四川省部分地区2018年动物布鲁氏菌病的流行病学调查
侯 巍1，杨治聪2，郭 莉1，阳爱国1，袁东波1，莫 茜1，曾子鑫3，冯春红4，尹 杰1，雷晓琴5，周仁江2
（1.四川省动物疫病预防控制，四川 成都 610041；2.青神县动物疫病预防控制中心，四川 青神 620460；3.南充市嘉陵区动物疫控中心，四川 南充 637000；4.宣汉县动物疫病预防控制中心，四川 宣汉 636150；5.苍溪县动物疫病预防控制中心，四川 苍溪 628400）
摘 要： 布鲁氏菌病（Brucellosis，简称“布病”），是由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病。我省是动物布病历史重疫区，本课题组在2018年在对省内洪雅县、苍溪县、宣汉县、南江县、简阳市和若尔盖县6个县进行动物布病流行病学调查，掌握动物布病的流行现状。
关键词： 布鲁氏菌病；流行病学调查
四川省是全国布病II类流行区之一，经流调统计全省在21个市（州）的177个县（市）有畜间布病阳性病例报告。据监测，2015年-2018年全省牛羊布病阳性率分别为0.64%、0.46%、0.51%、0.25%，并随着近3年开展全省布病普查分区防控和持续监测净化，布病的流行趋势得到有效遏制，人间布病感染病例也呈逐年下降趋势。本调研组对四川省部分地区2018年动物布病进行流行病学调查，以掌握动物布鲁氏菌病的流行现状。
1 材料与方法
1.1 养殖场基本情况问卷调查
在四川省洪雅县、苍溪县、宣汉县、南江县、简阳市和若尔盖县6个养殖特色地区分别选取各5个牛、羊、猪养殖户（场）进行养殖场基本情况问卷调查。主要调查养殖场（户）规模程度、圈舍管理、流产数量及综合饲养管理等情况。
今年以来，市场经济发展形势比预期好，楚雄武定供电局抓住有利时机积极开展增供扩销。通过走访、加大优惠电价政策宣传，减少停电、提升客户服务、推进市场化交易、积极与政府沟通汇报等方式稳住存量。让政策支撑、管理保障、市场拓展、服务提升多项措施齐头并进，全力做好增供扩销。
1.2 “布病”日常防控调查
对以上6个养殖特色地区的猪、牛、羊各5个养殖场（户）日常防控情况进行调查，具体包括执行检疫制度、“布病”检测、检测阳性扑杀、免疫等方面。
自从易非买了房后，他们的关系就不知不觉地进了一大步，有一天陈留送易非回来，老妈正好在家，他们就这样见面了，陈留表现得大方得体，母亲似乎也很喜欢。再后来，易非过生日，陈留带了蛋糕和鲜花来，就算是正式见面了。
通过对医院建筑热电负荷特性的研究，提出了将医院空调冷热负荷作为CCHP系统设计的部分负荷，可进一步提高医院采用CCHP系统来提高整体能源利用水平和满负荷利用小时数。因此，建议通过医院日能源消耗统计台账以及典型日热电负荷数据，得到医院全年的延时曲线图，按照本文中提出的步骤和以热定电的原则，将医院空调冷热负荷作为CCHP系统设计的部分负荷，选择燃气轮机的系统容量，可有效提高医院建筑CCHP系统能源利用效率。
1.3 动物布鲁氏菌病的血清学检测
在洪雅县等6个养殖特色地区开展血清学调查，每地区分别选择5个猪、牛、羊的养殖场（户）采集血清，每场采样量不少于30份；按照国标GB /T18646-2002《动物布鲁氏菌诊断技术》方法进行检测，采用虎红平板凝集试验（RBPT）对待检血清进行初筛，试管凝集试验（SAT）进行复核。
2 结果
2.1 养殖场基本情况问卷调查
2018年8～10月，在四川省洪雅县、苍溪县、宣汉县、南江县、简阳市、若尔盖6个养殖特色地区分别选取各5个牛、羊、猪养殖场（户）进行养殖场基本情况问卷调查。
通过调查结果看出，被调查的养殖猪、牛、羊场（户），不同畜种、规模化程度的场（户）在圈舍管理方面存在差异，养猪场（户）较养牛、羊场（户）在圈舍选址、建设布局、隔离、消毒灭源等方面更加科学，制度落实更加规范。
表1 调查猪、牛、羊场（户）规模程度统计
2.1.1 规模化程度调查结果
2.1.2 圈舍管理调查结果
个体流产率为1.93%（90/4655），其中猪、牛、羊个体流产率分别为3.30%、1.73%、1.91%，见表4。
图1 6个养殖特色地区养殖规模程度（猪）
图2 6个养殖特色地区养殖规模程度（牛）
6个养殖特色地区共针对90个养殖户（场），其中牛、羊、猪养殖场（户）各30个，按照200头及以上规模、50～199头规模、1～49头规模划分为三个类别，分别为规模户、适度规模户、散养户，结果见表1。
