【摘要】目的 揭示全自动生化分析仪使用过程中各检测项目间相互交叉污染的问题。方法 以无机磷、镁和甘油三脂为对象将内含磷酸盐、镁离子和甘油类组分的检测项目和这3个项目做几种组合,观察这些试剂对病人标本检测这3个项目的影响。结果 说明这3个项目的检测设置对检测结果有明显影响,差异高达数倍。讨论 应注意分析项目的设置顺序,对已论证设定好的检测顺序不能随意改动。
【关键词】全自动生化分析仪 试剂 交叉污染
【中图分类号】R197.39 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2013)44-0015-01
Discuss on detect items’ cross contaminations of automatic biochemical analyzer Li Lei Meng Ling Zeng. Department of Laboratory Medicine, Zibo Wanjie Cancer Hospital, Zibo 255213,China
【Abstract】 Objective To reveal the cross contaminations of each detect items in using of automatic biochemical analyzer. Methods Three reagents including inorganic phosphate, magnesium ion and triglyceride were involved in this program. To observe the influence for patients’ samples due to different arrangements of three reagents. Results There were significantly difference to detect results according to different arrangements. Conclusions Pay attention to arrangements of analytic items, don’t change the demonstrated sequence of established items.
【Key words】 Automatic biochemical analyzer Reagent Cross contamination
目前临床生化检验基本上都实现了自动化分析。自动化分析仪就是将原始手工操作过程中的取样、混匀、温浴(37℃)检测、结果计算、判断、显示和打印结果及清洗等步骤全部或者部分自动运行。由于其测量速度快、准确性高、消耗试剂量小,现已在各级医院得到广泛使用,大大提高常规生化检验的效率及收益。HITACHI7080型全自动生化分析仪用于以血清、尿、脑脊液为样本的临床化学分析、尿检查、免疫学检查。它有自动清洗、报警记录等功能。在我们的日常工作中HITACHI7080型全自动生化分析仪在测试效率、准确性、重复性上都表现的相当不错,但我们在运用HITACHI7080型全自动生化分析仪检测标本时,有时会遇到一些项目,如磷、镁和甘油三脂的结果异常增高,有时甚至超出检测范围,但单独复查结果却又正常的现象。经反复查证确定这是试剂间的交叉污染造成的。对此我们进行了实验观察,并将如何避免这种现象进行探讨。
材料和方法
一、材料
1.仪器 HITACHI7080全自动生化分析仪。
2.试剂 HITACHI公司原装试剂。
3.标本 混合血清,以20名健康检测者血清混合而成。
二、方法
选择一些检测项目列为实验对象。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆其中,试剂中含磷酸盐缓冲液的项目,如尿酸、胆固醇、乳酸脱氢酶等是作为无机磷的疑似产生交叉污染项目;试剂中含镁离子的甘油三脂、肌酸激酶等项目是镁检测的疑似交叉污染项目;含甘油的一些项目是甘油三脂检测的疑似交叉污染项目。
实验时,3个项目分开观察,以4种方法实验。结果表中的第一种结果是让观察的项目单独先做混和血清检测;第二种结果是让被观察的项目的疑似产生交叉污染项目先对混合血清测试一次,接着立即作观察的项目测定;第三种结果在第二种方法作观察测定前,加做一次非疑似产生交叉污染的项目测定;第四种结果是在第二种方法下,做观察项目前,加做两次非疑似产生交叉污染的项目测定。
