姚晓[1]2004年在《脑内催乳素释放肽在电针调整去卵巢大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴中的作用》文中指出目的：催乳素释放肽(prolactin releasing peptide，PrRP)是1998年发现的一个含有31个氨基酸的神经肽，能特异性地与孤儿受体家族中的GPR10结合，被认为是GPR10的内源性配基。PrRP除能促进催乳素(prolactin，PRL)释放外，在对中枢心血管功能、应激、摄食及睡眠的调节中也具有重要作用。PrRP的形态学分布和功能研究表明，PrRP与生殖内分泌关系密切。 在女性生殖内分泌系统中，存在着两项重要的功能轴，一项是下丘脑—垂体—卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis，HPOA)，另一项是下丘脑—垂体催乳素轴。在女性生殖内分泌系统中，HPOA对生殖活动具有重要的调节作用。研究表明，GnRH是HPOA行使功能的始动因素和核心，又是调控生殖内分泌体系的最终共同通路(Final common pathway)。这两条轴关系密切，主要表现在以下几个方面：PrRP能促进LH、FSH的释放，PrRP的基因表达又受性激素水平的调节，而雌激素水平也会影响PRL的合成和分泌。PrRP对FSH和LH的作用，究竟是通过直接调节，还是通过生殖调控体系的最终共同通路GnRH间接调节的?PrRP与GnRH的关系又是如何?目前国内外尚未见报道，也是本文的主要研究目的之一。 围绝经期综合征是女性生殖内分泌系统的一种常见疾病，是由于卵巢功能低下导致HPOA功能异常引起的。临床上采用针刺治疗这一疾病，已取得了良好的疗效。本实验室以往的研究也表明，电针(electroacupuncture，EA)对去卵巢大鼠HPOA功能异常具有一定的调整作用。PrRP是否参与针刺对HPOA的调整作用，国内外至今未见文献报道，这也是本文的第二个研究目的。 PRL和E_2可分别通过作用于脑内的PRL受体(PRL-R)和雌激素受体(ER-α，ER-β)影响PrRP、GnRH的合成和分泌及脑内其他神经递质和调质的分泌。但在针刺调整HPOA的过程中，针刺对PRL、E_2、及PRL-R和ER-α、ER-β有何影响，目前研究较少。因此，本文的第三个研究目的是探讨电针对E_2、PRL及其受体的影响。 方法：本文选用雌性SD大鼠，一半大鼠在乙醚麻醉下作双侧卵巢切除，术后4周，将去卵巢大鼠再随机分为OVX组和OVX+电针处理(OVX+EA)组。另一半正常大鼠分为正常组(州T)和正常+电针组(INT+EA)。电针穴位为“关元’夕、“中极”、双侧“子宫”和单侧“叁阴交”，每天电针1次，每次30分钟，连续3天。 采用脑核团推挽灌流技术测定各组动物内侧视前区GnRH释放变化;用免疫组织化学技术，观察去卵巢术及电针对大鼠脑内PrRP和GnRH阳性细胞数目的变化;通过原位杂交结合免疫组织化学的方法，检测下丘脑GnRH阳性神经元(纤维)与PrRP受体mRNA是否共存;采用点杂交和RT一PCR技术，观察去卵巢术和电针对PrRP及其受体mRNA和GnRH及其受体mRNA的影响，以及电针对脑内PRL受体mRNA、ER一a和ER一p mRNA的影响;用放射免疫分析技术测定电针对去卵巢大鼠外周血EZ和PRL水平的影响。 结果:OVx组延髓PrRP mRNA及PrRP阳性细胞数显着低于INT组，OVX组延髓、下丘脑和垂体的PrRP受体mRNA的表达显着高于INT组;OVX组与INT组相比，大鼠下丘脑GnRH mRNA的表达升高，下丘脑内侧视前区GnRH释放增多，但下丘脑GnRH阳性细胞数降低，垂体GnRH受.体mRNA的表达减少。 免疫组织化学结合原位杂交的结果表，明，下丘脑GnRH一ir与P:RP受体mRNA共存。PrRP mRNA与 GnRH mRNA的相关分析表明，二者之间存在着负性相关关系。 OVX+EA组与OVX组相t匕，大鼠延髓P:RP mRNA及PrRP阳性细胞数显着升高，分布在延髓、下丘脑和垂体的PrRP受体mRNA的表达显着降低;下丘脑GnRH mRNA的表达降低，内侧视前区GnRH释放减少，但下丘脑GnRH阳性细胞计数却增加。 OVX+EA组外周血中EZ和PRL水平显着升高;OVX+EA组下丘脑ER一a mRNA表达显着增加，而ER一p mRNA表达却显着减少;OVX十EA组大鼠下丘脑PRL受体mRNA的表达显着升高。 结论:1 PrRP受体mRNA可能与GnRH一ir共存。脑内PrRP mRNA与GnRH mRNA之间存在 负性相关关系。2脑内PrRP系统可能参与生殖内分泌的调节。3电针对去卵巢大鼠脑内Pr即系统具有一定的调整作用。PrRP系统可能参与电 针对HPOA的调整过程。
