沈新娥[1]2002年在《复方虫草精华改善血液循环功能和增强免疫功能的实验研究》文中提出本文采用小鼠密闭性缺氧存活时间、大鼠窒息性缺氧脑存活时间为指标，观察复方虫草精华(Lungfit，以虫草精华和黄芪为主药的复方制剂)的抗缺氧作用。通过对大鼠外周血液中红细胞数、白细胞数、血红蛋白含量等的测定，以了解Lungfit对外周血象的影响。采用MTT法，测定脾淋巴细胞增殖反应和检测NK细胞活性，以观察Lungfit对免疫功能的影响。同时采用Langendorff离体心脏灌流模型，观察Lungfit对心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。 用不同剂量Lungfit灌胃，连续10天。实验结果显示：1、Lungfit能剂量依赖性地延长缺氧小鼠的存活时间、延长缺氧大鼠脑存活时间。2、能提高血液中红细胞数、血红蛋白含量。3、能促进PHA诱导的脾淋巴细胞增殖反应，增强NK细胞活性，并拮抗环磷酰胺引起的免疫抑制作用。4、可明显改善心脏缺血／再灌注期间心率、冠脉流量及心肌舒缩功能。 实验结果证明：复方虫草精华能提高机体耐缺氧能力，改善外周血象，增强免疫功能，并对离体心脏缺血／再灌注损伤具有明显的保护作用。
邹容, 王国卿, 周希平, 李金华, 沈新娥[2]2005年在《复方虫草精华(Lungfit)对大鼠血液循环功能的影响》文中指出目的观察复方虫草精华(Lungfit)对大鼠血液循环功能的影响。方法Lungfit(80、160、325mg/kg/d),连续灌胃给药10d后,分别测定外周血中红细胞数和血红蛋白含量等;Luugfit(160、325mg/kg/d),连续灌胃给药10d后,取心脏,用Langendorff装置逆行恒压灌流,分别测定缺血前后各组心脏的心功能参数值。结果Lungfit灌胃能不同程度地增加大鼠血液中红细胞数、血红蛋白含量等(P<0.05或P<0.01),但低剂量组与对照组相比,差异不显着(P>0.05);缺血前,Lungfit灌胃大鼠离体心脏的各项心功能参数值与对照组相比无显着差异(P>0.05);缺血30min后的再灌注期间,Lungfit灌胃大鼠心脏的心肌舒缩功能改善明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论Lungfit能改善外周血象并对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用。
颜秉玲[3]2008年在《复方中药对运动人体血细胞及EPO、T的影响》文中认为1.研究目的通过观察复方壮阳中药对运动训练青少年血细胞各参数及血清EPO、T含量变化的影响,探讨其在提高机体运动能力、抵抗运动性疲劳方面的作用及可能机制,从而为中草药在竞技体育中的研发和应用奠定一定的理论基础。2.研究方法将22名男女受试者根据训练项目、性别等因素分为对照组、服药组,进行为期2个月的正常训练。服药组分别于每日早餐后、下午训练结束后服用中药各1袋,对照组则服用等量的安慰剂。两组受试者分别在2个月的运动训练前后,于安静状态下和定量负荷后各抽取5ml静脉血,其中取20μl注入到稀释液中用于测定血常规各项指标;其余血样制备成血清测EPO和T含量。所有数据采用SPSS12.0统计软件统计分析,进行T检验,显着性标准采用P＜0.05。3.实验结果3.1测定安静状态下血细胞各项参数,发现两组运动员红细胞含量、血红蛋白水平、红细胞压积、及白细胞和血小板数量基本呈上升趋势,且服药组运动员的升高呈显着性差异(P＜0.05、0.01),对照组的变化无统计学意义。3.2在安静状态下,服药组运动员血清EPO含量与训练前相比有显着性升高,其升高幅度明显高于对照组(P＜0.05);定量负荷后两组运动员的EPO都没有显着性变化(P＞0.05)。3.3在安静状态下,对照组的血清T含量与训练前相比没有大的变化,甚至女运动员稍有下降趋势,服药组运动员增加的非常显着(P＜0.05);定量负荷后,各组运动员的血清T水平大幅度上升,与所对应的安静状态比都呈显着性升高(P＜0.05、0.01)。4.结论4.1复方壮阳中药可以促进青少年血细胞和血红蛋白的生成,避免运动训练过程中贫血现象的发生;同时还可升高机体内的白细胞数目,进而增强机体的免疫功能。4.2复方壮阳中药可以更好的促进机体对EPO的分泌,增加运动训练青少年体内EPO的含量,从而增强红细胞的生成,提高机体有氧运动能力。4.3复方壮阳中药能够升高运动训练期间血睾酮水平,缓解运动引起的低血睾酮现象,进而增加促红细胞生成素的含量,共同影响血细胞各指标参数的变化。
