宋朦[1]2016年在《复方中药对蛋鸡冷热应激影响研究》文中进行了进一步梳理寒冷和炎热的环境条件作为自然界中不可避免的应激原。它的反应机制很繁琐,几乎调动周身全部器官,直接影响到蛋鸡的生产性能。因此,为了利益扩大化,研究冷热应激复方中药制剂对蛋鸡的相关应激反应数据变得尤为重要。观测冷热应激刺激下,产蛋鸡得的生产性能指标、应激激素以及其他指标的变化系统、深入研究冷热应激对产蛋鸡的影响及调控。研究内容以及结果如下:试验一,复方中药制剂Ⅰ对冷应激影响研究。首先挑选健康的30周龄滨白鸡90只,该蛋鸡自由采食,饲喂基础日粮。并将它们平均分布在叁组,30/只一组。A和A1组温度保持在11-15℃这个区间,B组温度保持在20-24℃这个区间。只在A1组饲料里面添加3%的复方中药制剂Ⅰ。1生产性能测定:每天固定时间称量剩下的饲料并进行饲喂,收集产蛋情况并做好登记。最后汇总统计出叁组的相关数据。此试验结果显示如下,寒冷的环境条件下,日均采食量、产蛋重和料蛋比升高,产蛋率下降。对比A与A1组,A组采食量大于A1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。A组产蛋重大于A1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。A组产蛋率小于A1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。A组料蛋比大于A1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。2测定血清激素水平:在试验开始的第28d采用抗凝采血管从翅静脉采血进行测定。此试验结果显示如下,寒冷的环境条件下,蛋鸡的T4升高,其余四种激素含量均降低。对比A与A1组,T4降低(P﹤0.05),T3、GH、E2和COR的含量升高。3血清生化试验:在试验开始的第28d采用抗凝采血管从翅静脉采血进行测定。此试验结果显示如下,寒冷的环境条件下,钾、钙、谷丙转氨酶和葡萄糖升高,剩下的除胆固醇外其余均降低。对比A与A1组结果可知,A1组血清中钾、钙、谷丙转氨酶和葡萄糖降低。血清中钠、氯和磷升高。总蛋白和谷草转氨酶升高。试验二,复方中药制剂Ⅱ对热应激影响研究。首先挑选健康的30周龄滨白鸡90只,该蛋鸡自由采食,饲喂基础日粮。并将它们平均分布在叁组,30/只一组。C组和C1组温度保持在26-30℃这个区间,B组温度保持在20-24℃这个区间。只在C1组饲料里面添加3%的复方中药制剂Ⅱ。1生产性能测定:每天固定时间称量剩下的饲料并进行饲喂,收集产蛋情况并做好登记。最后汇总统计出叁组的相关数据。本实验结果显示如下,炎热环境条件下,日均采食量、产蛋率和产蛋重降低,料蛋比升高。对比C与C1组,C组采食量小于C1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。C组产蛋重小于C1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。C组产蛋率小于C1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。C组料蛋比大于C1组,且两组相比差异显着(P﹤0.05)。2测定血清激素水平:在试验开始的第28d采用抗凝采血管从翅静脉采血进行测定。此试验结果显示如下,炎热环境条件下,蛋鸡的T4、T3升高,GH、E2和COR的含量降低。对比C与C1组,C1组的T3和T4降低(P﹤0.01),C1组GH、E2和COR的含量升高(P﹤0.05)。3血清生化试验:在试验开始的第28d采用抗凝采血管从翅静脉采血进行测定。此试验结果显示如下,炎热环境条件下,谷草转氨酶、谷丙转氨酶升高,剩下的除胆固醇外其余均降低。对比C与C1组结果可知,C1组钠、钾、氯、钙、磷、总蛋白、葡萄糖和谷丙转氨酶提高,谷草转氨酶和甘油叁酯降低。综合各项数据结果表明复方中药制剂在一定程度上减轻环境条件对蛋鸡产生的不良反应。
