（邯郸市中心医院 河北 邯郸 056001）
【摘要】目的 研究番茄红素（LP）对2型糖尿病大鼠肾功能的保护作用。方法 采用高脂高糖饮食加腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法制备糖尿病大鼠模型，取60只模型大鼠根据血糖水平随机分为：模型对照组，番茄红素（5、10、20 mg/kg）治疗组和盐酸二甲双胍（200mg/kg）治疗组，并另取12只同龄大鼠作为正常对照组；每天灌胃给药1次，治疗4周。分别于给药前和给药后第14、28天测定各组大鼠空腹血糖水平；4周后，观察各组大鼠一般状况，并通过HE染色观察肾脏组织病理形态学变化。结果 较模型对照组，番茄红素治疗组“三多一少”症状明显减轻；空腹血糖水平显著降低；体重显著升高，肾指数显著降低；尿量显著减少、UPro显著降低，血清中BUN、SCr、UA含量显著降低，肾脏组织病理变明显改善，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。结论 番茄红素对2型糖尿病大鼠肾功能具有剂量依赖性的保护作用。
【关键词】糖尿病；肾功能；番茄红素；保护
中图分类号：R285.5文献标识码：A
本实验采用高脂高糖饮食加腹腔注射STZ的方法诱导制备的糖尿病大鼠模型，研究番茄红素对2型糖尿病大鼠肾功能的保护作用。
1材料与方法
1.1药物与试剂番茄红素（南京泽朗生物科技有限公司，纯度≥96％，批号：201401082）；盐酸二甲双胍（河北天成药业股份有限公司，批号：20140721）；BUN、SCr、UPro、UA测定试剂盒购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；PAS染色试剂盒购自北京博奥森公司；STZ购自美国Sigma公司。
1.2动物 清洁级雄性SD大鼠，160-200 g，购自河北省实验动物中心，许可证号：SCXK（冀）2008-1-003。
1.3方法
1.3.1模型的制备与分组 清洁级实验用大鼠经高脂高糖饮食饲养8周后，一次性腹腔注射STZ（65mg/kg）诱导制备糖尿病大鼠模型，分别于72h和3d后通过血糖仪测定空腹静脉血糖水平，持续高于16.7 mmol/L即认定为造模成功；取60只模型大鼠，根据空腹血糖水平随机分为5组：糖尿病模型组、番茄红素（5、10、20 mg/kg）治疗组和盐酸二甲双胍（200mg/kg）治疗组，并另取12只同龄大鼠设为正常对照组；各治疗组大鼠每天灌胃给药1次，疗程4周；模型对照组和正常对照组分别给予等体积的生理盐水。
1.3.2空腹血糖水平的测定 分别于给药前和给药后第14、28天通过尾静脉取血，通过血糖仪平行测定各组大鼠空腹静脉血糖水平并记录。
1.3.3一般状况的观察 给药治疗4周后，观察大鼠精神状态、外观、饮食、体重等并记录。
1.3.4体重和肾脏指数的测定 给药治疗4周后，称量各组大鼠体质量；然后腹腔注射乌拉坦实施麻醉，仰位固定，开腹取肾组织，用生理盐水冲洗干净后，称量左侧肾脏质量，计算肾脏指数：肾脏指数=左侧肾脏质量/体质量
1.3.5尿量及24h尿蛋白量（UPro）的测量 给药治疗4周后，分别测量各组大鼠24h尿量，并通过磺基水杨酸法测定UPro值。
1.3.6血清中BUN、SCr、UA含量的测定 给药治疗4周后，开腹经腹主动脉取血，经2000 rpm离心5min后取上层血清，然后按照试剂盒操作方法步骤，由全自动生化分析仪平行测定各组大鼠血清中BUN、SCr、UA含量。
1.3.7肾脏组织形态学的观察 将1.4.4所取的右侧肾脏组织置于4%的多聚甲醛溶液中进行固定，经石蜡包埋、切片、展片处理后，进行常规HE染色，然后通过光学显微镜观察肾脏组织形态学改变。
1.3.8 统计学方法 采用SPSS15.0进行统计分析，实验数据以表示；组间均数比较采用单因素方差分析；P<0.05表示差异具有统计学意义，P<0.01表示具有极显著性差异。
2 结果
