江苏省常州市第三人民医院，213001
摘要：目的：分析丹参素在人体内的药代动力学及其测定方法。方法：采用尿药法研究丹参素的测定及其在人体的药代动力学。本文选取C18小柱对尿样中的丹参素进行净化和富集，然后再采用ODS 柱上以乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH为2.8) 为流动相，再进行280nm检测。结果：健康人体po含丹参素20mg的复方中药颗粒剂B和丹参水煎剂后，丹参素的消除半衰期分别为（0.93±0.16）h、（0.94±0.24）h，8h内体积丹参素尿药累计排泄率分别为（6.21±2.79）%、（14.01±4.02）%。结论：正常剂量下的丹参素可以由胃肠道直接吸收，并且可以经过原型从肾脏排泄。但是服用复方制剂后，丹参素的尿药累计排泄率与单用丹参煎剂对比显著降低，但两者的消除半衰期差异无统计学意义（P＞0.05）。
关键词：丹参素；尿药法；药代动力学
中图分类号: R285 文献标识码:A
丹参素是一种活血化瘀、凉血消肿中药丹参的主要有效成分之一，据研究显示，丹参素具有良好的抗氧化、抗凝血、抗血栓及调节血脂代谢的作用。同时可加快微循环，促使毛细血管网开放，抑制心肌收缩，减少心肌能量耗氧，减少胆固醇、血脂，保护肝细胞等[1]。其功效在临床治疗疾病中得以广泛应用。丹参中的成分分为水溶性和脂溶性两种，两者均具有药理活性。目前临床中给药途径主要是注射给药，且给药剂量较大，传统的口服给药途径研究相对较少。本文作者建立了尿样中丹参素的测定方法，进一步分析口服正常剂量与复方丹参中药制剂后，丹参素在人体内的变化。现报告如下:
1材料与方法
1.1研究对象
10名健康体检者，年龄23-32岁，平均年龄（23.18±2.19）岁；体重58-72kg，平均体重（63.55±6.89）kg；身高173-178cm，平均身高（173.8±4.5）cm。所有患者肝、肾、心电图检查均正常，并且近两周内无使用任何药物。
1.2方法
1.2.1试剂和仪器
丹参素钠对照品（北京药学院天然药化研究室提供），内标物乙酰氨基酚（四川恒瑞制药有限公司提供），丹参、含复方中药颗粒剂B均为市售，乙腈、甲醇为色谱纯，其余实验所用试剂均为分析纯。
Waters-600E高效液相色谱仪，Waters-2487双通道紫外检测器（美国Waters公司）；JS -3030色谱工作站（大连江申分离科学技术有限公司）；超声清洗机（无锡超声电子设备厂）；固相萃取小柱：选用DSC219 柱，500 g/3 L。
色谱条件： DSC219 柱（150mm×6.0mm ID，5μm）；预柱为C18（4mm×3.0mm ID）；检测波长：280nm；流动相B：乙腈-0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液(4∶96 ,磷酸调至pH为2.8）；流动相C :乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50 ,磷酸调至pH 为2.8) 。在0～25 min ,使用100 %的流动相B ,25 min 时,将流动相C 的比例调至75 % ,保持5 min ,以将其他组分完全洗脱。
标准工作液的配制：精密称取丹参素对照品适量,加1%醋酸溶液溶解并稀释至所需浓度。
内标溶液的配制：精密称取内标对乙酰氨基酚适量,加甲醇溶解并稀释成50 mg/L 的溶液。
1.2.2方法
