对现代生物科技专题中一些常见疑问的分析，本文主要内容关键词为：生物科技论文,疑问论文,常见论文,专题论文，此文献不代表本站观点，内容供学术参考，文章仅供参考阅读下载。
一、限制酶为什么只切割外源DNA而对自身DNA不起作用？
限制酶存在于原核生物体内，而原核生物体内限制酶与甲基化酶往往同时存在。甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别序列，甲基化酶使识别序列中的某个碱基发生甲基化，从而保护DNA不被限制性内切酶切开。
二、λ噬菌体的衍生物是什么？
天然λ噬菌体改造后就是λ噬菌体的衍生物。野生型λ噬菌体的DNA对目前大多数在分子克隆中常用的限制酶有多个切点，有些位点恰巧定位于与噬菌体生长繁殖关系密切的必需基因之中，这些位点的剪切重组必然严重影响噬菌体的繁殖。因此，野生型λ噬菌体的DNA不能直接用作载体而需经过改造才能成为有价值的载体。
三、PCR技术中为何要添加引物？
原因有两点：（1）DNA聚合酶只能催化脱氧核苷酸加到已有核苷酸游离3′羟基上，而不能使脱氧核苷酸自身发生聚合；（2）DNA聚合酶具有校对功能，它不能从无到有合成新链，未核实前一个核苷酸是否处于正确配对状态，就不会进行聚合反应。因此，无论是DNA的体内复制还是体外扩增，都需要有引物的存在。
四、基因探针是DNA，还是RNA，是单链还是双链？
基因探针可以是DNA，也可以是RNA。最常用的是DNA探针，它又包括双链DNA和单链DNA两种，双链DNA探针在应用前必须变为单链，一般采用加热的方法，若原为单链则无需变性处理即可使用。RNA探针可由转录得来，由于RNA是单链分子，所以它与靶序列的杂交反应效率极高。
五、在植物组织培养时培养基中为何使用蔗糖而非葡萄糖？
蔗糖较葡萄糖有以下优点：（1）维持渗透压的能力强。配制相同质量分数的培养基，蔗糖产生的渗透压要明显低于葡萄糖，易于维持低渗环境而不会导致植物细胞因脱水而生长不良。（2）采用蔗糖为碳源，可在一定程度上减少微生物污染，因为微生物生长的最佳碳源是葡萄糖。（3）相同物质的量浓度下，蔗糖比葡萄糖提供的能量更多。
六、植物组织培养不同阶段对光照有何要求？
对于植物组织培养来说，光照非常重要，包括光照强度、时间和波长。在由高度分化的组织形成愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养，而在分化形成试管苗的再生的过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织，如在光照条件下容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织。由愈伤组织经细胞分裂和分化形成试管苗的过程中需要光照，原因是叶绿素的合成需要光照。
七、原生质体融合时细胞膜和核膜是否同步融合？
原生质体融合包括膜融合和核融合两个过程。诱导融合只能诱导细胞膜融合，核融合多数情况下是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行，如果两个核在杂种细胞中位置较近，也可能在有丝分裂前就发生融合。
八、植物分生区为什么没有病毒？
在植物体中，病毒的移动主要依靠两条途径：一是通过维管系统，但分生组织中尚未形成维管系统；二是通过胞间连丝，这条途径中病毒移动速度非常缓慢，难以追赶上活跃生长的茎尖和根尖。所以生长旺盛的根尖、茎尖一般都无病毒。
九、原代培养/传代培养中“代”指的是什么？
培养细胞的“一代”是指从把细胞接种到培养瓶至分离再培养的一段期间。“代”与细胞分裂次数并不同，在“一代”中，细胞并不只是分裂一次，～般分裂3次～6次。
十、在培养动物细胞时为什么用
来调节pH？
碳酸盐pH缓冲系统是一种生理pH缓冲系统，大多数培养液用它来保持稳定的pH。配制培养液时，常常需要加入一定量的碳酸氢钠，但是随着温度和时间的变化，培养基中的碳酸氢钠会水解，溶液的pH也会升高。为了维持稳定的pH，培养箱中的需要维持在2%～10%之间，以保持培养液中溶解的的浓度，从而抑制碳酸氢钠水解，维持pH稳定。
十一、选择培养基是如何对杂交瘤细胞进行选择的？
杂交瘤细胞的筛选普遍采用HAT选择性培养液，它是在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。原理是细胞中DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸。叶酸是该过程中重要的辅酶，氨基喋呤是叶酸的拮抗物，可以阻断该途径DNA的合成。另一条途径是补救途径（“S途径”），它利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。由于实验中使用的是HGPRT缺陷型骨髓瘤细胞，因此，在HAT培养液中只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既有效应B细胞的“S途径”，又有骨髓瘤细胞无限增殖的特性，能在HAT培养液中存活下来，并不断增殖。
十二、同期发情与超数排卵的原理及其使用的激素是否相同？
同期发情是利用激素人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程，使之在预定的时间内集中发情和排卵。实践中常用前列腺素或孕激素类药物（如孕酮、甲孕酮等）；自然状态下，动物卵巢上约有99%的有腔卵泡发生闭锁而退化，只有1%的卵泡能发育成熟而排卵。在每次发情期之前优势卵泡加速生长，其余小的有腔卵泡发生闭锁退化。超数排卵就是应用超过体内正常水平的外源性促性腺激素，使将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟，从而使卵巢比自然发情时有更多的卵泡发育并排卵。
十三、精子获能是怎么回事？
精子在附睾内已经获得了受精能力，但由于附睾分泌一种物质，附于精子表面，抑制了它的受精能力，这种物质称为去能因子。附睾与精囊均分泌去能因子，存在于精浆中。精子进入雌性动物生殖道后，去能因子的作用被解除，精子才真正具有受精的能力，这一过程称为精子获能。
十四、哺乳动物体外受精时为什么要对精液进行离心处理？
精液由精子和精浆两部分组成。精浆中的去能因子包括放射冠穿透酶和顶体蛋白酶的抑制剂，可阻断精子的特异受体并抑制顶体蛋白酶的释放等。因此，在一般情况下，精液中的精子无法获能。精子获能处理前对精子进行离心处理，目的是除去精液以便于精子获能。