姚红玉 沈蓉 陈陶阳 樊健
[摘 要]目的 探讨血清Pre S1-Ag、HBV DNA以及HBVM在慢性肝病中的临床价值。方法 对338例慢性乙型肝炎、80例肝硬化和61例肝癌患者，检测其Pre S1-Ag、HBV DNA和HBVM的阳性状态及其差异，采用KaPPa一致性检验HBV Pre S1-Ag与HBV DNA的阳性一致性。结果 肝癌患者与Pre S1-Ag（39.34%）和HBV DNA（34.43%）的阳性水平显著低于肝硬化（48.75%，46.25%），更低于慢性乙型肝炎患者（63.02%，74.26%）。三组慢性肝病患者均以三种HBV模式为主，其中，HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性模式较多发生肝硬化和肝癌。Pre S1-Ag与HBV DNA的阳性水平有良好的一致性。结论 慢性肝病与Pre S1-Ag、HBV DNA和HBVM具有相关性，HBVM不同模式存在状态与疾病转归有明显关系，Pre S1-Ag对判断HBV在感染与复制中具有重要临床意义。
[关键词]慢性肝病 Pre S1-Ag HBV DNA HBVM 相关性
An Analysis of the Correlation between Chronic Liver Disease and Serum Pre S1-Ag, HBV DNA and HBVM
Yao Hongyu, Shen Rong, Chen Taoyang, Fan Jian
Abstract: Objective To investigate the clinical value of serum Pre S1-Ag, HBV DNA and HBVM in chronic liver diseases. Methods Positive status of Pre S1-Ag, HBV DNA and HBVM of 338 cases of chronic hepatitis B, 80 patients with liver cirrhosis and 61 patients with liver cancer were tested to know their differences. The positive consistency of HBV Pre S1-Ag and HBV DNA were tested by KaPPa consistency test . Results The positive level of hepatocellular carcinoma patients’ Pre S1-Ag (39.34%) and HBV DNA (34.43%) was lower than patient with cirrhosis (48.75%, 46.25%), and even lower than patients with chronic hepatitis B (63.02%, 74.26%). Three groups of patients with chronic liver disease all mainly contains the three kinds of HBV mode, of which the HBsAg, anti HBe, anti HBc positive pattern were often found in liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The positive level of Pre S1-Ag and HBV DNA have good consistency. Conclusion Chronic liver diseases is associated with Pre S1-Ag, HBV DNA and HBVM. Different mode of HBVM and its existing state have obvious relationship with the prognosis of the disease. Pre S1-Ag diagnosis has important clinical significance in the infection and replication of HVB.
Key words: chronic liver disease; Pre S1-Ag; HBV DNA; HBVM; correlation