贾建伟[4]2013年在《参桃软肝胶囊抗肝癌作用及其机理初探》文中进行了进一步梳理目的本试验目的在于从体内试验、体外实验实验入手,研究参桃软肝胶囊治疗肝癌的机理。方法1.体外实验：制备低、中、高剂量含药血清,取处于对数增长期的肿瘤细胞,实验分为6组,即正常对照组,正常血清组,低剂量含药血清组,中剂量含药血清组,高剂量含药血清组和阳性对照组。采用MTT法检测含药血清对于HepG2人肝癌细胞增殖情况的影响；采用流式细胞术检测含药血清对HepG2人肝癌细胞的早期凋亡情况的影响；采用RT-PCR检测含药血清对HepG2人肝癌细胞内bax和bcl-2mRNA水平的影响；采用wb检测含药血清对细胞内bax、bcl-2和活化的caspase-3蛋白水平的影响。2.体内试验：建立H22荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为五组,分别为阴性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性对照组,每组8只。阴性对照组(生理盐水),低剂量组(参桃软肝胶囊混悬液0.35g/kg),中剂量组(参桃软肝胶囊混悬液0.7g/kg),高剂量组(参桃软肝胶囊混悬液1.4g/kg),阳性对照组(顺铂注射液2.0mg/kg),每天2次,共3周,停药后24小时取材。观察药物对荷瘤小鼠的抑瘤作用以及促进肿瘤组织内肿瘤细胞凋亡作用；检测荷瘤小鼠血浆及肿瘤组织内TNF-α、IL-1β、IL-6的含量、检测荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性、检测荷瘤小鼠外周血及脾脏淋巴细胞CD4+和CD8+细胞比例,以药物对荷瘤小鼠的免疫功能影响；针对肿瘤组织,采用免疫组化法检测CD34和VEGF水平、采用RT-PCR法检测bcl-2和bax mRNA水平、采用免疫组化检测活化的caspase-3水平、采用western blot方法检测bcl-2,bax和活化的caspase-3的蛋白水平,以探讨参桃软肝胶囊的抗肝癌机制。结果1.体外实验1.1参桃软肝胶囊含药血清作用于HepG,人肝癌细胞后,与用药前相比,形态发生改变,细胞数量减少。1.2含药血清对HepG2人肝癌细胞增殖的影响,正常大鼠的血清对人肝癌细胞HepG2的增殖没有明显的影响(P>0.05),低、中和高剂量含药血清和顺铂都能够明显抑制肝癌细胞的增殖(P<0.05)。其中,低、中和高剂量含药血清处理组随着血清中中药有效成分浓度的增加,抑制细胞增殖的能力逐渐加强,呈现一定的剂量依赖关系。1.3流式细胞术结果显示,普通培养的人肝癌细胞HepG2自然凋亡率比较低,约为5%-10%左右,正常的大鼠血清对HepG2细胞的凋亡没有明显的影响,低、中和高剂量含药血清和顺铂都能够明显诱导HepG2细胞的凋亡。1.4RT-PCR结果显示,正常大鼠的血清对人肝癌细胞HepG2胞内Bax和Bcl-2mRNA水平没有明显的影响(P>0.05),低中高剂量的含药血清和阳性化疗药物都能够明显诱导Bax基因的转录(P<0.01),抑制Bcl-2基因的转录(P<0.01),明显上调Bax/Bcl-2基因的比值。其中低中高剂量含药血清组Bax mRNA水平的上调,Bcl-2mRNA水平的下调,同药物浓度呈现一定的剂量依赖关系。