永州市冷水滩区妇幼保健院 湖南永州 425000
摘要：目的 对革兰染色法在阴道分泌物真菌检验中的临床应用价值进行探讨分析。方法 选取我院妇科门诊收治的262例怀疑为阴道炎的患者作为研究对象，应用常规盐水法与革兰染色法对患者阴道分泌物进行真菌检验，对两组方法真菌检出率进行比较分析。结果 革兰染色法检验真菌阳性率83.58%显著较常规盐水法检验的真菌阳性率51.53%高（p<0.05）。结论 对阴道分泌物进行检验应用革兰染色法，具有准确性、快速性的特点，可在临床范围内广泛应用推广。
关键词：阴道分泌物；真菌检验；革兰染色法；临床价值
临床中导致出现妇科炎症的病原体具有种类多、复杂的特点，临床检测方法也较多。革兰染色法具有简便、快速、成本低的优点，能够全面筛查妇科炎症，给临床诊断提供有效、准确的参考依据[1]。真菌为临床妇科的一种常见致病菌，为导致发生妇科炎症的重要原因，传统实验室检测主要应用盐水湿片法，但易受到各种因素影响，不能有效、准确鉴别检验结果，具有较高的误诊率和漏诊率[2]。笔者对我院收治的怀疑阴道炎患者应用革兰染色法对真菌进行检验，对其临床价值进行探讨，报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院妇科门诊2012年9月~2013年10月收治的262例怀疑为阴道炎的患者作为研究对象，其中，年龄23~62岁，平均年龄（46.1±10.1）岁。
1.2 标本来源
本组所有研究患者均怀疑阴道炎患者，护士应用棉签取患者阴道分泌物标本，对其进行检查。检查时主要应用常规盐水法与革兰染色法。
1.3 方法
1.3.1 常规盐水法
选取患者阴道分泌物，使用生理盐水对其进行稀释处理后，应用涂片镜检。
1.3.2 革兰染色法
选取患者阴道分泌物，将其均匀的涂抹到载玻片上，放干标本后，应用火焰对其进行固定处理，按照初染、媒染、脱色以及复染的步骤进行革兰染色；使用擦镜纸吸干片子后，放置到油镜下进行检查。详细步骤如下：初染：于载玻片上滴数滴草酸铵结晶紫，保证能够将标本完全覆盖，静置染色一分钟后，应用清水冲洗；媒染：在涂面上滴加碘液进行覆盖，染色一分钟后进行水洗，应用吸水纸巾将多余水分吸去；脱色：滴加数滴95%的酒精，轻轻摇动载玻片脱色半分钟，水洗后，将水分吸干；复染：滴加番红染色液进行稀释，稀释10s，用水进行冲洗，干燥后实施镜检。
阳性：在镜下能够观察到菌丝和真菌孢子。
1.4 统计学方法
所有数据均应用统计学软件SPSS19.0软件处理，以（x±s）表示计量数据并行t检验，运用%表示计数资料并行X2检验，以P<0.05表示差异显著有统计学意义。
2 结果
本组研究的262例疑似阴道炎患者中，应用革兰染色法进行检验，219例阳性，占83.58%；43例阴性，占16.42%；常规盐水法检验：135例阳性，占51.53%；127例阴性，占48.47%；结果表明，革兰染色法检验真菌阳性率显著较常规盐水法高（X2=6.032，p<0.05），见表1：
3 讨论
真菌性阴道炎为临床妇科的常见疾病，传统实验室阴道真菌诊断法主要应用盐水湿片法，但应用该种方法进行检验，易受到患者阴道内上皮细胞、各种分泌成分遮掩、重叠、上皮细胞膜卷曲、真菌孢子自身生长以及涂片背景等各方面因素影响，导致真菌检验出现误诊或者漏诊的情况[3]。