研究表明，HBV感染后有表现于隐性感染、急性肝炎、慢性肝炎，甚至暴发性肝炎、肝硬化和肝癌【1】，而实验室检查主要依据Pre S1、HBV DNA、HBVM及肝功能等项目的检测【2-6】。HBV DNA是临床判断HBV复制和传染性的可靠指标【2】。传统的血清HBV标志物（HBVM）反映HBV在体内存在的状况【3】。HBV 前S1抗原（Pre S1-Ag）暴露于颗粒表面，是HBV与肝细胞膜上特异性受体相结合的主要蛋白成分，在HBV感染肝细胞和机体免疫应答中起重要作用，近年来，通过HBV Pre S1-Ag在乙型肝炎发病机制、HBV感染与复制等方面的深入研究【4,5】，反映乙型肝炎病毒在体内感染及复制状况的具有重要价值。为此，我们对慢性肝病与血清Pre S1-Ag、HBV DNA以及HBVM的相关性进行了研究，为慢性肝病进展的预防和临床治疗提供依据。
1 资料与方法
1.1 临床资料 研究对象为2008年1月至2012年12月在启东肝癌防治研究所收集的慢性肝病患者，其中，肝癌患者61例（平均年龄53.58±7.86岁），男性40例，女性21例；肝硬化患者80例（平均年龄44.50±8.36岁），男性48例，女性32例；慢性乙肝患者338例，男性222例，女性116例。慢性乙型肝炎和肝硬化诊断均符合《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准【7】。肝癌诊断符合原发性肝癌的临床诊断与分期标准【8】。
1.2 血清学检测指标及方法 所有受检者均采集空腹静脉血10mL，离心后分离血清上机检测。HBV DNA：采用荧光定量PCR法，参考值：测定的拷贝数＜500/mL。HBVM：采用ELISA 法，HBVM阳性指HBsAg、HBeAg、抗HBs、抗HBe、抗HBc任意一项阳性，仅抗HBs一项阳性除外；Pre S1-Ag：采用ELISA 法，参考值：阴性。试剂盒均购于上海科华生物技术有限公司生产，按照说明书操作和判定结果。
1.3 统计学处理 数据处理分析运用SPSS 17.0软件。计数资料比较采用χ2检验，采用KaPPa一致性检验HBV Pre S1-Ag与HBV DNA的阳性一致性。以P<0. 05判断为差异有统计学意义。
2结果
2.1 慢性肝病患者Pre S1-Ag、HBV DNA、HBVM阳性率比较
肝癌组Pre S1-Ag阳性率显著低于肝硬化组和慢性乙型肝炎组（χ2=14.9538，P=0.0006），肝癌组HBV DNA阳性率显著低于肝硬化组和慢性乙型肝炎组（χ2=49.7994，P=0.0000），肝癌组HBVM（除单一抗HBs阳性）阳性率与肝硬化组和慢性乙型肝炎组的差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
表1 慢性肝病患者Pre S1-Ag、HBV DNA和HBVM阳性率（%）
组 别 例数 Pre S1-Ag HBV DNA HBVM 阳性数 阳性率（%） 阳性数 阳性率（%） 阳性数 阳性率（%） 肝癌组 61 24 39.34 21 34.43 60 98.36 肝硬化组 80 39 48.75 37 46.25 78 97.50 慢性乙型肝炎组 338 213 63.02 251 74.26 338 100.00 χ2 14.9538 49.7994 P值 0.0006 0.0000 >0.05 2.2 主要HBVM阳性模式的慢性肝病患者构成比差异
HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组的肝癌构成比（18.03%）显著低于肝硬化（28.75%）和慢性乙型肝炎（52.07%），差异有显著统计学意义（χ2=33.2008，P=0.0008）。HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组的肝硬化构成比（56.25%）显著低于肝癌（52.46%）和慢性乙型肝炎（29.88%），差异有显著统计学意义（χ2=26.2669，P=0.0000）。HBsAg、抗HBc阳性组的不同慢性肝病构成比差异无统计学意义（χ2=2.7001，P=0.2595）。其中，三组主要的HBV标志物阳性模式均存在抗HBc。见表2。
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表2 主要HBVM阳性模式的慢性肝病患者构成比（%）
HBVM阳性 模式 肝癌组 （61例） 肝硬化组 （80例） 慢性乙型肝炎组 （338例） χ2 P值 例数 构成比（%） 例数 构成比（%） 例数 构成比 （%） HBsAg、HBeAg、抗HBc 11 18.03 23 28.75 176 52.07 33.2008 0.0008 HBsAg、抗HBe、抗HBc 32 52.46 45 56.25 101 29.88 26.2669 0.0000 HBsAg、抗HBc 9 14.75 6 7.50 48 14.20 2.7001 0.2595 其他 9 14.75 6 7.50 13 3.85 11.6488 0.0030
2.3 慢性肝病患者Pre S1-Ag与HBV DNA 相关性
表3显示，肝癌、肝硬化和慢性乙型肝炎患者，其Pre S1-Ag阳性组的HBV DNA阳性率均显著高于阴性组（χ2=31.8778，P=0.0000；χ2=51.2806，P=0.0000；χ2=127.5617，P=0.0000）。