1.5western blot结果显示,正常大鼠的血清对人肝癌细胞HepG2胞内Bax、Bcl-2和活化的caspase-3蛋白水平没有明显的影响(P>0.05),低、中、高剂量的含药血清和阳性化疗药物都能够明显诱导Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,明显上调Bax/Bcl-2蛋白的比值,活化caspase-3。其中,低、中、高剂量组中,随着药物浓度的增加,这种作用不断增强。2.体内实验2.1模型组肿瘤最大,重量最重；阳性对照组肿瘤最小,肿瘤最轻；低剂量给药组、中剂量给药组和高剂量给药组介于它们之间,随着药物浓度的增加,抑瘤效果不断增强,同模型组相比,各组瘤重明显的降低,具有显着差异(P<0.01)。2.2模型组小鼠肿瘤组织本身就存在一定的自然凋亡率,在2%-5%左右,低、中、高剂量给药处理和腹腔注射阳性化疗药物,都能够明显的在体内诱导肿瘤细胞的凋亡,细胞的凋亡率明显增加,其中以阳性对照组最为明显(50%-70%),其次为中药高剂量组(40%-60%),接着是中药中剂量组(30%-50%),最次是中药低剂量组(20%-30%)。2.3荷瘤小鼠血浆中细胞因子的含量明显的低于正常对照组(P<0.01),给予中药处理,随着药物浓度的增加,能够明显的增加血浆内细胞因子的含量,同模型组比,具有明显的差异(P<0.01)；阳性化疗药物处理的小鼠,血浆内这些细胞因子的含量并没有得到改善(P>0.05)。小鼠肿瘤组织内这些细胞因子的含量也有类似于血浆的趋势,中药组均能明显提高局部肿瘤组织内细胞因子的含量,从而改善机体的免疫状态,而阳性化疗药物则没有此作用。2.4同正常小鼠比,荷瘤小鼠外周血和脾脏T淋巴细胞中CD4+细胞比例明显降低,CD8+细胞比例明显升高,CD4+/CD8+的比值明显降低。中药低、中、高剂量组均能明显改善小鼠的细胞免疫功能(P<0.01),而阳性化疗药物则没有改善作用(P>0.05)。2.5同正常小鼠相比,荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性明显减弱,中药低、中、高剂量组能够明显增强荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞的杀伤活性(P<0.01),而且杀伤活性均高于正常非荷瘤小鼠。阳性化疗药物对荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞的杀伤活性没有改善作用(P>0.05)。2.6同模型组,阳性对照组、中药低、中、高剂量组MVD计数明显减少,具有明显的统计学意义(P<0.01)；各组之间VEGF表达水平无明显差异。2.7中药低、中、高剂量组的中药和阳性化疗药物都能够明显诱导Bax基因的转录(P<0.01),抑制Bcl-2基因的转录(P<0.01),明显上调Bax/Bcl-2基因的比值。其中低中高剂量组Bax mRNA水平的上调,Bcl-2mRNA水平的下调,同药物浓度呈现一定的剂量依赖关系。2.8模型组中,活化的caspase-3日性细胞比例最低,阳性对照组最高,低中高剂量中药处理组介于2者之间,呈现一定的剂量依赖关系。2.9低中高剂量的中药和阳性化疗药物都能够明显诱导Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,明显上调Bax/Bcl-2蛋白的比值,其中低中高剂量组中,随着药物浓度的增加,这种作用不断增强。小鼠肿瘤组织内活化的caspase-3蛋白水平表达趋势也与上面免疫组化的结果类似,与模型组相比,低中高剂量组和阳性组小鼠肿瘤组织内活化的caspase-3蛋白水平明显增加,其中低中高剂量组中,活化的casapse-3蛋白水平的增加同剂量呈现一定的依赖关系。结论1.参桃软肝胶囊含药血清可能抑制HepG2人肝癌细胞生长,并诱导其凋亡。2.参桃软肝胶囊可能抑制H22肝癌小鼠肿瘤细胞生长,并诱导凋亡的作用。3.参桃软肝胶囊可能具有改善机体的免疫功能状态的作用。4.参桃软肝胶囊可能具有抑制肿瘤血管生成的作用。5.参桃软肝胶囊可能通过调节Bax/Bcl-2比值,活化casapse-3蛋白来实现抗肿瘤的作用。
