朱慧 (姜堰中医院 江苏泰州 225500)
【摘要】目的：分析建立高效液相色谱法（HPLC）测定硝酸异山梨酯含量的方法。方法：采用高效液相色谱仪，采用HPLC法进行定量测试，填充剂采用十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为甲醇-水(54：46)，流速为1.0mL?min-1,紫外检测波长为 230nm，柱温30℃。结果：当硝酸异山梨酯位于10.12—182.4μg?ml-1的范围内时，其线性关系良好（r=0.9998），平均回收率为100.5%。结论：使用HPLC法对酸异山梨酯的含量进行测定，可获取准确的结果，HPLC可应用于产品的质量控制方面。
【关键词】高效液相色谱法 硝酸异山梨酯 含量分析
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）35-0267-01
硝酸异山梨酯为血管扩张类药剂，临床可用作冠心病、心绞痛疾病的预防治疗，用药过程中应根据患者的个体反应来调整用药剂量，为了准确测定硝酸异山梨酯的，进一步规范临床用药，本文笔者采用高效液相色谱法（HPLC）测定硝酸异山梨酯含量，可收获满意的效果，现将结果报告如下：
1.仪器与试剂
采用Agilent 1200高效液相色谱仪，硝酸异山梨酯对照品来自于中国药品生物制品检定所，选用纯度较高的色谱纯甲醇与去离子水，其余试剂均为分析纯，选用单硝酸异山梨酯缓释片（国药准字H20066717，齐鲁制药有限公司）。
2.测定方法与结果
2.1测定条件
测定参照(2010版《中国药典（二部）》中有关硝酸异山梨酯原料药含量测定方法的规定进行。色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB 色谱柱C18（4.6×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水(54：46)，流速为1.0mL?min-1,紫外检测波长为 230nm，柱温30℃，进样量为20μl。在该色谱条件下，色谱峰峰形对称尖锐，注意样品与内标留取时间，样品的留置时间为6.5分钟，内标的留置时间为8.1分钟。
2.2 线性关系
对照品储备液的配备：精准抽取50.7mg硝酸异山梨酯对照品置于100ml量瓶中，以适量甲醇溶解，以流动相将其稀释至刻度并轻轻摇匀。绘制标准曲线的方法：分别从制备好的对照品储备液中精准抽取0.5ml、1ml、3ml、5ml，7ml、9ml的测试液，分别将其置于25m的量瓶中，再以流动相将各量瓶中的储备液稀释至刻度，并轻轻摇匀。在上述色谱条件下进行测定，以峰面积A与浓度C绘制标准曲线，线性回归方程为A=6291.5C+4.9388，r=0.9998，结果显示对照品储备液的浓度位于10.12—182.4μg?ml-1范围时，其与峰面积线性关系良好。
2.3 溶液的配备
对照品溶液的配备：精准抽取按上述方法配备好的对照品储备液5ml，并置于25ml的量瓶中，以流动相将其稀释至刻度，轻轻摇匀，即为对照品溶液。
供试品溶液的配备：取20粒供试品内容物，并将其混匀，称取适量置于50ml量瓶中，加入适量流动相，振摇15min，待硝酸异山梨酯溶解后以流动相将其稀释至刻度，轻轻摇匀并滤过，即为供试品溶液。
2.4 精准度测试
取20ul供试品溶液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下进行测定，进样需重复六次，以峰面积作为考察依据，结果显示RSD=0.52%（n=6），提示HPLC法测试所得精准度较高。
2.5 HPLC加样回收率测试
采用加样回收测试法，取已知浓度的样品（3.15mg/粒）共六份，分别置于50ml量瓶中，再分别加入4ml、5ml、6ml的对照品储备液，加入适量流动相，振摇15min，溶解硝酸异山梨酯，以流动相稀释至刻度后再摇匀、滤过，结果见表1。
3.讨论
本次探究中将硝酸异山梨酯的对照品以流动相稀释至约为10μg/ml的溶液，将其置于200-400nm的波长内进行扫描，结果显示样品在波长210nm处实现最大程度的吸收。由于考虑到空白溶剂干扰的情况，笔者参照陈岐信等[1]做法，选择波长230nm为硝酸异山梨酯的测定波长。本文通过采用高效液相色谱（HPLC）法测定硝酸异山梨酯的含量，具有快捷、精准的特点，该方法尤其使用于医院药品制剂药品质量工作。
参考文献
[1] 陈岐信,孙艳华,黄桂华.阿司匹林单硝酸异山梨酯复方缓释片含量测定方法的研究[J].齐鲁药事;2012,04(24):66-68.
论文作者:朱慧
论文发表刊物:《医药前沿》2013年第35期供稿
论文发表时间:2014-3-7
标签：山梨论文; 硝酸论文; 色谱论文; 高效论文; 溶液论文; 波长论文; 含量论文; 《医药前沿》2013年第35期供稿论文;