以上4种实验方法均重复测定10次,取均值。
结果
磷、镁、甘油三脂交叉污染实验数据间表1
表1 各种项目组合方式对检测结果的影响
磷(mmol/l)镁(mmol/l)甘油三脂(mmol/l)
第一种方法1.190.821.24
第二种方法3.141.366.99
第三种方法1.890.982.40
第四种方法1.290.831.23
结果说明项目组合对结果形象非常显著。
讨论
全自动生化分析仪在使用过程中存在严重的交叉污染现象[1]。由于许多项目如尿酸,胆固醇,乳酸脱氢酶等实际中含磷酸盐缓冲夜,卫生部临床检验中心推荐葡萄糖氧化酶法[2]的试剂中也含0.1mol/l磷酸盐缓冲液;镁离子是甘油三脂、肌酸激酶是集中不可缺少的成分;甘油又是一种酶保护剂。使用前应认真阅读说明书,避免项目组合时,因试剂成分对检验结果产生交叉污染。实验结果显示,在没有污染的情况下,第一种方法测定的结果为观察依据,第二种方法明显升高,甘油三脂增高达5.63倍,无机磷高出达2.63倍,镁高出1.66倍。说明仅靠仪器冲洗一次不能解决前次检测试剂参与对下次检测的污染。第三种方法是中间隔一个非污染项目,结果表明还存在明显影响。第四种方法,中间间隔两个非污染项目,结果显示无明显差异。本实验说明使用全自动生化分析仪随机组合检测项目时,某些项目不能随心所欲组合,必须注意位置的特别设置。
在实验工作中还发现,碱性条件下反映项目如肌酐苦味酸速率法、果糖胺动力法受酸性试剂的影响反应速率减慢。同样观察到尿酸试剂受强酸性试剂影响结果明显偏低现象。说明这种污染还由多种表现,受影响的项目不少。根据我们的经验,只要合理安排项目位置,就可以有效避免这种现象。原则是将具有相同反应原理的放在一起,相同酸碱度的反应放一起;试剂内含相同被测成分的和该项目相隔两个项目位置以上;易污染项目测定前吸样针设置清洗2次以上等。
交叉污染在全自动生化分析仪上出现的环节较多,但主要集中在样品加样针、试剂加样针、搅拌棒、比色杯等部件。由于为了保证加样精度,一般生化分析仪的加样针,都会在加样的时候略过量吸取样品或试剂,然后进行加样。以至于加样后加样针的内壁会残留一些样品或试剂。仪器会自动排空、加压内外冲洗。许多产品还提供样品加样针的专用清洗程序。搅拌棒也会出现交叉污染,当搅拌棒加入比色杯时,很容易把上一次搅拌的残留物带入比色杯,这样会造成比色结果不准确。可以在每次搅拌后注意观察搅拌棒是否完全清洗干净,清洗的水是否充分清洗搅拌棒的最上沿。如果没有可以调整搅拌棒的清洗高度。在每次试验检验地带网完成以后用酒精或次氯酸清洗搅拌棒,达到理想状况。目前除了一些高档全自动生化分析以为防止污染,采用洗涤加脱气装置或加超声洗涤装置[3]外,一般生化分析仪可以通过增加洗涤的次数或改变吸取试剂的方式来消除这种污染。由厂家提供给客户使用的仪器参数、项目的位置是经过反复论证的,是最佳状态,建议不要随意改动。这些仅供同道参考指教。
在我们实际工作中如果测试结果,与以前报告有所差异,考虑因为各家医院开展的项目不同、使用的试剂厂家及方法学不同、使用的仪器不同,因此项目间的交叉污染实验情况可能不一样。建议大家根据各自的实际情况,作试剂交叉污染调查和评估,按照试剂之间交叉污染调查结果,把评估项目无统计学意义试剂组合为相邻试剂,存在交叉污染的设置清洗程序,来有效降低交叉污染程度。试剂合理性、科学性的组合可确保全自动生化分析更加准确,为临床提供更加可靠的实验数据[4]。
参考文献
[1]孟素慧,王卫东全自动生化分析仪使用中交叉污染对结果影响的观察[J]临床军医杂志,2006,34(3):377-378
[2]叶应妩,李健斋,王玉琛.临床实验诊断学[M].第1版.北京:人民卫生出版社,1991.452.
[3]韩志钧,李树中,田维发.临床化学常用项目自动分析法[M].第2版.辽宁:辽宁科学技术出版社,1995.55.
[4]王凤平,吴兴福全自动生化分析仪项目间交叉污染[J]吉林医学,2009,30(23):45-46
论文作者:李磊,孟令征
论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年第44期供稿
论文发表时间:2014-4-24
标签:项目论文; 试剂论文; 甘油论文; 全自动论文; 种方法论文; 组合论文; 生化分析仪论文; 《中外健康文摘》2013年第44期供稿论文;