朱朝阳[5]2012年在《松毛虫为基质的冬虫夏草真菌深层发酵及功效成分分析》文中指出冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis, syn. Cordyceps sinensis)是线虫草科真菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合物,具有重要的药理作用。松毛虫是我国重大森林害虫之一,然而松毛虫虫体中营养物质丰富,包括高含量的优质蛋白质、功能油脂、糖类物质和维生素等营养成分,是一类潜在的可食用资源。另外,松毛虫和冬虫夏草真菌的蝙蝠蛾科寄主都属于鳞翅目昆虫且主要营养成分相似,表明冬虫夏草真菌具有发酵转化利用松毛虫营养成分的潜力。本文在实验室前期研究的基础上,对以松毛虫为基质的冬虫夏草真菌深层发酵技术进行了以下研究：1、研究了鳞翅目昆虫松毛虫幼虫作为冬虫夏草真菌主要氮源基质的深层发酵技术,并对所得虫草菌体进行了安全毒理学评价。结果表明,最适宜冬虫夏草菌株生长的可利用松毛虫基质为松毛虫幼虫冻干粉,补充碳源为玉米粉,补充氮源为(NH4)2SO4,无机盐为KH2PO4。进一步采用均匀设计优化了虫草的培养基组成。结果表明,虫草液体发酵的最佳培养基组成为：松毛虫冻干粉13.0g/L、玉米粉38.0g/L、(NH4)2SO43.0g/L、葡萄糖3.0g/L、KH2PO41.4g/L、蛋白胨1.0g/L、MgSO4·7H2O0.75g/L。在此培养基条件下,虫草生物量可达8.678g/L。小鼠经口急性试验法和家兔皮肤刺激试验法均表明,实验所得虫草菌体毒性很低,属于实际无毒级。2、探索了起始pH值、接种量(%)、培养温度(℃)和摇床转速(r/min)等因素对冬虫夏草发酵产虫草糖的影响。采用正交实验设计法对冬虫夏液体发酵条件进行了优化。最优发酵条件为：起始pH为7.0,接种量为9%,培养温度为24℃,摇床转速为170r/min,在此条件下胞外多糖的产量可达0.294g/L3、用微波辅助提取松毛虫为基质的发酵虫草菌丝体多糖,首先通过单因素实验选取影响因素与水平,然后在单因素实验的基础上采用叁因素叁水平的响应面分析,依据回归分析确定最佳提取工艺条件为：液料比(mL/g)6.3：1、微波功率520W、微波时间325S,采用此工艺提取叁次,提取率达到6.901%。4、采用水浴提取法从松毛虫为基质发酵虫草菌丝体中提取分离甘露醇。研究了液料比(mL/g)、提取温度(℃)、提取时间(min)对甘露醇提取率的影响规律。通过响应面法优化得出甘露醇提取工艺的最佳参数为：液料比(mL/g)为54.2：1,提取温度为40.3℃,提取时间为40.5min。在此最佳参数组合下提取叁次,甘露醇提取率可达6.771%。5、应用响应面法优化以松毛虫为基质的发酵虫草菌丝体中腺苷提取工艺。在单因素试验的基础上,采用3因素3水平的Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,考察提取时间(S)、提取温度(℃)、液料比(mL/g)对腺苷得率的影响,并优化腺苷提取条件。最终获得以松毛虫为基质的发酵虫草菌丝体中腺苷提取工艺条件为：提取时间175S,提取温度40.2℃,液料比37.6：1,理论提取率1.375‰,实验叁次实际平均提取率为1.36‰,相对误差0.109‰。6、对比分析了野生冬虫夏草、松毛虫为基质的人工虫草菌体中粗纤维、粗脂肪、总糖、多糖、蛋白质、D-甘露醇、腺苷含量。结果表明,野生虫草中粗纤维、总糖、D-甘露醇含量高于松毛虫为基质的虫草菌丝体干粉中含量。但粗脂肪、多糖、蛋白质、腺苷含量则相反。本论文获得了松毛虫为基质的冬虫夏草真菌的深层发酵技术和产物提取的预测模型,为今后虫草菌体和多糖的进一步发酵放大和产业化生产奠定了基础。