2.1各组大鼠一般状况 造模成功后，模型大鼠出现明显的精神萎靡和糖尿病“三多一少”症状，并且体重逐渐减轻，体毛枯黄；经番茄红素治疗4周后，糖尿病大鼠精神状态明显好转，“三多一少”症状减轻，体毛变得光洁，其中20 mg/kg治疗组效果最为显著。
2.2番茄红素对糖尿病大鼠空腹血糖水平的影响 模型对照组大鼠空腹静脉血糖水平较正常对照组显著升高；而经番茄红素（20mg/kg）治疗4周后，糖尿病大鼠空腹血糖水平显著降低（P<0.01），结果见表1。
表1 各组大鼠空腹血糖水平的变化(, n=12)
注：与正常对照组比较：*P<0.05, **P<0.01；与模型对照组比较：△P<0.05, △△P<0.01
2.3番茄红素对糖尿病大鼠体重、肾脏指数、尿量和24h尿蛋白量（UPro）的影响 较正常对照组，模型对照组大鼠体重较正常对照组显著减轻，而肾脏指数以及尿量和UPro均显著升高（P<0.01）；经番茄红素（10、20mg/kg）治疗4周后，糖尿病大鼠体重显著升高、肾脏指数、尿量和UPro均显著降低，其中20 mg/kg治疗组效果更为显著，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。
2.4番茄红素对糖尿病大鼠血清中BUN、SCr、UA含量的影响 模型对照组大鼠血清中BUN、SCr、UA含量较正常对照组均显著升高；经番茄红素（10、20mg/kg）治疗4周后，糖尿病大鼠BUN、SCr、UA含量均显著降低，其中20mg/kg治疗组效果更为显著，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。
2.5 番茄红素对糖尿病大鼠肾脏组织形态学变化的影响 正常对照组大鼠肾脏组织肾小球结构未见异常；模型对照组大鼠肾脏组织呈现：肾小球体积增大、系膜增生，肾小管上皮细胞呈空泡变性，淋巴细胞浸润等病理学改变；经番茄红素治疗4周后，糖尿病大鼠肾脏组织病理性形态学改变明显改善，以20mg/kg治疗组效果最为显著，结果见图1。
图1 各组大鼠肾脏组织形态学变化（HE×400）
A-正常对照组；B-模型对照组；C-番茄红素5mg/kg组；D-番茄红素10mg/kg组；E-番茄红素20mg/kg组；F-盐酸二甲双胍200mg/kg组
3 讨论
番茄红素是广泛存在于番茄、胡萝卜、西瓜等红色蔬菜水果中的一种类胡萝卜素，药理学研究表明，其具有良好的抗氧化、抗肿瘤等生物活性[1-2]。本实验通过高脂高糖饮食加腹腔注射STZ破坏胰岛β细胞的方法制备的2型糖尿病大鼠模型进行研究发现，经番茄红素治疗4周后，糖尿病大鼠空腹血糖水平显著降低，体重显著升高、肾脏指数显著降低，肾脏组织结构病变显著改善，提示番茄红素对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。血清中BUN、SCr、UA含量以及尿量、UPro为临床上监测肾功能的常用指标，本研究发现番茄红素治疗能够有效降低尿量和UPro，血清中BUN、SCr、UA含量亦显著降低 ，其中以番茄红素20 mg/kg治疗组效果最为显著，提示番茄红素能够剂量依赖性地改善糖尿病大鼠肾功能。
综上所述，番茄红素对2型糖尿病大鼠肾功能具有剂量依赖性的保护作用，其作用机制可能与番茄红素能够有效降低血糖、降低肾脏指数、改善肾脏组织病理性改变有关。
参考文献
[1]Agarwals, Rao AV. Tomato lycopene and low density lipoprotein oridation: a human dietary intervetion study[J]. Lipids, 1998; 33(10): 981~984
[2]郭守利, 潘洪志, 石刚, 等. 番茄红素对糖尿病大鼠血糖及脂质过氧化作用的影响[J]. 中国比较医学杂志, 2003; 13(6): 340~342
论文作者:刘艳峰
论文发表刊物:《中国耳鼻咽喉头颈外科》2015年5月第5期供稿
论文发表时间:2015/7/16
标签：大鼠论文; 番茄论文; 肾脏论文; 红素论文; 糖尿病论文; 对照组论文; 血糖论文; 《中国耳鼻咽喉头颈外科》2015年5月第5期供稿论文;