高京欢
（上海莘庄社区卫生服务中心检验科 201100）
【关键词】 C-反应蛋白；多点定标；对比评价
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）27-0168-02
C-反应蛋白（CRP）是机体处于应激状态时由肝脏大量合成的急性时相蛋白之一。健康人血清中，含量甚微。机体受到严重创伤、感染时大量合成，可升高数千倍[1]。炎性反应会快速升高，可在6～12h内被检测出来[2]。比起其他炎症指标，CRP值达到峰值和正常化更加快速，是临床上最有用的急性时相反应指标[3]。测定CRP浓度，可以帮助鉴别细菌和病毒感染，还可以监控抗生素治疗效果，同时还可以帮助诊断脑膜炎、肺炎支气管炎、尿路感染、类风湿关节炎、心肌梗死等。
CRP检测临床实验室常用免疫透射比浊法。我们将生化仪多点定标方式测定CRP的结果与快速CRP检测结果相比较，以寻求一种更好的方法服务于临床[4]。
1.材料与方法
1.1 标本来源
收集临床近3个月的门诊患者185例，其中男性99例，女性86例，年龄12～50岁。
1.2 仪器与试剂
奥林巴斯AU400全自动生化分析仪；宁波美康免疫比浊CRP检测试剂，批号20100820；宁波美康标准品，批号分别为100602、100818、100708、100710、100618；快速CRP检测采用上海奥普生物检测仪，试剂批号20100618。
1.3 测定方法
操作均根据仪器使用说明及分析参数编制检测程序，各检测对象均采用以上二种立法同时进行测试。生化分析仪多点定标采用6点为0、8、20、40、80、155 mg/L。主波长为340nm，副波长为700nm，反应终止时间为10min，取点时间为16和28；快速法采用封闭反应板、稀释、混匀加样、洗涤计数步骤操作。
1.4 统计学方法
组间比较采用t检验。
2.结果
2.1 对比实验
将185例患者标本用快速CRP检测2次，取均值，将结果分为6组：低值A组（＜8mg/L），低值B组（8～20mg/L），中值A组（20～40mg/L），中值B组（40～80mg/L），高值A组（80～100mg/L），高值B组（＞100mg/L）。再将同批标本在生化分析仪上用多点定标方式测定2次，取均值，结果见表1。
2.2 回收试验
将标准液（CRP浓度为158 mg/L）按回收试验操作方法稀释成不同浓度，加入到3份等体积的混合血清中，所得浓度为107.4、63.2、21.5 mg/L，每份连续测定3次取均值，3份混合血清用多点定标所得回收率为98.5%、103.6%、95.3%，平均回收率为99.1%；用快速法所得回收率为101.2%、92.3%、95.6%，平均回收率为96.4%。
2.3 精密度实验
取6份不同浓度的混合血清用多点定标、快速CRP法在批内连续测定20次，得批内精密度结果见表2。批内平均变异系数（CV）分别为3.1%、4.8%。取上述6份血清分装成20支放入冰箱中，每天各取一支有用二种方法平行测定3次，连续20d[5]，得批间精密度见表3.批间平均CV分别为4.7%、6.4%。
表2 二种方法批内测定结果比较（x-±s，mg/L）
2.4 干扰试验
2.4.1溶血干扰 将血红蛋白（Hb）标准液稀释成不同浓度加入到3份等体积的混合血清中，所得Hb加入浓度为30、15、10g/L，每份用二种方法测定3次，取均值。多点法所得的干扰结果为+1.7%、+1.0%、+0.5%。快速法所得的干扰结果为+1.8%、+1.0%、+0.6%。
2.4.2黄疸干扰 将高浓度的胆红素标准液（218.8umol/L）配成三种不同浓度加入到3份等体积的混合血清中，所得加入浓度为200.4、100.2、63.8 umol/L。多点法所得的干扰结果为+4.3%、+3.4%、+0.7%。快速法所得的干扰结果为+4.5%、+3.1%、+0.9%。
3.讨论
由CRP多点定标曲线可看出，其曲线并非一条直线，而为一条拟和曲线。快速法因采用多点定标，与多点法结果比较差异无显著性，但离散度和CV明显差于多点法，且有2例快速法结果＜8.0mg/L，多点法为10.1和11.5 mg/L。可能与快速法人工加样、人工加稀释液，人为误差比较大，且CRP值越不，影响越大。
同时，从对比实验、回收试验、精密度实验、干扰试验几个方面对二种方法进行了方法学评价，结果表明：二种方法都能获得较高的回收率，重复性方面多点法优于快速法，溶血和黄疸对CRP的干扰均不大。这主要由于免疫比浊法其浊度与免疫复合物的浓度不能呈很好的线性关系，所以不能按传统的比色方法进行测定，为确保结果可靠，生化仪免疫比浊法测定CRP应采用多点定标。快速法是采用多点定标测定的，但因手工操作太多，造成引起误差因素太多，离散度偏大，没有多点法检测优越，优点在于快速、便捷，在急需知道患者结果的情况下，也有很大的用途[6]，因此它更适用于急诊检验。而生化仪多点定标法批量检测较快速法简捷，且检测结果可传输至电脑保存、打印，增加了患者整个病程中不同阶段的数据的可比性。有资料显示，尽管血清中CRP的波动受感染及创伤过程影响，但其在血液中的浓度没有昼夜波动[7]。因此临床上血清CRP的检测可在一天中的任何时候进行，这使得临床上的住院患者在统一时间抽血、送检成为可能，从而使生化分析仪法的批量检测的优越性能够充分体现出来，大大地提高了检验科的工作效率。
【参考文献】
[1] 魏群德，付红敏，徐敏等.全身炎症反应综合症患儿血管性假性血友病因子、D-二聚体、C反应蛋白的变化与病情的关系[J].实用儿科临床杂志，2002，17：71-73.
[2] Fransen EJ，Maessen JG，Elenbaas TW，et al.Enhanced preoperative protein plasma levels as a rick factor for postoperative infections after cardiac surgery [J].Ann Thorac Surg，1999，67:134-138.
[3] 丛玉龙，王丁.当代检验分析技术与临床[M].北京：中国科学技术出版社，2002.273-274.
[4] 章谷生.将CRP的实验室数据更好地转化为临床可用的信息[J].上海医学检验杂志，1999，14：257-258.
[5] 何萍，陈向明.两种检验测血清C-反应蛋白的应用比较[J].检验医学2006，4：441-442.
[6] 袁斌，许荣.两种定标方法检测C-反应蛋白及与快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价[J].检验医学2005，4：382-384.
[7] Ewart HKM，Rider PM，Rifai N，et al.Absence of diurnal variation of C-reactive protein levels in healthy human subjects[J].Clin Chem，2001，47:426-430.
论文作者:高京欢
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第27期供稿
论文发表时间:2015/11/3
标签：多点论文; 快速论文; 血清论文; 浓度论文; 所得论文; 方法论文; 干扰论文; 《医药前沿》2015年第27期供稿论文;