茅飞波[6]2007年在《中医老年保健古代文献资料整理研究》文中指出随着人类进入老年化社会，老年人的生活及健康问题已经成为社会问题，对此，早在1982年WHO就把“老年人健康”作为该年世界卫生日的主题。如何提高老年人的健康水平和生存质量?“中医学基于整体医学的特点，若能充分利用其防治疾病及其养生保健的理论和方法，则能够较好地适应老年人生活和生存质量的要求。”因此，弘扬我国传统医学，发展中医老年保健学是历史赋予我们的重任。古代文献中记载的许多老年保健方法，是否已被现代人所熟知，是否仍适合于当今人类的健康需求，能否利用这些理论资源，解决当今人类的健康问题，如老年人长寿而不健康的等问题。由于历代相关着作及内容浩如烟海，繁杂而散乱，目前对古代文献中有关老年保健的方法等还缺乏系统的整理研究，对历代医家关于衰老的机理、原因、表现、预防等缺乏全面的认识，给现代老年保健与养生的研读与借鉴带来不便。本课题以中医养生与老年保健作为切入点，对古代文献中关于老年保健资料进行较为系统的查阅、总结、分析等，旨在传承祖国文化，为现代老年保健防病、抗衰延年提供实用资料，并为丰富中医老年保健学的内容，形成新的学科体系进行有益的探索。本课题的研究方法是根据中医老年保健学的发展历史，上溯先秦，下至明清，在认真研读古医籍文献资料的基础上，对各个时期的主要代表性着作及养生家，特别是在老年保健学方面有所发明、有所创见的特色理论和方法，进行分类归纳整理，从纷纭繁杂的文献资料中理出老年保健学的发展轮廓，对有关老年保健的理论和方法进行系统整理。中国医药学是一个伟大的宝库，中医老年保健学是其中重要的组成部分，是一份独具特色的珍贵文化遗产，是古人长期生活实践经验的积累，是历代医家智慧的结晶。中医老年保健又称寿亲养老，侧重对衰老及其长寿的研究。有关研究源远流长，早在先秦战国时期成书的《黄帝内经》，为中医老年保健学的发展奠定了理论基础；至汉唐时期，出现了不少养生家，以及有关养生、老年病的专论、专着，丰富和发展了中医老年保健学；至两宋金元时期，是中医老年保健学的形成时期，其标志是出现了《养老奉亲书》等老年医学专着；至明清时期，先后涌现了很多着名的养生家和养生理论，如张景岳提出“中兴论”、“治形论”，赵献可提出老年当保养“命名之火”的论点，进一步丰富和完善了老年保健学内容，可以说明清是老年保健学的完善时期。纵观中医老年保健学的发展史，从理论体系的探索到形成，保健经验及其方法的不断丰富，逐渐形成了较为完整的学科体系，尤其是近二十年来，中医现代化如虎添翼，发生了历史性转化。表现在相关论着如雨后春笋，有关研究揭示了衰老的机理，为寻找延缓衰老的对策带来了曙光。如衰老因于自由基的损害，而大量研究认为人参、灵芝、杞子、首乌等中药，还有金匮肾气丸、清宫寿桃丸、还精煎等传统方剂，具有较好的清除自由基和降低体内LPO水平的作用，这种降低自由基反应，对于延缓衰老和防治老年病具有重要意义。因此，如果说20世纪是人类追求延长生命的时期，那么2l世纪将是人类提高生存质量的时期，历史赋予我们更大责任，在已有的理论和实践经验基础上传承，进一步开拓与创新，研究与提高，为人类的健康事业，特别是老年入的保健事业作出更大贡献。
高峰[7]2005年在《木苏丸对实验性肝纤维化的防治、作用机制研究及临床观察》文中提出[研究背景与目的] 肝纤维化是指肝脏炎症或直接毒性损伤后所引起的以肝内过多细胞外基质沉积为特征的一类慢性肝病。研究表明,肝纤维化是可以逆转的病变,但临床上至今缺乏确切有效的抗纤维化药物与方法。近年来研究发现我国的许多中草药具有良好的抗肝纤维化疗效。 本实验用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型,从血清学、组织学、分子生物学等水平系统观察中药复方制剂木苏丸对大鼠肝纤维化的防治作用及其可能的发生机制,并在临床上观察木苏丸对肝硬化患者的治疗作用,为抗肝纤维化治疗研究和临床慢性肝病的防治提供新的选择。 [实验方法] 一、木苏丸对实验性肝纤维化的治疗研究 雄性SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,木苏丸组(小、中、大剂量),鳖甲软肝片组。