应用革兰染色法对阴道真菌进行检验，染色处理后，真菌芽生孢子、假菌丝会被染料染为蓝色，患者阴道内炎性细胞、上皮细胞以及白细胞则会被染料染为红色，各种成分被染色后，能够更清晰易辨，且形态较清晰，具有较高的正确诊断率；另外，能够明显与涂片中的其他成分进行鉴别；在油镜下观察染色后的涂片，能够对阴道细菌生长情况明确观察，检查是否出现菌群失调、阴道杆菌占据阴道菌群的比例等，这样不仅能够有效防止发生真菌性阴道炎漏诊、误诊的情况，而且还能够正确诊断其他类型的细菌性阴道炎。
在患者阴道分泌物内检出真菌，不能将此确诊为判定真菌性阴道炎的重要条件。有研究指出[4]，在未怀孕的、主诉有白带增多的10%妇女以及三分之一孕妇群体中，均能够在其阴道内检验出真菌，但只有部分妇女的临床症状较明显。通过应用革兰染色法能够动态观察阴道内菌群环境的变化情况，且能够明确阴道菌群内白细胞、真菌孢子、芽生孢子以及假菌丝等的数量，了解其在发生真菌感染中的诊断价值。
此外，在以下类型阴道炎中还能够应用革兰染色法：（1）滴虫性阴道炎：采用常规盐水法在滴虫性阴道炎中发挥出一定诊断价值。如于25~37℃温度环境下，能够对运动活跃的虫体清晰观察；如温度较低，则不能清除观察到虫体，且不能有效保存标本。通过应用革兰染色法检查，能够使滴虫被染为粉红色，在镜下主要呈梨形、椭圆形或者不规则形状，且由于细胞核染色程度较深，细胞胞质疏松，泡沫感明显，但该种方法的操作质量受到操作人员经验因素影响，如操作人员经验不丰富，会导致出现误诊、漏诊的情况；（2）淋病：通过应用革兰染色法，能够在阴道分泌物涂片内发现G-双球菌，主要呈肾形；传统检查G-双球菌，主要应用培养鉴定法，但具有培养条件要求高、培养时间长的缺点；通过应用革兰染色法，能够清晰观察到患者阴道分泌物内脓细胞或者白细胞内含有的G-双球菌，进而能够初步诊断淋病；（3）细菌性阴道病：细菌新阴道病的主要病原体为加德纳菌，如能够在镜下观察到线索细胞，则可将其确诊细菌性阴道病。涂片检查显示，阴道杆菌显著减少，白细胞增多不明显或者未增多，上皮细胞减少明显。当加德纳菌黏附到患者阴道上皮细胞后，其会形成线索细胞，主要为形态比较小的革兰（+）球杆菌或者（-）球杆菌。通过应用革兰染色法进行检查，则具有较好的特异性、敏感性以及重复性[5-6]。
本组研究中，应用常规盐水法与革兰染色法对患者阴道分泌物进行真菌检验，结果显示，革兰染色法检验真菌阳性率83.58%显著较常规盐水法检验的真菌阳性率51.53%高（p<0.05）。
综上所述，对阴道分泌物进行检验应用革兰染色法，能够明显提高真菌检验阳性率，且具有准确性和快速性。
参考文献：
[1]何兰娟，吴丽燕，滕美君.妇科门诊阴道分泌物感染病原学及耐药性分析[J].中国性科学，2015，01（02）：3-6
[2]王丽.对比分析妇科阴道分泌物涂片采用革兰染色法和盐水涂片法进行检查的临床效果[J].医药与保健，2014，10（11）：135-135
[3]陆玲娜，冯广红.革兰染色法在阴道分泌物真菌检验中的应用价值研究[J].医学信息，2014，14（32）：83-84
[4]高冬梅.革兰染色法在阴道分泌物真菌检验中的应用价值分析[J].中国保健营养（下旬刊），2013，23（12）：7728-7729
[5]彭丽莉.阴道分泌物两种染色方法与细菌性阴道炎联合试剂的运用[J].检验医学与临床，2013，10（19）：2589-2590
[6]张英.革兰染色法在阴道分泌物真菌检验中的应用价值分析[J].医学信息，2013，14（16）：606-607
论文作者:唐海燕
论文发表刊物:《健康世界》2015年12期
论文发表时间:2016/5/19
标签：真菌论文; 阴道炎论文; 阴道分泌物论文; 盐水论文; 患者论文; 涂片论文; 阴道论文; 《健康世界》2015年12期论文;