通过对猪、牛、羊各30个养殖场（户）孕畜的流产情况进行调查，流产场数有32个，流产畜为90头，
图3 6个养殖特色地区养殖规模程度（羊）
1.2.1 实时荧光定量PCR法检测miR-29b、Tiam1 mRNA表达水平 提取总RNA:按照Trizol试剂说明书取约50 mg组织提取总RNA，RNase-Free H2O溶解RNA，微量分光光度计检测RNA浓度及纯度，然后反转录合成cDNA，-80 ℃保存备用。采用Taqman RT-PCR kit进行PCR扩增，检测miR-29b以U6为内参基因，检测Tiam1 mRNA表达水平以GAPDH为内参基因。反应体系在ABIQ6型实时荧光定量PCR仪上进行，测定每个样品的Ct值。基因的表达以相对含量=2-△△Ct的形式呈现。基因引物序列见表1。
根据《水利水电工程等级划分及洪水标准》（SL 252—2000）规定，末级渠系工程为小型工程，永久性建筑物中主要建筑物为4级，次要建筑物为5级，临时性水工建筑物为5级。
2.1.4 流产数量及原因调查
通过对猪、牛、羊各30个养殖场（户）的饲养方式、配种方式、粪污处理、饮水、病死畜处理、养殖场人员情况、引种等日常综合饲养管理情况进行了调查，并按不同畜种进行了统计，将饲养管理涉及的各项内容进行梳理，其中所有调查场（户）饲养方式均以圈养方式为主，配种方式根据养殖猪、牛、羊采用人工授精比例不同，病死畜等废弃物全部经无害化处理掩埋；圈舍主要根据养殖畜种不同，其中生猪以全封闭式为主，牛羊养殖主要采用半开放式；养殖场（户）采用喷雾及喷雾、喷洒、冲洗相结合方法；粪污处理以人工处理为主，人工处理占92.22%（83/90），7.78%（7/90）配置并使用了自动化粪污处理设备；90个场83.33%（75/90）的场户粪便经发酵处理后用作肥料使用，16.67%（15/90）的场户未经任何处理直接用作肥料使用；畜禽饮水来源主要为井水或自来水，分别为45.56%（41/90）、54.44%（49/90）；养殖场（户）93.33%（84/90）有专业技术人员，专业技术人员在2人及以上的53.33%（48/90），23.33%（21/90）具有大中专及以上相关专业的学历，有专职兽医47.78%（43/90），年龄在18-45岁之间的占61.11%（55/90），结果见表3。
2.1.3 综合饲养管理等调查
口碑营销原指企业运用各种有效的手段，引发企业的顾客对其产品、服务以及企业整体形象的谈论和交流，并激励顾客向其周边人群进行介绍和推荐的市场营销方式和过程。由于这种方式可信度强，成功率也高，因此城市文化地标凭借口碑宣传可以树立良好的感知形象，培养潜在旅游者，等到时机成熟时这些人会转化为现实的旅游者，城市文化地标也就成为游客必到的“打卡地”。
通过对猪、牛、羊各30个养殖场（户）圈舍的18项内容分别按不同畜种进行了调查，每项内容90次，累计1620次，均符合18项调查内容的占88.89%（1440/1620）。其中养猪场（户）中每项内容18次，累计540次，其中占93.33%（504/540）符合18项调查内容；养牛场（户）中每项内容18次，累计540次，其中占87.59%（473/540）符合18项调查内容；养羊场（户）中每项内容18次，累计540次，其中占85.74%（463/540）符合18项调查内容，结果见表2。
表2 被调查养殖场圈舍管理调查统计表
通过调查结果看出，6个养殖特色地区的猪、牛、羊养殖场（户）大部分以适度规模为主，其中猪、牛、羊适度规模养殖场（户）分别占13/30、13/30、17/30（见图1，2，3）。6个地区养殖业各有特色，洪雅县奶牛养殖规模程度高，猪、羊养殖均衡发展；简阳市以特色大耳羊羊养殖为主；宣汉县、南江县猪、牛、羊养殖均衡发展；苍溪县以羊养殖规模程度高，若尔盖以牛、羊养殖规模程度高。
对其流产原因进行调查，猪的流产比例较牛、羊的流产比例大，经流产物检测发现，猪的流产原因并非为布鲁氏菌引起的，牛、羊的流产物检测也未检测到布鲁氏菌，主要为非病原性或其他病原引起的流产。
2.2 “布病”日常防控调查
通过对猪、牛、羊各30个养殖场（户）日常防治情况的调查，具体为执行检疫制度、“布病”检测、检测阳性扑杀、免疫等方面，90个场户中，建立并执行检疫制度的占75.56%（68/90），开展布病检测的占81.11%（73/90）。
通过调查发现，牛、羊养殖场（户）检测的频次为每年2次及以上，适度规模场及散养户检测频次多数为每年1次，检测出阳性畜数量相对较少，但也表明，现在四川省牛、羊布病的污染点较多，污染面较宽。结果见表5。
