥发油需要10ml无水乙醇才能完全溶解。
2.3 挥发油相对密度的测定：取挥发油5ml于分析天平上称取重量，结果为4.4900g.即相对密度=4.49g/5ml=0.9g/ml 。
2.4 β-环糊精（β-CD）的溶解实验：取β-环糊精（β-CD）10g,加水溶解,注意加水量，并观察β-环糊精（β-CD）的溶解情况。结果表明：8% β-环糊精（β-CD）为饱和溶液。
2.5 β-环糊精包合物的制备工艺研究：
2.5.1包合物的制备 准确量取挥发油1ml加入10ml无水乙醇溶解，另取β-环糊精（β-CD）10g加入125ml水制成8% β-环糊精（β-CD）饱和溶液，将饱和溶液置于磁力加热搅拌器上，设置温度40℃，缓慢滴上无水乙醇溶解的混合挥发油乙醇溶液，包合40min，冰箱中冷藏24h，过滤，用石油醚洗涤2次，蒸馏水洗涤1次，45℃下干燥，得白色粉末包合物，称重，得包合物的重量。
包合物收得率（%）=包合物实际量/（β-CD量+挥发油投入量×挥发油相对密度）×100%
2.5.2包合物中挥发油包合率的计算 精密称取上一步中制得的包合物质量，置于挥发油提取器中，然后加蒸馏水，按《中华人民共和国药典》2010版挥发油测定法进行操作读取挥发油量，按如下公式进行计算：
挥发油包合率（%）=包合物中挥发油回收量/（挥发油投入量×空白回收率）×100
2.6 单因素考察转速对包合物的影响：在挥发油（ml）：β-CD（g）为1：8、包合时间为40 min、包合温度为30℃条件下（常规），分别把转速调为100转，200转，300转，400转，500转，考察包合率：结果见表3
表3转速对挥发油包合影响考察表
转速100 200 300 400 500
包合率60%62% 69% 67% 66%
结果表示：300转包合效果最好。
2.7 正交优选挥发油的最佳包合工艺: 在上述单因素考察的基础上,采用正交试验法对挥发油包合工艺的主要工艺参数进行优化。选择挥发油：β-CD、包合温度、包合时间3个主要影响因素进行考察(因素水平设计见表4) , 以收得率与包合率的综合评分为指标,用L9(34) 正交表安排试验方案,实验基本操作同2.5.1 项下方法,结果见表5、表6。
表4 正交实验因素水平表
从直观分析表可知，影响包合效果因素的顺序为挥发油量/ β-CD (A)>包合时间(C)>包合温度(B)，最佳工艺条件为A3B1C3．从方差分析结果可知，三个因素均无显著性影响．即最佳工艺参数为挥发油（ml）：β-CD（g）为1：10、包合时间为60 min、包合温度为40℃。
2.8验证包合最佳工艺：量取挥发油3份，每份2ml，均加入20ml无水乙醇使之溶解，设置磁力搅拌器转速为300转，配制8%的β-CD溶液250ml（1：10）3份，设置温度40℃，把挥发油分别缓慢加入到β-CD溶液中，包合1h，静置24h,过滤，石油醚洗涤，45℃挥干，称重。把收得物置于圆底烧瓶中，按挥发油测定法测定。结果见表7
表7正交验证结果表
批次 收得率 包合率
1 68.1% 79.4%
2 67.5% 78.1%
3 69.3% 79.9%
验证结果表明; 此包合工艺条件操作稳定，合理可行．
2.9气相色谱鉴别 取包合物。按挥发油包合率测定方法提取挥发油，取2 mL，用环乙烷定容，作为样品溶液a(包合后的挥发油) 以2 ul进样，见图1，包合前的挥发油取2 mL，用环乙烷定容，为样品b，以2 ul进样。见图2。
3.讨论
3.1挥发油是主要是一些单萜，倍半萜及其含氧衍生物，不仅易挥发，而且在光、氧作用下极易氧化、变质降低疗效，甚至产生毒副作用。制成包合物后在一定程度上切断了药物分子与周围环境的接触，避免受光、氧和水解等条件的影响，保证疗效。经包合的挥发油既掩盖气味又保持生理活性，并减少对胃肠道的刺激，从而保证制剂质量。
3.2本文正交试验中采用了综合评分来衡量各个指标对实验的影响。结果表明各因素对包合率、收得率的影响不同。参考不同的文献分别给这2个指标以不同权重，以综合评分并结合生产实际选择最佳工艺。包合条件确定为：挥发油/ β-CD 为1:10 ，包合时间60 min，包合温度40℃。
参考文献
[1] 杨艳,熊磊.柴胡藿香汤治疗小儿暑湿发热40例疗效观察［J］.云南中医中药杂志，2006,27(3):29.
[2]穆启运，阮新民．伊环糊精包合广藿香和橘红挥发油的工艺研究[J]．中药材，2009，32(9)11454—1457．
[3]张艳军.藿朴二陈香连汤治疗小儿署湿夹滞发热症[J ].邯郸医专学报1997.6（10）2
[4] 罗超坤．广藿香水提物的抗菌实验研究[J]．中药材，2005，28(8)：700—701．
[5]Szejtli J．Past，present，and future of cyclodextrin reseaIch[J]．Pure and Applied Chemistry，2004，76(10)：1825—1845．
姓名：兰慧（1986年2月），广西恭城人，瑶族，助教，硕士研究生，主要从事天然药物学，生药学，药理学，医药商品学等教学工作。
论文作者:兰慧,阳敬 李安华 熊磊,刘韬
论文发表刊物:《中国医学人文》2016年1月第1期
论文发表时间:2016/4/15
标签：挥发油论文; 环糊精论文; 工艺论文; 正交论文; 乙醇论文; 因素论文; 温度论文; 《中国医学人文》2016年1月第1期论文;