（1扬州大学临床医学院(扬州大学附属苏北医院)胃肠外科 江苏 扬州 225001）
（2扬州大学-扬州市普通外科研究所 江苏 扬州 225001）
【摘要】 目的：探讨胃癌组织中半乳糖凝集素1（galectin-1,Gal-1）和趋化因子受体4（Chemokine Receptor 4,CXCR4）蛋白的表达在胃癌患者术后预后评估中的预测价值。方法：应用免疫组织化学染色法（Immunohistochemical,IHC）检测75例胃癌组织石蜡切片中Gal-1和CXCR4蛋白的表达情况，分析其表达的相关性，以及与胃癌预后之间的关系。结果：75例胃癌组织标本中59例（78.67%）Gal-1蛋白表达阳性，54例CXCR4蛋白表达阳性（72%）。胃癌组织在Gal-1蛋白表达与CXCR4蛋白表达之间密切相关，所有CXCR4蛋白阳性表达组织其Gal-1蛋白表达均为阳性。Kaplan-Meier分析显示Gal-1阴性和CXCR4阴性胃癌患者的总生存时间（OS）为57.94±4.11个月；Gal-1阳性、CXCR4阴性患者的OS为：55.60±6.94个月；Gal-1阳性、CXCR4阳性患者的OS为：41.17±2.86个月（χ2=6.57，P＜0.05）。结论：胃癌组织中Gal-1和CXCR4蛋白是胃癌术后预后不良的重要指标，Gal-1和CXCR4有望成为胃癌靶向治疗的新靶标。
【关键词】 胃癌；半乳糖凝集素1；趋化因子受体4；预后
【中图分类号】R735.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）05-0033-02
Expression of Galectin-1 and CXCR4 in gastric carcinoma and their clinical significance
Wu Xiaoqing1,2, You Xiaolan1,2, Wang Zheng1,2, Tang Xiaoli2, Zhang Qi1,2, Jin Zhixiang2, Wang Daorong1,2(Correspondence?author).
1 Clinical Medical College, Yangzhou University(Northern Jiangsu Province Hospital), Department of General Surgery, Yangzhou, Jiangsu 225001,China;
2 General Surgery Institute of Yangzhou, Yangzhou University, Yangzhou,Jiangsu 225001,China
【Abstract】Objective To investigate the relationship between the expression of Galectin-1 and Chemokine Receptor 4 (CXCR4) protein in gastric cancer (GC) and the prognosis of GC patients. Methods Immunohistochemical (IHC) staining was used to investigate Gal-1 and CXCR4 expression in paraffin-embedded sections from 75 patients with GC. The relationships between Gal-1 and CXCR4, and survival were analyzed. Results Among the 75 cases, 59(78.67%) were positive for Gal-1, and 54(72%) were positive for CXCR4 protein. There was a significant association between CXCR4 protein and Gal-1 IHC staining, and all CXCR4 protein positive samples were positive for Gal-1 protein. Kaplan-Meier analysis showed that the overall survival (OS) time of patients with Gal-1-negative and CXCR4-negative gastric cancer was 57.94±4.11 months; 55.60±6.94 months for patients with Gal-1-positive but CXCR4-negative GC tissue; and 41.17±2.86 months for patients with Gal-1-positive and CXCR4-positive GC tissue (χ2=6.57，P＜0.05). Conclusion Gal-1 and CXCR4 proteins in GC are indicators of poor prognosis in GC, and Gal-1 and CXCR4 may be a novel target for the treatment of GC.