于卫东[2]2001年在《复方中药制剂抗冷应激原作用及其机制的研究》文中进行了进一步梳理本研究选用健康成年Wistar大鼠72只，随机分为6组，每组12只，分别用待选中药配方1、2、3、复合维生素、蒸馏水灌胃和正常饲养，给药3周后，停药2天，前5组进行冷水（水温10℃）游泳，对冷水游泳时间、血清皮质酮、促肾上腺皮质激素（ACTH）、胰高血糖素和游离甲状腺素（FT_4）水平的变化以及肾上腺皮质束状带细胞超微结构进行观察，对具有抗寒能力的中药配方进行筛选，以获得最有效的抗冷应激原中药配方。结果表明：（1）在所筛选的中药配方中，配方1能显着延长大鼠的冷水游泳时间，其作用效果显着高于复合维生素组（P＜0.05）；（2）配方3组和维生素组皮质酮浓度分别为117.659±20.09μg/dL和106.324±25.25μg/dL，与空白对照组血中皮质酮浓度（87.106±12.44μg/dL）相比较差异显着（P＜0.05），配方1组、配方2组与空白对照组相比较差异不显着（P＞0.05）；给药各组血清中促肾上腺皮质激素（ACTH）含量与空白对照组相比无显着差异，与正常组比较差异显着（P＞0.01）；各配方组和维生素组胰高血糖素浓度均显着高于空白对照组，差异显着（P＜0.05）；维生素组甲状腺素浓度与空白对照组比较差异显着（P＜0.01）；各中药配方组FT_4浓度均低于空白对照组，统计学上差异不显着，阳性对照组和空白对照组FT_4浓度均高于正常组，且差异显着。（3）各中药配方组和维生素组肾上腺皮质束状带细胞内脂滴比正常组细胞内脂滴较少，线粒体内容物减少，线粒体内有结晶出现。空白对照组细胞基质电子密度明显降低，嵴断裂甚至消失，出现空泡样变化，此为线粒体功能丧失的早期变化，说明中药和维生素可以减轻冷应激对细胞器的损伤。本实验研究结果表明，各中药配方和维生素复合制剂均能提高机体抗冷应激原能力，减轻寒冷应激对机体造成的损伤。
屠云洁[3]2011年在《冷应激对雏鹅HPA和HPT轴活性影响及其相关基因表达调控的研究》文中认为应激是机体对各种刺激所产生的一种非特异性应答反应。劣性应激可引起畜禽生产性能下降,诱发多种疾病,甚至造成死亡。寒冷是雏禽最普遍的应激原之一,由此引起的直接和间接经济损失是制约北方畜牧业发展的重要因素,研究动物冷应激发生机制,探索科学的应激监测方法,对提高应激预防水平,保障畜牧业发展有重要意义。冷应激对动物HPA和HPT轴为主的神经内分泌系统产生重要影响。然而未见冷应激对雏鹅HPA、HPT轴的影响及其相关基因表达调控的研究报道。本研究以7日龄皖西白鹅为试验对象,研究于12℃±1℃条件下进行急性冷应激处理时对HPA、HPT轴的影响。利用放射免疫法、FQ-RT-PCR等技术动态考察冷应激反应中血液生理生化指标、应激激素相关基因TRH、TSH、CRH、ACTH和HSP70基因mRNA的变化规律。同时采用RT-PCR技术克隆测序HSP70基因cDNA序列,并进行生物信息学分析。为深入研究动物冷应激机理,动物冷应激的早期监测和防治提供重要实验依据。研究主要取得如下成果：1.雏鹅受到冷应激时血相指标变化的测定结果以7日龄皖西白鹅为试验对象,研究于12℃±1℃条件下进行急性冷应激对皖西白鹅雏鹅某些血相指标变化的影响。研究结果表明,全血中红细胞(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、红细胞分布宽度(RDW)总体呈减少趋势,且RBC在冷暴露3h、6h和冷暴露结束后0.5h和3h极显着低于冷应激前的水平；HCT和HGB在冷暴露3h、6h和冷暴露结束后3h时显着低于冷应激前的水平；RDW在冷暴露6h后至结束冷暴露后12h期间均极显着低于应激前水平(P<0.01)。白细胞(WBC)在冷暴露12h和24h时显着升高。淋巴细胞绝对值(LYM)在冷暴露6h时显着低于应激前的水平(P<0.05),淋巴细胞百分比(LYM%)在冷暴露后3h、6h和12h时显着升高(P<0.01),但冷应激24h时淋巴细胞百分比已经恢复正常,雏鹅已经开始适应。首次获得了皖西白鹅血液生理指标参考值,为兽医临床诊断与治疗提供了重要依据之一2.