1.2.2.1尿液预处理：试验者尿液分别采用乙酸乙酯8ml，甲醇8m，水8ml进行固相萃取，并且进行洗涤和活化。然后精密吸收尿样2ml置于具塞离心管，并且加入1%醋酸水溶液0.1ml，再加入2mol/L 盐酸溶液2滴，准确加入内标溶液200μL ,混匀。将该混合液采用活化的小柱采用1%的醋酸水溶液1ml淋洗，再加乙酸乙酯2mL 洗脱，最后收集洗脱液，在45 ℃水浴挥干。使用前先用流动相01ml溶解残渣，漩涡混合2min，离心10min，最后取上清液15μL分析。
1.2.2.2给药方法：将10名健康者随机分为两组，采用自身对照交叉法。给药之前两组试验者均进行排尿，排净小便后留取空白尿样，然后分别单次po 丹参复方中药颗粒剂B水溶液200 mL 或丹参水煎剂200 mL (经测定,均含丹参素20 mg) 。试验中按时采集尿样标本备测。7天之后两组试验者均进交叉给药1次。给药期间，严禁试验者抽烟、喝酒、喝茶，并且均给予相同的进食标准。
1.3计算
本文所得实验数据均采用SPSS 19.0统计学软件进行处理。
2结果
丹参素色谱理论塔板数N=8.6×103[2]，丹参素和内标的拖尾因子色谱基本一致。精密吸取不同浓度的丹参素标准也0.1ml，置于具塞离心管，再加入空白尿样2ml，配成不同浓度丹参素的尿样各3 份。依据以上的尿预处理方法处理，取15μL 注入色谱仪，丹参素尿样浓度在012～50 mg/L,线性关系良好[3]。同时吸入浓度分别为0.98、4.90、9.80g/L的丹参素标准工作液各1 mL ,置于具塞离心管中,加入空白尿液2 mL，配成不同浓度丹参素的尿样各3 份，分别进行计算器回收率为98.4%、97.5%、10.2.4%，平均萃取回收率85.4%，
3丹参素人体药代动力学
3.1 尿药排泄率
10名健康者po 含丹参药物后，分别收集给药后1-8h小便（间隔0.5h收集一次）。测量小便体积，并进行尿样预处理，测定其尿药浓度、尿中丹参素回收量、累积尿药排泄率。得到含丹参复方中药颗粒剂B和丹参水煎剂口服后8h内丹参素尿药累计排泄率分别为（6.21±2.79）%、（14.01±4.02）%。
3.2半衰期T1/2计算[4]
药代动力学参数方程：
将所有药代动力学参数进行检验，结果半衰期与消除速率常数均能配对检验，说明两组制剂在半衰期与消除速率方面无显著性差异。但尿药回收量和累积尿药排泄率两项进行检验，不能配对进行t检验，表明复方中药颗粒剂B尿药回收量和尿药排泄率显著低于丹参煎剂。
4讨论
本文选取的高效液相色谱法测定尿样中的丹参素含量，灵敏度较高。通过分析可认识到，丹参素可原型通过肾脏排出。研究选取的丹参复方中药颗粒B是由丹参、川芎等多种药物合用的，其药动力学有所改变，表明丹参素的药动力学特点会因为其他的药物合并而发生改变。尤其是其尿药回收量及累积排泄量显著低于丹参煎剂，而半衰期与消除速率并没有明显差异。
本文通过研究丹参素的药动力学，明确了一些规律和参数特点，为临床中合理用药给予支持，并在给药时间、给药间隔期、剂量等方面更加科学合理，进一步为临床的合理用药奠定基础。
参考文献
[1]韩国柱，贺军翔，李玉洁，等.中草药药代动力学[M].北京:中国医药科技出版社,2009:400～401.
[2]薛明,崔颖,汪汉卿,等.隐丹参酮及其代谢物丹参酮ⅡA在猪体内的药物动力学研究[J].药学学报,2011,34(2):81.
[3]薛明,张彬,崔颖,等.猪肝细胞微粒P450体外代谢隐丹参酮研究[J].中国兽医科技,201329(11):10.
[4]庞志功,汪宝琪,励英倩.对丹参酮ⅡA在方剂中药动学的研究[J].西安医科大学学报,2012,20(4):457.
论文作者:张东
论文发表刊物:《解放军预防医学杂志》2015年第6期供稿
论文发表时间:2016/1/19
标签：丹参论文; 动力学论文; 复方论文; 半衰期论文; 给药论文; 溶液论文; 尿样论文; 《解放军预防医学杂志》2015年第6期供稿论文;