造模方法:每周连续3天,每天腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)溶液1ml/kg体重,共3周。预防实验造模同时每天药物灌胃;治疗实验于造模结束后每天药物灌胃,共4周。观察各组大鼠血清肝功能指标及纤维化指标,肝组织切片HE、VG染色观察大鼠肝脏病理改变,并对肝纤维化程度进行分级,电镜观察肝脏超微结构改变,图像分析仪半定量分析胶原纤维面积,观察肝组织α-平滑肌肌动蛋白表达。 二、木苏丸对实验性肝纤维化影响的作用机制研究 测定血清超氧化物歧化酶、丙二醛变化,免疫组织化学法测定基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达(TIMP-1);RT-PCR法验证MMP-2,TIMP-1mRNA的基因表达,图象分析系统进
王冬燕[8]2009年在《建国以来中西医结合治疗肾脏病研究》文中进行了进一步梳理现代医学的肾脏疾病属于中医的“水肿”、“淋证”、“腰痛”、“癃闭”、“关格”等病范畴,中医古代对于这些疾病的治疗积累了丰富的经验,建国以来的西医学迅速发展,对于肾脏病的发病机理和治疗手段不断提高,但是由于肾脏疾病发病机理复杂,单纯中医中药疗效欠佳,而西药又有极大的副作用,因此,多采用中西医结合的治疗方法,经过几十年的临床实践,证明中西医结合的确是治疗肾脏疾病的有效方式。本文通过文献研究的方法,对中西医结合治疗肾脏病的发展历程进行了系统回顾,对各阶段中西医结合对肾脏疾病病因病机及辨证论治的研究进行系统总结,为今后的研究提供文献学基础。正文共分为7个部分,首先对近代的中西医汇通和现代的中西医结合进行了简要回顾;第二部分对中医脏腑学说的肾与西医解剖生理的肾脏的兼容与差异进行了考辨;第叁部分对中西医结合治疗肾脏病的发展历程进行系统回顾;第四、五、六部分,分别研究了有效单味中药在肾脏病治疗中的应用,常见肾脏病诊疗思路的变迁,中草药肾损害的问题;第七部分对中西医结合治疗肾脏病的历史经验进行客观的评价,为今后治疗肾脏病临床疗效的提高提供借鉴。
黄文俊[9]2012年在《去脂软肝方对高脂诱导大鼠脂肪肝血管性血友病因子作用的实验研究》文中研究指明目的：探讨实验性大鼠早期脂肪肝模型与血管性血友病因子（vWF）的关系，从肝窦内皮细胞（HSEC）损伤角度探讨早期脂肪肝发病机制；探讨去脂软肝方对大鼠早期脂肪肝肝内脂质代谢作用机制并阐明去脂软肝方在早期脂肪肝治疗中的作用机制。方法：1．大鼠脂肪肝模型制备：84只SD雄性大鼠，体重100±10g,通过SPSS软件包编程产生叁组随机数字，将实验鼠随机分为3组，正常组24只，模型组30只，去脂软肝方组30只，除正常组给予普通饲料外，其余各组予高脂饲料（88%普通饲料+10％猪油+2％胆固醇），参照钟岚等在高脂血症性脂肪性肝炎模型的建立中采用的高脂饲料配比方法，实验各组自由饮自来水，喂养12周，分别于4、8、12周末时剖杀一批取材。2．干预治疗：自造模之日起，正常组和模型组大鼠予生理盐水灌胃（1ml/200g体重，每日），去脂软肝方组用药按临床等效量换算，予去脂软肝方（叁七、山楂、菊花、白术、青皮、莪术等七味中药）药液灌胃（1ml/200g体重，每日）。3．指标检测：造模4周、8周、12周后，分别取大鼠血样及肝组织标本，测定大鼠体重、肝脏湿重；计算（肝重/体重）比值指数。病理组织切片用苏木精-伊红（HE）染色，观察肝脏脂肪变性情况。测定大鼠血清肝功能【丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）】、血脂【总胆固醇（TC）、甘油叁酯（TG）】、肝脂【总胆固醇（TC）、甘油叁酯（TG）】、血浆血小板聚集率及血管性血友病因子（vWF）。