2.3 动物布鲁氏菌病的血清学检测
四川省属于布病防治二类地区，全省除甘孜州、阿坝州流行区牛、羊实行布病免疫，其他地区采取监测净化为主防控策略。2018年开展血清学调查，采用虎红平板凝集试验（RBPT）初筛，试管凝集试验（SAT）复核，共监测猪、牛、羊养殖场（户）各30份，猪、牛、羊布病检测结果个体阳性率分别为1.98%、0.44%、0.56%，结果见表6。
3 讨论
根据本项目调查结果来看，6个养殖特色地区的猪、牛、羊养殖场（户）整体以适度规模为主，养殖各有特色。被调查的养殖猪、牛、羊场（户），不同畜种、规模化程度的场（户）在圈舍管理方面存在差异，养猪场（户）较养牛、羊场（户）在圈舍选址、建设布局、隔离、消毒灭源等方面更加科学，制度落实更加规范。对检测布病阳性场各主要影响因素进行综合评价分析，最终找出与布病发生场（检测阳性场）高度相关的主要因素。规模场为：部分畜种为引进畜，且虽进行相对隔离饲养，但隔离期未达到要求就混群饲养；进入养殖场区不洗澡及更换衣服、进入生产区不换胶靴；场内虽定期消毒，但仅采用单一喷雾消毒方式；场内专业技术人员学历低或对布病防控认识不足等。适度规模场及散养户较规模场影响因素多且复杂，这主要和适度规模场及散养户的养殖模式、养殖习惯等密切相关：进场不进行洗澡更衣、进生产区不换胶靴、场舍门口无消毒池或车辆人员进出场不消毒、场内定期只采用单一喷雾消毒方式、外部动物（禽）可随意进入养殖场区。
表3 被调查养殖场综合饲养管理等调查统计汇总
表4 流产数调查
表5 养殖场“布病”日常防控情况统计表
表6 流调点布病监测数
布鲁氏菌病的表型分为6个种19个生物型。在我国，主要流行是牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病，其中布病危害羊种＞牛种＞猪种＞犬种。本次血清学调查，检测猪、牛、羊养殖场（户）各30个，猪、牛、羊布病个体阳性率猪种＞羊种＞牛种，分别为1.98%、0.44%、0.56%。可能原因，一是我国长期致力于牛、羊布病的检疫和扑灭工作，对猪、犬布病的重视程度远不及牛、羊。二是羊饲养量不断增加，交易流动性远远高于牛；三是牛主要是人工授精，而羊是自然交配，一旦羊感染了极易通过生殖系统传播，并且饲养者对种羊的布病检疫重视程度低于牛。
通过本次调查在布鲁氏菌的防控中我们应注意：一是应结合布病流行实际情况，制定切实可行的动物布病防控长远规划和短期计划，除了重视牛、羊布病防控外，猪等布病不容忽视；二是开展布病防控知识与技能的宣传培训，严格执行消毒和防范措施；三是以规模养殖规划布局和建场选址作为起点，按照适度规模、科学发展的理念，确定合理的养殖密度；四是按照国家规定，畜间布病实行“一类地区以免疫和检疫为主，二类地区以监测和扑杀为主，日常管理以消毒和个人保护为主”的原则；五是建立引种申报审批管理制度，预防本病的重要措施是不从疫区引进畜只和畜产品。加强对养殖场（户）动物防疫条件审核，监督平时防疫制度落实情况。六是强化监测流调，二类地区每年由省级兽医部门组织开展两次集中监测，上下半年各 1 次。
参考文献
[1] 陈溥言.兽医传染病学（第5版）[M].北京：中国农业出版社，2006：135-141.
[2] 尹杰，周明忠，阳爱国，等.四川省动物布鲁氏菌病防控工作的问题与对策[J].四川畜牧兽医，2018，（6）：10-13.
[3] 阳爱国，邓永强，郭莉，等.四川省家畜布病结核病流行病学调查及防治情况[J].四川畜牧兽医，2013，40（8）：13-14.
[4] 邓永强，阳爱国，郭莉，等.四川奶牛结核病和布鲁氏菌病的净化示范[J].中国动物检疫，2014，31（8）：55-57.
[5] 白鸽，王国超，王桂花，等.渭南市 2008-2014 年牛羊布鲁氏菌病血清流行病学调查[J].黑龙江畜牧兽医，2016，（8）：114-115.
[6] 马晓菁，库尔班·居麦，舒展，等.2012-2014 年新疆动物布鲁氏菌病流行病学调查与分析[J].畜牧与兽医，2016，48（5）：111-114.
项目基金： 四川省科技厅项目《动物布鲁氏菌病防控关键技术研究与应用》（编号2018JY0039）
标签：布鲁氏菌病论文; 流行病学调查论文; 四川省动物疫病预防控制论文; 青神县动物疫病预防控制中心论文; 南充市嘉陵区动物疫控中心论文; 宣汉县动物疫病预防控制中心论文; 苍溪县动物疫病预防控制中心论文;