【Key words】Gastric cancer, Galectin-1;Chemokine Receptor 4 (CXCR4);Prognosis
胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一。近年来，尽管胃癌的诊断和治疗已经取得了一定的进展，但是进展期胃癌患者的五年生存率仍不足40%[1]。本实验就Gal-1和CXCR4在胃癌中的表达进行探索研究，并分析其表达与胃癌患者术后OS之间的关系，旨在为胃癌的靶向治疗提供可供参考的新靶点。
1.材料与方法
1.1 临床资料
收集2013年1月—6月在江苏省苏北人民医院胃肠外科行胃癌根治术的的胃癌患者的标本及临床资料，共75例患者纳入本研究，所有病例术前未行放、化疗及其他抗肿瘤治疗，临床随访资料完整。本组病例中男性52例，女性23例，年龄60.07±8.91（37～77）岁。
兔抗人galectin-1、CXCR4抗体、兔抗鼠二抗（美国Santa Cruz公司）；DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司；PBS液、柠檬酸修复液、枸橼酸盐缓冲液、0.1%HCl、4%甲醛溶液、酒精、二甲苯、丙酮酸、树胶等由江苏省苏北人民医院实验中心提供。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
1.2 免疫组织化学染色法检测胃癌组织的Gal-1和CXCR4的表达
所有标本均经苏木-伊红（HE）染色证实为胃腺癌，胃癌组织蜡块4μm切片，置于二甲苯、梯度酒精水化，过氧化氢浸泡去除内源性过氧化氢酶，柠檬酸修复抗原，血清封闭液封闭，一抗4℃孵育过夜，二抗室温孵育2h，DAB显色5min，苏木素复染，依次梯度酒精、二甲苯脱水，中性树胶封片，镜下观察。
1.3 染色结果的判定
在双盲情况下，由两位主治医生职称以上病理医生独立评分。评分标准如下：计算阳性表达的细胞在全部胃癌细胞所占的比例计分： 0分（0%～5%）， 1分（6%～25%）， 2分（26%～50%）， 3分（51%～75%）， 4分（＞75%）；按照着色强度计分：0分（阴性），1分（弱阳性），2分（中等阳性），3分（强阳性），最终评分为两者乘积（0～12分）。
1.4 随访
术后3月开始随访登记，采用电话、信件、门诊复查、建立微信群等方式进行随访。定期进行胸腹部CT、胃镜或全身PET-CT、血尿粪三大常规、血生化、肿瘤标记物等检查了解肿瘤有无局部复发或远处转移。随访截止时间为2018年10月31日。
1.5 统计学分析
应用SPSS24.0统计软件处理数据。计数资料比较采用χ2检验，计量资料用均数±标准差表示，均数的比较采用独立样本t检验，采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Log-rank法比较两组的生存率。P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 Gal-1、CXCR4蛋白在胃癌组织中表达情况
应用IHC检测了75例蜡块包埋的原发性胃癌组织中Gal-1及CXCR4蛋白的表达情况，结果示Gal-1蛋白的免疫组化积分是7.05±2.65（1～12），CXCR4蛋白的IHC积分是6.41±2.24（2～12）。对免疫组化积分结果进行ROC检验，结果示Gal-1蛋白及CXSR4蛋白的cut-off值均为5。按照这个标准，75例患者中有59例（78.7%）Gal-1阳性表达，16例（21.3%）患者Gal-1阴性表达； 21例（28%）患者CXCR4蛋白阳性表达，54例（72%）阴性表达。
2.2 胃癌组织中Gal-1蛋白与CXCR4蛋白表达相关性分析
Pearson相关性分析显示原发性胃癌组织中Gal-1蛋白和CXCR4蛋白的表达呈正相关（r=0.912，P＜0.05）。所有CXCR4蛋白阳性表达组织中Gal-1蛋白表达均为阳性。
2.3 胃癌组织中Gal-1、CXCR4蛋白的表达与患者的预后分析