结果：1、大鼠体重与肝湿重：第4周末，与正常组比较，模型组大鼠体重、肝湿重增加，差异无统计学意义（P>0.05），与模型组比较，去脂软肝方组大鼠体重、肝湿重降低，差异无统计学意义（P>0.05）；第8周与正常组比较，模型组大鼠体重、肝湿重明显增加，差异无统计学意义（P>0.05），与模型组比较，去脂软肝方组大鼠体重、肝湿重降低，差异无统计学意义（P>0.05）；第12周末，与正常组比较，模型组大鼠体重增加（444.23±11.92vs.405.41±47.36，P<0.0001）,与模型组比较，去脂软肝方组大鼠体重降低（390.33±25.28vs.444.23±11.92，P=0.02）；第12周末，与正常组比较，模型组大鼠肝湿重增加（13.17±1.33vs.2.83±1.95，P=0.05），与模型组比较，去脂软肝方组大鼠体重降低（11.93±1.37vs.13.17±1.33，P<0.0001）。2、大鼠肝功能：第4周末、第8周末与正常组比较，模型组大鼠肝功能改变不明显，差异无统计学意义（P>0.05）；第12周末大鼠血清ALT，模型组比正常组增高（58.00±3.70vs.31.89±1.54, P<0.0001），去脂软肝方组比模型组降低（44.38±0.81vs.58.00±3.70, P<0.0001），AST第12周末模型组比正常组增高（218.50±45.82vs.177.47±21.16,P=0.007），去脂软肝方组比模型组降低（222.40±8.64vs.239.66±36.03,P=0.025）。3、大鼠血脂、肝脂：血清TC，第4周末模型组比正常组增加（3.38±0.36vs.2.80±0.37, P=0.044），去脂软肝方组与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；第8周末去脂肪肝方组比模型组降低（2.61±0.17vs.3.22±0.25,P=0.03）；第12周末模型组比正常组增加（3.56±0.58vs.2.93±0.44，P=0.026），去脂软肝方组比模型组降低（2.89±0.40vs.3.56±0.58，P=0.015）。血清TG，第4周末模型组比正常组增加（3.01±1.76vs.1.91±0.78，P=0.05）；第12周末模型组比正常组增加（4.83±1.35vs.3.16±0.63,P=0.007），去脂软肝方组比模型组降低（3.22±0.79vs.4.83±1.35，P=0.015）。肝脏TC，第8周模型组比正常组增加（6.60±0.53vs.5.35±0.38，P=0.006），去脂软肝方组比模型组降低（5.86±0.28vs.6.60±0.53，P=0.025）；第12周模型组比正常组增加（6.32±0.84vs.5.13±0.73，P=0.015），去脂软肝方组较模型组降低（5.33±0.86vs.6.32±0.84，P=0.017）。肝脏TG，第8周末模型组较正常组增加（3.88±0.82vs.2.68±0.25，P=0.05）；12周末模型组较正常组增加（4.07±0.97vs.2.64±0.71，P=0.04），去脂软肝方组较模型组降低（2.99±0.30vs.4.07±0.97，P=0.007）。4、大鼠血清vWF及血小板聚集率：肝脏匀浆vWF第4周末，模型组比正常组增加，去脂软肝方组比模型组降低，但差异均无统计学意义；第8周末模型组比正常组增加，去脂软肝方组比模型组降低，但差异均无统计学意义；第12周末，模型组比正常组增加（78.14±19.04vs.76.09±5.70，P=0.0001），去脂软肝方组比模型组降低（48.08±6.46vs.78.14±19.04，P=0.0001）。大鼠血小板聚集率8周末模型组较正常组增加（69.42±7.76vs.48.08±6.23，P=0.05），去脂软肝方组较模型组降低（48.47±6.22vs.69.42±7.76，P<0.0001）；12周末模型组较正常组增加（91.88±6.59vs.77.16±0.87，P=0.01），去脂软肝方组较模型组降低（51.71±5.92vs.91.88±6.59，P<0.0001）。