【摘要】目的：回顾性分析我院近2年血培养分离出病原菌的分布情况及耐药性变迁状态。方法：对我院2014年1月到2015年12月血培养及药敏结果进行回顾性分析。结果：①收集送检血液标本3975份，分离出病原菌354株，血培养阳性率为8.9%。其中革兰阳性菌为201株（56.8%），革兰阴性菌为153株（43.2%）；②检出率排前五的细菌有凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。葡萄球菌对青霉素，氧苄西林几乎完全耐药，暂时未发现耐万古霉素的葡萄球菌，肠杆菌科和铜绿假单胞对碳青霉烯类药物、头孢哌酮/舒巴坦高度敏感，耐药率均＜9.68%。结论：血培养分离出的病原菌种类多样，耐药率逐年上升，应重视对血培养标本中病原菌的监控，以为临床抗菌药物的合理应用提供明确的指导。
【关键词】血培养；菌群分布；耐药性
Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture
Abstract: Objective: to analyze the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in our hospital during the past 2 years. Methods: the results of blood culture and drug sensitivity in our hospital from January 2014 to December 2015 were retrospectively analyzed. Results: (1) collected 3975 blood specimens, 354 strains of pathogenic bacteria were isolated, blood culture positive rate was 8.9%. Which gram positive bacteria 201 strains（56.8%）, gram negative bacteria was 153 strains（43.2%）; (2) the detection rate ranked the top five bacterial strains of coagulase negative staphylococci (CNS), Escherichia coli, pneumonia Klebsiella, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. Staphylococcus aureus to penicillin, almost completely resistant oxygen benzyl Xilin, temporarily not found vancomycin resistant Staphylococcus aureus, Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa was highly sensitive to carbapenems, Cefoperazone / sulbactam resistance rate < 9.68%. Conclusion: the variety of pathogenic bacteria isolated from blood culture and the drug resistance rate increased year by year. We should pay more attention to the monitoring of pathogenic bacteria in blood culture specimens, and provide clear guidance for rational use of antibiotics.
Key words: blood culture; bacterial distribution; drug resistance
正常人血液是无菌的，若有细菌在血液中生长繁殖，则会引起菌血症、败血症等疾病。随着抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤药物以及各种侵袭性操作，特别是静脉导管及各种介入手段的应用，血行性感染在医院中的发生率存在不断上升趋势[1]，因此血培养受到了临床的重视。本研究旨在回顾性分析我院近2年血培养分离出病原菌的分布情况及耐药性变迁状态，现报告如下：
1 资料与方法
1.1 标本来源
2014年1月到2015年12月我院门诊及住院部临床各科室送检的患者血液标本共3975份，排除同一患者同一感染所分离的相同菌株。
1.2 标本采集与培养
所有标本均为患者高热、寒颤时由护士无菌操作采集到血培养瓶中，送至微生物室将标本置于血培养仪中，仪器报警后将其转种于血平板。
1.3 病原菌鉴定
采用美国BD公司BACTE9120全自动血培养仪和法国生物梅里埃VITEK32全自动细菌鉴定分析仪对细菌进行培养及鉴定，仪器检测 5 d 报告阴性,转种无细菌生长者为阴性；血培养仪报告阳性,及时转种血琼脂平板,必要时另转种巧克力平板或沙保弱平板,同时涂片进行革兰染色镜检。