所有患者均得到有效随访，中位随访时间为术后41（5～70）个月。其中47例患者发生胃癌相关性死亡，5年生存率37.33（28/75）。根据Gal-1表达情况，将患者分为Gal-1阳性组（n=59）和Gal-1阴性组（n=16）。Kaplan-Meier分析结果显示，Gal-1阳性组患者的总生存期（OS）为42.63±2.758个月；Gal-1阴性组患者的OS为57.94±4.11个月；两组之间差异有统计学意义（χ2=4.24,P＜0.05）。同样，根据CXCR4蛋白检测结果将患者分为CXCR4阳性组（n=54）和CXCR4阴性组（n=21）。CXCR4阳性组患者的OS为41.17±2.86个月；CXCR4阴性组患者的OS为57.68±3.57个月；两组之间差异有统计学意义（χ2=6.57，P＜0.05）。
此外，联合分析 Gal-1、CXCR4对胃癌患者预后的影响，将胃癌患者分为三组，其中Gal-1、CXCR4均为阴性组患者（n=16）的OS时间为57.94±4.11个月；Gal-1阳性、CXCR4阴性组患者（n=5）的OS为：55.60±6.94个月；Gal-1、CXCR4均为阳性组患者（n=54）的OS为：41.17±2.86；三组之间差异有统计学意义（χ2=6.57, P＜0.05）。
3.讨论
Gal-1是由LGALS1基因编码的含有135个氨基酸的蛋白质，在多种肿瘤细胞中都有表达[2]，参与多种肿瘤进程[3-4]。然而关于Gal-1与胃癌的预后目前罕见报道。在本研究中，我们通过免疫组织化学染色法检查了75例胃腺癌组织样本中的Gal-1和CXCR4蛋白表达情况。78.67%的患者Gal-1蛋白表达呈阳性，Kaplan-Meier生存分析证实Gal-1在胃癌中具有显著的预后价值。Gal-1阳性患者的生存率显著低于Gal-1阴性的患者。因此，检测胃癌组织中Gal-1的表达可能有助于判断胃癌患者的预后。
CXCR4与趋化因子12（CXCL12）结合参与体内多种生理机制，对于多种肿瘤的发展和转移起重要作用。我们发现CXCR4蛋白的表达随着Gal-1的过表达而增加，并且与胃癌患者不良的生存率显著相关。
已有研究发现在肾癌细胞中Gal-1可以介导CXCR4的表达影响肾癌患者的预后，但是在胃癌细胞中Gal-1与CXCR4蛋白表达的相关性目前未见报道。CXCR4蛋白影响胃癌患者预后的机制尚不完全清楚，我们的实验显示CXCR4蛋白与胃癌组织中Gal-1的表达显著相关。Gal-1和CXCR4蛋白与患者的预后具有一致性，这提示其中存在相应的联系。我们的结果显示Gal-1和CXCR4蛋白的过表达尤其是两者同时存在与胃癌患者的不良生存率显著相关。因此我们预测Gal-1和CXCR4蛋白的阳性表达提示胃癌的不良预后，Gal-1和CXCR4蛋白有望成为胃癌新的预后标志物。
【参考文献】
[1]魏波，卫洪波.进展期胃癌的外科治疗策略[J].中华胃肠外科杂志，2018，21(10):1099-1102.
[2]吴银霞，周广臣，牛荃，等.半乳糖凝集素-1在膀胱癌中的表达及临床意义[J].现代泌尿外科杂志，2018，23(4):259-262.
[3]张建祥，马艳梅，邱新光，等.半乳糖凝集素-1表达对甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭的影响[J].中华实验外科杂志，2018，35(5):915-917.
[4]李娟，孙冉冉，何玉婷，等.半乳糖凝集素-1在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志，2018，35(8):1534-1537.
[5]杨麒麟.曲妥珠单抗联合SOX方案对老年HER2阳性晚期胃癌血清FSP-l，MRP-l4，CXCR4及SDF-1的影响[J].医药前沿，2018，8(30):163-165.
基金项目：江苏省第五期“333工程”高层次人才培养专项（BRA2017153）
论文作者:吴晓清1，2,尤小兰1，2,汪正1，2,唐小丽2,张
论文发表刊物:《医药前沿》2019年5期
论文发表时间:2019/4/17
标签：胃癌论文; 蛋白论文; 阳性论文; 患者论文; 阴性论文; 组织论文; 个月论文; 《医药前沿》2019年5期论文;