解脲脲原体属于原核细胞型的微生物，和不育症、围产期感染与泌尿生殖道感染的发生都密切联系[1]，同时也是性传播疾病的一个关键病原体[2]。近些年在临床上，由于解脲脲原体所导致泌尿生殖道感染发生率愈渐提高，受到临床学者的广为关注。我们认为，对疑似患者做解脲脲原体检测意义重大。培养法是检测解脲脲原体的传统方法，随着研究的深入，PCR法也被逐渐的应用到临床检测中，本文便对其应用价值进行分析。1资料来源和方法1.1标本来源观察对象为我院妇科、男性科从2018年6月到2019年6月间就诊的、疑似为非淋球菌性尿道炎患者128例，其中男性患者57例、女性患者71例，患者年龄最小的是17岁、最大的是59岁，平均年龄为38.2±2.7岁，病程从1周到3周不等，平均病程为2.1±0.3周。所有男性患者皆有轻度的尿急、尿频和尿道刺痒感表现，部分患者尿道口残留有稀薄分泌物，女性患者则有外阴瘙痒、下腹不适、白带增多等症状表现。排除掉近十天内有抗生素、磺胺类药物服用史者。1.2方法先进行标本的采集。叮嘱受检者于采样前2h内不能排尿。男性：先用灭菌盐水清洁尿道口，将男性用无菌拭子伸入尿道2-3cm，用力旋转1-2圈，取出拭子；女性：先清洁宫颈口过多的分泌物，将女性用无菌拭子伸入宫颈内2-3cm，用力旋转1-2圈，取出拭子，取出的分泌物应略带粘膜。1.2.1PCR法往样品收集管中加入1ml无菌生理盐水，充分震荡混匀，然后把全部液体倒入1.5ml的灭菌离心管中，棉拭子靠近离心管壁挤干后丢弃。取所得溶液，以12000rpm持续离心5分钟，除去上清液，于沉淀中掺入50ul的DNA提取液，混合均匀后，静置10分钟左右，将5ul上清液加入到含有解脲脲原体的Taq中做PCR反应。1.2.2培养法收集到的标本拭子插进培养瓶，于接近液面上方的瓶壁处反复挤压、旋转拭子，促使拭子中的样本有效渗入到培养瓶中。混合均匀之后，取100ul加入检测卡的各孔位中，滴2滴无菌矿物油，盖上盖，于35~37℃的环境下孵箱培养。48h后，若培养液颜色无改变，判断为阴性，若培养基颜色由黄色变至红色，判断为阳性。1.3判断结果①真阳性为：2种及2种以上的检测所得结果皆为阳性；②真阴性为：2种及2种以上的检测所得结果皆为阴性；③灵敏度为：真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100.0%；④特异度为：真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100.0%。1.4统计方法本次研究所有资料均由同一人录入到EXCEL，保证资料准确、无误。将数据建立的EXCEL数据库导入SPSS20.0软件，用±s来代表计量资料，行t检验，P＜0.05认定为差异存在显著性。2结果2.1检测结果分析128例患者中，解脲脲原体真阳性患者37例，占28.9%，男7例、女30例，分别占18.9%、81.1%，两者差异比较存在统计学意义（x2=28.595，P＜0.05）。2.2培养法和PCR法检测结果对比由下表1中数据结果可见，PCR法检测的特异度98.9%、灵敏度100.0%均高于培养法的94.9%、61.2%，且灵敏度数据间的差异检验存在统计学意义（P＜0.05）。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆表1 培养法和PCR法检测结果对比（n） 检测方法 总数 阳性 阴性 真阳 真阴 灵敏度(%) 特异度(%) 培养法 128 34 94 30 75 61.2 94.9 PCR法 128 38 90 37 90 100.0 98.9 X2 42.516 2.663 P ＜0.05 ＞0.05 3讨论培养法和PCR法都是临床检测解脲脲原体的常用方法，其中培养法的操作简单，同时还能做药敏试验，适用于基层医院，但样品中易混入其它微生物比如说念珠菌、变形杆菌等，可能会使假阳性结果提高[3]。PCR法则能快速、精准且灵敏的检出病原体中DNA，可有效避免由于污染而导致的假阳性，能更灵敏和精准的反应出病原体感染情况，有一定技术条件的医院都能开展[4、5]。结合本文研究结果来看：PCR法检测的特异度98.9%、灵敏度100.0%均高于培养法的94.9%、61.2%，且灵敏度数据间的差异检验存在统计学意义（P＜0.05）。可见，这两种方法都能用来检测解脲脲原体，但PCR法较之于培养法有更高的灵敏度，建议在实验室条件较佳的医疗机构着重推广使用。参考文献：[1]张欠欠,仵恒立,胡军婷等.荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体结果分析[J].中国人兽共患病学报,2016,32(3):312-314.[2]张艳,华川,李苏利等.解脲脲原体生物群分布与耐药性差异研究[J].中国人兽共患病学报,2016,32(1):45-50.[3]胡盛君.泌尿生殖道感染病原体的核酸鉴定[J].内蒙古中医药,2014,33(21):53.[4]黄会,赵香依,吴多荣等.荧光定量PCR检测女性生殖道解脲脲原体原体的应用评价[J].海南医学,2015,27(18):2720-2722.[5]金宁,刘文力,杨琳等.泌尿生殖道炎细小脲原体PCR检测结果临床研究[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2015,14(5):304-307.
论文作者:雷星,田松娅,雷英俊
论文发表刊物:《中国保健营养》2019年第6期
论文发表时间:2019/12/2
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