1.4 药敏试验
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的测定采用头孢西丁扩散法，药敏试验
采用纸片琼脂扩散(K-B)法进行,结果判定依据每年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)制定的最新标准。
1.5 菌株质控
大肠埃希菌 ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923均由原卫生部临床检验中心提供,结果判读每年均按CLSI推荐的K-B法进行。
1.6 统计学分析
采用WHONET5.5软件进行数据处理及分析。
2 结果
2.1 菌株分析
本研究收集到送检的患者血液标本共3975份，分离出病原菌354株，血培养阳性率为8.9%,其中革兰阳性菌为201株，占56.8%，革兰阴性菌为153株，占43.2%。检出率排前五的细菌有凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。（详见下表1）
表1 2014年~2015年我院血培养分离病原菌分布构成比
2.2耐药率变迁
葡萄球菌对青霉素，氧苄西林几乎完全耐药，暂时未发现耐万古霉素的葡萄球菌，草绿色链球菌除对红霉素、克林霉素、四环素有较高的耐药性（介于25%-48.75%间）外，对其他大多数抗菌药物高度敏感。肠杆菌科和铜绿假单胞对碳青霉烯类药物、头孢哌酮/舒巴坦高度敏感，耐药率均＜9.68%，但对其他抗菌药物都有较高的耐药性（详见表2、表3）。
表2 2014年~2015年我院血培养分离常见G+菌耐药情况
表3 2014年~2015年我院血培养分离常见G-菌耐药情况
3 讨论
临床上疑为血液感染的患者，必须尽快做血培养，为临床尽早明确诊断和准确治疗提供直接依据，同时也能防止抗生素滥用[2]。本研究结果显示：血标本中分离出的354株致病菌中，革兰阳性菌为201株（占56.8%），其中CNS分离比率最高，占革兰阳性菌的47.3%，此情况与国内外多数报道吻合[3]。但CNS是条件致病菌，多存在人或其他物体表面，可阻止药物分子进入细菌，增加消毒难度，再加上若医务人员未严格执行无菌操作，容易引发交叉感染。因此，临床难以确认分离出的CNS是污染菌或致病菌，研究表明，2次以上的血培养结果有利于判断CNS是否为致病菌[4]。葡萄球菌对利奈唑胺、呋西地酸、呋喃妥因高度敏感，暂未发现耐万古霉素葡萄球菌。草绿色链球菌除对红霉素、克林霉素、四环素有较高的耐药性（25%-48.75%间）外，对其他大多数抗菌药物高度敏感。
本研究分离出革兰阴性菌153株（占43.2%），肠杆菌科对碳青霉烯类药物高度敏感，可作为首选药，但近年来，耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)报道增加，这可能与本院大量使用此类抗生素有关。本院目前虽未分离出CRE,但临床医生还是要规范、合理用药，预防CRE的产生。铜绿假单胞菌除对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率＜9.68%外，对其他抗菌药物耐药率较高，应引起临床重视。
综上，血液感染发病急，病死率高，血培养分离出的病原菌种类多样，部分药物耐药率逐年上升，因此对血培养标本中病原菌的监控不能忽视。而由于细菌生长比较特殊，从血培养确认为阳性到分离培养后对细菌进行鉴定及临床医生收到药敏试验结果，至少需要3天时间。因此，一般血培养确认为阳性后立即做革兰染色并将涂片结果及时告知临床医生，医生根据初步报告的结果先经验用药，等3天后药敏结果出来可进行一定的调整，从而降低患者血液感染的死亡率，提高治愈率。
参考文献：
[1]谭宏伟,杨冰,高军.血培养标本357例中病原菌菌群分布及耐药性分析[J].中国保健营养（下旬刊）,2013,(09):5493-5494.
[2]李倩珺,林海标,吴晓宾,柯培锋.血培养中菌群分布及耐药性分析[J].国际医药卫生导报,2011,17(14):1739-1742.
[3]Beckmann SE,Dickema DJ,Doern GV.Determining the clinical significance of coagulase negative staphylococci isolated from blood cultures infect control [J].Hosp Epidemiol,2005,26（6）：559-566.
[4]Miura E.Coagulase-negative staphylococcus infection in newborns: myth or reality[J]? J Pediatr(Rio J),2002,78:255-256.
论文作者:陈秀荣1,周细军2,徐荣3
论文发表刊物:《中医杂志》2016年12月
论文发表时间:2017/6/1
标签：病原菌论文; 葡萄球菌论文; 耐药性论文; 标本论文; 霉素论文; 细菌论文; 头孢论文; 《中医杂志》2016年12月论文;