雏鹅冷应激时HPA、HPT轴应激激素测定的结果研究于12℃±1℃条件下进行急性冷应激处理时对雏鹅下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴和下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴的影响。结果表明,FT3在冷暴露6h和12h时显着升高。FT4在冷暴露3h显着升高(P<0.01),随后逐渐下降,至结束冷暴露后12h显着降低(P<0.05)。T3在冷暴露过程中逐渐升高,在冷暴露6h和结束冷暴露后0.5h和3h时明显高于应激前水平。T4在冷暴露6h和结束冷暴露后6h时达到峰值。Cor在冷暴露3h时显着升高(P<0.05),并在冷暴露期间保持高水平。血清中ACTH随冷暴露时间延长而逐渐升高,在冷应激6h时显着高于应激前的水平(P<0.01),至冷暴露结束后3h时,ACTH再次明显升高(P<0.05)。ACTH、Cor和FT3反应敏感,初步认为它们可以作为评估冷应激程度的辅助指标。3.雏鹅冷应激反应中HPA、HPT轴应激激素相关基因表达调控规律采用RT-PCR技术对HPA、HPT轴应激激素相关基因TRH、TSH、CRH和ACTH克隆、测序,同源性比较,鹅TSH基因测序序列与GenBank上鹅TSH序列同源性为100%。鹅TRH、CRH、ACTH基因序列与GenBank上鸡TRH、CRH、ACTH基因序列同源性分别为94%、95%和95%。利用实时荧光定量逆转录PCR技术分析这些基因的表达调控规律。下丘脑TRH基因mRNA转录量在冷应激0.5h、3h、6h、9h、18h与应激结束后1h、6h和12h显着升高,其他时间内均下降到室温时的转录水平。垂体TSH基因nRNA转录量在冷应激1.5h到12h期间显着升高,应激12h时转录水平达到最高点,而其他应激时间均降低到应激前的水平,应激结束后1h到6h期间垂体TSH基因mRNA转录水平也被显着升高,冷处理结束后9h-24h已恢复到应激前的正常水平。下丘脑CRH基因nRNA转录量在冷应激3h、9h、18h时与应激结束后0.5h、1h和9h显着升高,其他时间点降到应激前的正常水平。肾上腺ACTH基因mRNA转录水平在冷应激1.5h-9h、18h时显着升高,其他时间点均迅速下降到应激前水平；冷处理结束后0.5h和3h,由于又突然受到热的室温应激,ACTH基因mRNA转录量又显着升高,其他时间点降到应激前的正常水平。下丘脑TRH基因mRNA表达呈现波动性变化趋势,但表达量均不超过1.5,说明下丘脑TRH基因是负调控的。下丘脑CRH、垂体TSH和肾上腺ACTH基因1nRNA的表达量分别在2.27-7.76、1.75-6.17、5.5-14.83范围内,总体呈上升趋势,说明TSH、CRH和ACTH基因均是冷应激反应时的正调控基因。4.鹅HSP70基因的克隆和生物信息学分析首次克隆了皖西白鹅HSP70基因cDNA序列2181bp,包括CDS全序列1905bp和3’UTR序列276bp,编码634个氨基酸。与GenBank上乌棕鹅HSP70基因cDNA序列进行比对分析,皖西白鹅HSP70基因共存在15个核苷酸变异(均在CDS区),只有1个蛋白质位点的差异,编码区同源性序列比对,与乌棕鹅同源性达99%,与家鸭、鸡、日本鹌鹑HSP70基因编码区同源性序列同源性分别达97%、92%和92%,与哺乳动物同源性均高于82%,进一步证实了HSP70在不同生物间的高度保守性。利用生物信息学预测鹅HSP70蛋白质的结构与功能,结果表明,HSP70蛋白质以亲水性区域为主；该蛋白具有丰富的B细胞抗原位点；抗原表位区域、柔韧性区域和表面可能性区域出现了较多的重迭区,这些区域相对易于形变,便于抗原、抗体的自由结合,可能是抗原位点的富集区；该蛋白二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,无明显的跨膜螺旋,含有34个磷酸化位点,无糖基化位点,推测其可能在细胞信号转导与调控中发挥重要作用。5.