5、光镜下，各阶段HE染色显示正常组大鼠肝组织结构清晰、完整，肝小叶形态结构正常，肝细胞大小均匀，胞圆形，呈条索状排列，可见中央静脉。8周末模型组可见超过1/3的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡，有的空泡融合将细胞核挤向胞膜下。12周末模型组大鼠肝细胞明显肿大，呈黄色，切面油腻，中央静脉周围脂肪病变明显，体积较正常明显增加，可见超过2/3的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡，有的空泡融合将细胞核挤向胞膜下，可见肝细胞肿大，胞浆疏松呈网状、半透明（胞浆疏松化），严重者胞浆几乎完全透明（气球样变）。8周末去脂软肝方组可见一定量的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡，可见中央静脉。12周末去脂软肝方组可见一定量的肝细胞胞浆中出现大小不一的圆形脂滴空泡。结论：1、病理观察发现第8周开始模型组大鼠肝细胞肿大，结构模糊，肝细胞索紊乱，肝细胞内见大量的脂滴空泡，证明高脂饲料喂养大鼠第12周即可成功造成脂肪肝模型大鼠。2、早期脂肪肝大鼠肝脏组织中vWF增多，由于vWF增多是HSEC损伤标志之一，因此表明早期脂肪肝可能存在HSEC损伤。3、去脂软肝方可显着改善高脂饲料喂养致脂肪肝模型大鼠的肝功能异常、血脂、肝脂升高及肝脂肪变性等病理改变；具有抑制高脂饲料喂养致脂肪肝模型大鼠HSEC损伤及血小板聚集的作用。4、去脂软肝方在高脂血症性脂肪肝病情发展中显示出良好的干预作用，推测对HSEC损伤的抑制作用是该方防治脂肪肝的重要机制之一。
唐跃[10]2009年在《运用益肾清利活血法治疗慢性肾小球肾炎的临床研究》文中研究指明目的:本研究主要目的是为总结、继承名中医孙伟教授辨治慢性肾小球肾炎的经验与学术思想。从临床治疗的实践中,探求传统中医对慢性肾小球肾炎的病因病机的认识以及辨证论治的规律。方法:对39例确诊为慢性肾小球肾炎疾病的患者采用内服中药治疗,每日一剂,疗程为3个月。观察治疗前后中医临床症状的改变,以及实验室指标的变化,包括血胆固醇(TG)、叁酸甘油脂(TC)、低密度胆固醇(LDL)、血尿酸(Ua)、肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)及尿蛋白等指标。结果:研究结果表明,在孙伟教授益肾清利活血大法指导下治疗慢性肾小球肾炎,能有效改善患者的临床症状,降低尿蛋白,保护肾功能,治疗后完全缓解率为25.64%,基本缓解率为43.60%,好转率为12.82%,总有效率为82.06%。结论:提示孙伟教授益肾清利活血法对治疗慢性肾小球肾炎疗效显着。
参考文献：
[1]. 复方虫草精华改善血液循环功能和增强免疫功能的实验研究[D]. 沈新娥. 苏州大学. 2002
[2]. 复方虫草精华(Lungfit)对大鼠血液循环功能的影响[J]. 邹容, 王国卿, 周希平, 李金华, 沈新娥. 中国血液流变学杂志. 2005
[3]. 复方中药对运动人体血细胞及EPO、T的影响[D]. 颜秉玲. 曲阜师范大学. 2008
[4]. 参桃软肝胶囊抗肝癌作用及其机理初探[D]. 贾建伟. 广州中医药大学. 2013
[5]. 松毛虫为基质的冬虫夏草真菌深层发酵及功效成分分析[D]. 朱朝阳. 中南林业科技大学. 2012
[6]. 中医老年保健古代文献资料整理研究[D]. 茅飞波. 广州中医药大学. 2007
[7]. 木苏丸对实验性肝纤维化的防治、作用机制研究及临床观察[D]. 高峰. 中国人民解放军军医进修学院. 2005
[8]. 建国以来中西医结合治疗肾脏病研究[D]. 王冬燕. 山东中医药大学. 2009
[9]. 去脂软肝方对高脂诱导大鼠脂肪肝血管性血友病因子作用的实验研究[D]. 黄文俊. 云南中医学院. 2012
[10]. 运用益肾清利活血法治疗慢性肾小球肾炎的临床研究[D]. 唐跃. 南京中医药大学. 2009