冯异, 马淑兰, 陈伯英[2]2006年在《脑内催乳素释放肽参与电针对围绝经期综合征大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴异常功能的调整》文中指出目的:在围绝经期大鼠模型上,研究脑内催乳素释放肽(prolactin releasing peptide,PrRP)在电针调整下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA)异常功能中的作用,以进一步探讨针刺治疗妇女围绝经期综合征的神经内分泌机制。方法:采用切除双侧卵巢的大鼠围绝经期模型(HPOA功能异常模型),随机分为去卵巢组(OVX)、去卵巢电针组(OVX+EA);再用正常SD大鼠作为对照,分成正常组(INT)和正常电针组(INT+EA)。OVX+EA和INT+EA组接受“中极”“关元”和双侧“子宫”、单侧“叁阴交”电针处理,每日1次,每次30 min,连续3 d。用放射免疫法测定外周血的雌二醇(E2)和黄体生成素(LH)含量;并用免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法观察延髓和下丘脑PrRP蛋白及mRNA的表达。结果:OVX组的延髓孤束核(NTS)和腹外侧网状核(VLRN)免疫阳性细胞数、终纹床核(BST)阳性纤维相对光密度、延髓和下丘脑PrRP mRNA含量显着降低(P<0.01)。OVX+EA组延髓的PrRP mRNA含量比OVX组显着增加(P<0.01);同时,各个核团的PrRP免疫阳性物质均增加(P<0.01或P<0.05);OVX+EA组血清E2水平比OVX组升高(P<0.05),而LH水平却降低(P<0.05)。但INT+EA组与INT组相比无明显的变化。结论:电针效应具有多环节、多靶点的特点。PrRP作为一种新的神经肽或神经激素,参与了电针调整HPOA功能异常的作用。这可能是电针治疗妇女围绝经期综合征的神经内分泌机制之一。
冯异, 田占庄, 马淑兰, 陈伯英[3]2007年在《电针对去卵巢大鼠脑内催乳素释放肽合成和表达的影响——电针治疗围绝经期综合征的神经内分泌机制的探讨》文中研究说明目的:在"围绝经期"大鼠模型上,研究脑内催乳素释放肽(prolactin releasing peptide,PrRP)在电针调整下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis, HPOA)异常功能中的作用,以进一步探讨针刺治疗妇女"围绝经期综合征"的神经内分泌机制。
姚晓, 马淑兰, 陈伯英[4]2004年在《电针及去卵巢术对大鼠脑内催乳素释放肽的影响》文中研究表明目的 :通过观察去卵巢术和电针对大鼠脑内催乳素释放肽 (prolactinreleasingpeptide,PrRP)的影响 ,以进一步探讨PrRP是否参与生殖内分泌功能调节及其在电针调整雌性生殖内分泌功能异常中的作用。方法 :动物分为假手术组 (Sham)、去卵巢组 (OVX)和去卵巢 +电针组 (OVX+EA)。用放射免疫法 (RIA)测定电针前后去卵巢大鼠血清中催乳素 (prolactin ,PRL)含量的变化 ;免疫组化和RT PCR观察电针及去卵巢对大鼠脑内PrRP蛋白及mRNA表达的影响。结果 :OVX大鼠与Sham组相比 ,血清PRL水平、孤束核PrRP免疫阳性细胞数、终纹床核PrRP阳性纤维相对光密度值及延髓PrRPmRNA都显着降低 (P <0 .0 1或 0 .0 5) ;OVX +EA大鼠与OVX组相比 ,以上指标均显着升高 (P <0 .0 5)。结论 :PrRP可能参与雌性大鼠下丘脑 垂体 卵巢轴 (HPOA)的调节 ;电针对HPOA异常功能的调整作用 ,可能部分是通过脑内PrRP系统实现的