肝癌组KaPPa值为0.7211，95%CI为0.4708~0.9715，说明Pre S1-Ag与HBV DNA的阳性一致性程度比较满意。肝硬化组KaPPa值为0.7996，95%CI为0.5808~1.0185，说明阳性一致性程度相当满意。慢性乙型肝炎组KaPPa值为0.5936，95%CI为0.4906~0.6967，说明阳性一致性程度比较满意。见表3。
表3 不同慢性肝病患者Pre S1-Ag与HBV DNA 相关性和KaPPa一致性
组 别 Pre S1-Ag HBV DNA 阳性 HBV DNA 阴性 χ2 P值 KaPPa值 95%CI 肝癌组 （61例） 阳性 19 5 31.8778 0.0000 0.7211 0.4708~0.9715 阴性 3 34 肝硬化组 （80例） 阳性 34 5 51.2806 0.0000 0.7996 0.5808~1.0185 阴性 3 38 慢性乙型 肝炎组 （338例） 阳性 202 11 127.5617 0.0000 0.5936 0.4906~0.6967 阴性 49 76
3 讨论
大量文献报道，机体乙肝病毒感染后的传染性、进展及预后，很大程度上取决于体内HBV复制状态【3,9】，而乙肝三系统、Pre S1-Ag与HBV DNA定量水平之间具有良好的相关性，能敏感地反映乙型肝炎病毒复制情况【2,6】。HBV在血清中有三种形式的病毒颗粒存在，而只有直径约42nm的球状完整颗粒含有病毒DNA，能复制且具有传染性，Pre S1-Ag只存在于其中。HBV Pre S1-Ag存在于完整的病毒颗粒的表面，是HBV外膜蛋白的重要组成部分，与HBV复制关系密切，具有高度的免疫原性【5,6】。
本结果三种慢性肝病患者的HBVM阳性率均大于97.00%，说明HBV感染是肝硬化和肝癌的主要病因。在所有研究对象中，肝癌患者与Pre S1-Ag（39.34%）和HBV DNA（34.43%）的阳性水平显著低于肝硬化（48.75%，46.25%），更低于慢性乙型肝炎患者（63.02%，74.26%）。HBV DNA在乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中呈逐渐下降趋势，与文献【10,11】结论一致，而Pre S1-Ag与HBV DNA的阳性水平有良好的一致性，显示HBV-DNA与PreS1抗原具有较好的相关性【2,6】，表示二者均可直接反映病毒的活动性和复制状态，并与慢性肝病进展密切相关。文献指出，Pre S1-Ag可引起机体的免疫应答并可调节机体对Pre S1-Ag的免疫原性，体液免疫应答常在HBV急性感染的早期；Pre S1-Ag作为一种新的反映HBV复制状态和传染性的指标，其阳性患者的HBV复制活跃，HBV含量高；Pre S1-Ag阳性的乙型肝炎患者，传播乙型肝炎病毒的危险性较Pre S1-Ag阴性者更大，但如果Pre S1-Ag持续阳性，HBV则向慢性转变【2,5,6】。然而，研究表明，当慢性乙型肝炎进展为肝硬化和肝癌时，机体HBV活动性复制水平反而降低，导致Pre S1-Ag和HBV DNA阳性水平下降。
结果显示，本研究中三组慢性肝病患者均以三种HBV模式为主，其中，HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性模式较多发生肝硬化和肝癌，相互关系最为密切。有学者提出，HBeAg作为HBV的核心内部成分，是临床上判断病毒在宿主体内复制并具有传染性的重要血清学指标，但HBeAg血清转换并不表示HBV已经清除或者疾病获得好转，在亚洲等一些地区，其HBeAg转阴后仍有1/3以上的慢性乙型肝炎患者存在肝脏炎症反复加重现象，并逐步进展为肝硬化和肝癌【12】。研究提示，抗HBe长期存在，HBV DNA和宿主肝细胞DNA整合，最终导致HBV持续感染，由于长期的肝脏损害累积，肝脏炎症及肝纤维化、肝硬化程度更重，更易进展为肝癌【3】。另外发现，三组HBV标志物阳性模式中均存在抗HBc阳性。抗-HBc是乙肝病毒感染的一个直接标志，可作为乙型肝炎感染期病毒在体内复制的指标，说明启东肝癌高发地区的慢性肝病患者中存在较多的HBVDNA整合现象，其与肝癌高发的机制值得深入探索【13】。研究表明，HBVM不同模式提示了体内HBV病毒存在的状况，可能对疾病的预后有不同的影响，病毒存在状态与疾病转归有明显关系。
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作者简介：姚红玉（1964—），女，大学本科，启东肝癌防治研究所研究员（江苏启东，226200）。
（收稿：2013-11-12 编辑：陈兵）
论文作者:姚红玉,沈蓉,陈陶阳,樊健
论文发表刊物:《实用医学杂志》2013年11月供稿
论文发表时间:2014-1-6
标签：阳性论文; 乙型肝炎论文; 肝癌论文; 肝硬化论文; 肝病论文; 患者论文; 阴性论文; 《实用医学杂志》2013年11月供稿论文;