雏鹅冷应激反应中HPT、HPTA轴HSP70mRNA的动态表达规律实时荧光定量逆转录PCR法检测结果表明,下丘脑HSP70mRNA转录量在冷应激(12℃±1℃)1.5h、6h和9h显着升高,其他时间点均恢复到正常水平；在冷处理结束后6h内HSP70mRNA转录水平均显着升高,应激结束后6h转录水平最高,随后又迅速下降到室温下的转录水平。垂体HSP70mRNA转录量在冷应激0.5h、1.5h、6h和12h时显着降低,其他应激时间均升高到应激前的水平,应激结束后0.5h、3h和6h转录水平也被显着降低,随后逐渐升高到应激前的正常水平。甲状腺HSP70mRNA转录量在冷应激0.5h时显着升高,随后迅速下降到应激前的水平,应激3h、6h和12h时显着降低。应激结束后0.5h和3h转录量显着升高,其他时间点逐渐恢复到正常水平。肾上腺HSP70基因mRNA转录水平在冷应激1.5h、6h、9h时和冷处理结束后3h到6h期间表达水平被显着降低,其他应激时间恢复到应激前的水平。冷应激期间及结束冷处理后一段时间,肾上腺HSP70基因mRNA表达水平都很低,在0.02-0.57范围内,HSP70基因mRNA表达量仍然不超过1,推测HSP70基因也是肾上腺组织细胞表达的下调基因,是负调控的。雏鹅冷应激反应中,HSP70基因在下丘脑、垂体、甲状腺和肾上腺中的表达规律是不同的,在不同的组织中有不同的调控规律。下丘脑HSP70mRNA转录水平最高,表达量总体呈现明显上升趋势,是冷应激反应时的正调控基因：而它在垂体、甲状腺和肾上腺中的表达总体是被抑制的,是垂体、甲状腺和肾上腺冷应激反应时的负调控基因。初步认为可以将HSP70作为动物冷应激的分子生物标志。
王玮[4]2007年在《冷应激对家猪、野猪HSP70、GR mRNA表达的影响》文中提出冷应激是制约北方畜牧养殖业发展的主要因素之一,野猪对抗寒冷等不利环境的能力强于家猪,研究冷应激发生机制,探讨家猪、野猪冷应激体内重要分子指标的变化规律,对揭示家猪、野猪抗逆性差异、合理利用野猪资源具有重要意义。本实验分别采取常温、0℃下冷暴露2h、﹣5℃下冷暴露2h、﹣10℃下冷暴露2h的军牧1号家猪、野猪血淋巴细胞。从HSP70、GR的表达水平进行研究,通过荧光定量RT-PCR方法检测HSP70、GR mRNA的表达水平。结果表明,HSP70、GR mRNA的表达水平与不同温度冷应激有一定的相关性。随着温度的降低,冷应激强度增大,家猪、野猪HSP70 mRNA的表达水平升高,且野猪HSP70 mRNA的升高程度较家猪明显;GR mRNA水平随温度降低而下降,且家猪下降水平较野猪明显。家猪、野猪在相同冷环境下,HSP70、GR mRNA的表达水平具有明显差异。提示野猪具有较强的抗寒性及抗逆性,与HSP70、GR mRNA的表达差异有关。
吴永魁[5]2006年在《仔猪冷应激反应中激素、HSP70及其mRNA的动态分析》文中研究说明动物冷应激是制约北方畜牧养殖业发展的主要因素之一,研究冷应激发生机制,探讨应用分子标志物作为评价动物冷应激的指标,对冷应激的预警、防治有重要意义。本研究选择“军牧1号”仔猪,应用放射免疫、免疫印迹、实时荧光定量PCR等技术,从-10℃~-4℃、-3℃~3℃、4℃~10℃叁个冷应激强度和冷暴露后不同时间,动态考察了冷应激时血液生理生化、应激激素和四种组织细胞中HSP70及其mRNA的变化规律,提出了将淋巴细胞HSP70及其mRNA作为评价动物冷应激的生物标志物,同时,对“军牧1号”猪HSP70的基因进行了克隆和测序,获得了编码HSP70的核苷酸序列,并对其同源性进行了比较分析。
参考文献：
[1]. 复方中药对蛋鸡冷热应激影响研究[D]. 宋朦. 吉林农业大学. 2016
[2]. 复方中药制剂抗冷应激原作用及其机制的研究[D]. 于卫东. 中国人民解放军军需大学. 2001
[3]. 冷应激对雏鹅HPA和HPT轴活性影响及其相关基因表达调控的研究[D]. 屠云洁. 扬州大学. 2011
[4]. 冷应激对家猪、野猪HSP70、GR mRNA表达的影响[D]. 王玮. 吉林大学. 2007
[5]. 仔猪冷应激反应中激素、HSP70及其mRNA的动态分析[D]. 吴永魁. 吉林大学. 2006