冯异[5]2006年在《催乳素释放肽在雌鼠动情周期及针刺调整HPOA异常功能中的作用》文中提出催乳素释放肽在雌鼠动情周期及针刺调整HPOA异常功能中的作用目的：本文以具有正常动情周期的雌性大鼠和去卵巢大鼠为模型，观察脑内催乳素释放肽(prolactin releasing peptide，PrRP)及其受体GPR10(G-protein coupled receptor 10)是否参与雌性大鼠动情周期的调节和电针对下丘脑—垂体—卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovarian axis，HPOA)异常功能的调节，探讨脑内PrRP在动情周期调节中可能的生理作用，拓展对PrRP及其受体的生物学功能的认识，进一步阐明电针作用的神经内分泌机制。方法：(1)成年雌性SD大鼠，随机分为正常组(INT)、正常加电针组(INT+EA)、去卵巢组(OVX)、去卵巢加电针组(OVX+EA)。电针组穴位选用“关元”、“中极”、“子宫”和“叁阴交”，于每天上午8:00-10:00给予电针，每天一次，每次30分钟，连续3天；电刺激电流为连续波，频率2Hz，刺激强度为1～2mA，以动物下肢轻微抖动为度。采用免疫组织化学、实时定量PCR、放射免疫分析等方法，观察了大鼠脑内PrRP在延髓和下丘脑相关核团蛋白和mRNA表达的变化。(2)成年的雌性SD大鼠经阴道脱落细胞组织学检查，分为动情间期组(diestrus stage，DI)、动情前期组(proestrus stage，P)、动情期组(estrus stage，E)和动情后期组(metaestrus stage，M)，采用免疫组织化学和RT-PCR观察正常大鼠动情周期不同时相延髓和下丘脑相关核团PrRP及其受体GPR10的免疫阳性细胞和mRNA表达的变化。(3)采用免疫荧光双标结合激光共聚焦、离体脑片孵育和高效液相电化学法和荧光法、放射免疫分析法等，探讨大鼠脑内PrRP参与调节HPOA功能的可能机制。结果：(1)大鼠切除卵巢后，垂体LH出现超常分泌、血中雌二醇水平明显下降，子宫脏器系数下降，子宫形态结构改变。电针处理后，LH的超常分泌受到明显抑制，雌二醇水平有一定程度的升高，子宫脏器系数增加，子宫形态结构趋于正常。而正常组与正常加电针组之间没有明显差异；(2)去卵巢大鼠延髓孤束核和腹外侧网状核PrRP免疫阳性细胞数显着低于正常组，下丘脑终纹床核PrRP免疫阳性纤维平均光密度也降低。电针后，上述指标有不同程度的增加；(3)与正常组相比，去卵巢大鼠的延髓和下丘脑PrRPmRNA的水平明显降低，而去卵巢加电针组的PrRPmRNA水平显着回升；(4)动情前期组延髓孤束核和腹外侧网状核的PrRP免疫阳性细胞数明显减少，下丘脑终纹床核PrRP免疫阳性纤维平均光密度也减少；(5)动情前期组和动情期组的延髓和下丘脑PrRPmRNA的水平明显增高；(6)大鼠脑内PrRP受体—GPR10的表达在动情周期中未见明显变化；(7)在雌性大鼠的下丘脑内侧视前区，观察到PrRP受体——GPR10与GnRH共存于同一细胞中；(8)在去卵巢大鼠的离体下丘脑脑片中，加入不同浓度的PrRP-31可以明显抑制GnRH的超常释放，并呈明显的量效关系；在离体垂体培养的孵育液中，加入不同浓度的PrRP-31对垂体LH的释放无影响；(9)不同剂量的PrRP-31可引起去卵巢大鼠下丘脑脑片孵育的孵育液中，单胺类递质和氨基酸类递质的含量发生改变。结论：(1)脑内PrRP可能参与了电针调整去卵巢大鼠HPOA异常功能的神经内分泌机制，通过抑制下丘脑GnRH的超常释放，使垂体LH的过高分泌降低；(2)脑内PrRP可能通过调节GnRH峰的形成，参与了生理状态下动情周期的调节；(3)脑内PrRP在生理雌激素水平下，可促进GnRH的释放；在低雌激素水平时，可抑制GnRH的超常释放，其作用可能是通过PrRP受体直接介导的；(4)脑内的某些神经递质如单胺类递质和氨基酸类递质也间接地参与了脑内PrRP对GnRH释放的调节。
参考文献：
[1]. 脑内催乳素释放肽在电针调整去卵巢大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴中的作用[D]. 姚晓. 复旦大学. 2004
[2]. 脑内催乳素释放肽参与电针对围绝经期综合征大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴异常功能的调整[J]. 冯异, 马淑兰, 陈伯英. 针刺研究. 2006
[3]. 电针对去卵巢大鼠脑内催乳素释放肽合成和表达的影响——电针治疗围绝经期综合征的神经内分泌机制的探讨[C]. 冯异, 田占庄, 马淑兰, 陈伯英. 第九届全国针刺麻醉针刺镇痛及针刺调整效应学术研讨会论文集. 2007
[4]. 电针及去卵巢术对大鼠脑内催乳素释放肽的影响[J]. 姚晓, 马淑兰, 陈伯英. 针刺研究. 2004
[5]. 催乳素释放肽在雌鼠动情周期及针刺调整HPOA异常功能中的作用[D]. 冯异. 复旦大学. 2006