（四川省绵阳市中心医院检验科 四川 绵阳 621000）
【关键词】 流式细胞术；肿瘤；病理；免疫；化疗
【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）36-0138-02
流式细胞术（flow cytometry，FCM)是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析，并可以对特定的群体分选的细胞的分析技术，具有指标测量多、检测速度快、采集数据量大、分选纯度高、方法灵活、分析全面等特点。随着流式细胞技术与方法的日益完善以及临床应用的不断拓宽，临床医学各个学科几乎都涉及到对流式细胞术的应用，在血液学、肿瘤学、免疫学、微生物学、细胞生物学-遗传学以及临床检验学等众多领域发挥着非常重要的作用[1，2]。本文就对其在临床肿瘤学中的应用做如下综述。
1．FCM在肿瘤患者的病理检查中的应用
FCM在临床肿瘤学方向的应用主要是利用对DNA含量的测定进行包括癌前病变以及癌变早期的检出、化疗指导以及评估预后等工作。迄今为止，病理形态学的诊断被认为是肿瘤诊断的“金标准”，但对于某些肿瘤，特别是在早期缺乏客观明确的诊断指标，不能提高诊断的正确率[3]。所以利用FCM分析细胞DNA的含量的精确度好、分辨率高的特点，不仅可以对肿瘤生物学行为的判断提供客观且准确的资料，而且还可以应用于肿瘤的早期诊断和良恶性肿瘤的鉴别诊断。
一般来说具有某些癌变潜能的病变称之为癌前病变，如何正确识别癌前病变则是对肿瘤的早期诊断和预防恶性肿癌具有重要的意义。
采用FCM检测DNA非整倍体的出现，可以作为诊断癌前病变发展癌变的有效标志，从而评估出癌前病变性质及其发展趋势，有助于对癌变早期的诊断[4]。方法首先将实体的瘤组织进行解聚后再分散，制备成瘤组织的单细胞悬液，采用荧光染料（碘化吡啶 PI)进行染色，分析细胞的DNA含量。DNA含量能直接表示出细胞的倍体情况，其中非倍体细胞数量与肿瘤的恶性程度相关。非整倍体细胞峰的存在可作为肿瘤诊断的有力证据。癌前病变发生率与细胞的不典型增生程度有密切关系，增生程度越重，癌变发生率越高。[5]
2．FCM在肿瘤患者的免疫功能检查中的应用
肿瘤患者的机体免疫功能异常与恶性肿瘤的发生、发展、转移及预后有密切关系。在机体免疫正常情况下，组织中含有的T淋巴细胞及其亚群的数量相对稳定，一旦某一T淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常，机体就会出现免疫调节紊乱，发生一系列的免疫病理、生理变化。所以T淋巴细胞亚群分析可以作为反映细胞免疫功能的重要指标，并且在肿瘤免疫监测中起着重要的作用[6，7]。
T淋巴细胞根据细胞表面抗原的不同分成CD4+和CD8+细胞等，根据免疫功能的不同分成辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)和细胞毒性T细胞(Tc)等。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆CD4+分子是成熟T细胞的表面标志，CD4+分子表达在Th细胞表面，CD8+分子多数表达在Ts和Tc细胞表面。T细胞CD4+/CD8+比值为表现机体免疫系统紊乱的敏感指标，当机体免疫功能受到抑制时，CD4+值下降，CD8+值上升，比值减少。当T细胞总数或CD4+/CD8+比值减少，此时可视为免疫调节功能紊乱，容易发生自身免疫性疾病或肿瘤。
CD4+细胞的降低尤以Th1细胞的减少更为显著，表达CD4+分子的Th1细胞主要产生IL-2、IFN-r等主宰细胞免疫。一旦出现Th1向Th2漂移，机体的抗肿瘤免疫将受到严重干扰。肿瘤患者外周血中Treg细胞明显增高，可显著抑制免疫应答，与T细胞活性下降及促进肿瘤生长有关。肿瘤患者的抑制性T细胞(Ts)活性与肿瘤的进展程度有关，随着病程进CD8+细胞升高的越明显[8，9]。
目前，FCM可方便和快速地获得肿瘤患者的T淋巴细胞亚群的表达情况。FCM通过对T淋巴细胞亚群分析，测定患者T淋巴细胞各亚群数量，从而了解T淋巴细胞的分化功能，达到鉴别新的T淋巴细胞亚群的目的。更重要的是对诸如肿瘤、免疫性疾病、感染性疾病等疾病，可以通过研究其特异性淋巴细胞亚群或者某些免疫细胞是否存在、缺乏或者过度表达细胞表面标志物，来达到诊断病情、分析发病机制、观察疗效和检测预后等的目的[10]。
3.FCM在肿瘤患者化疗中的应用
FCM不仅对恶性肿瘤的DNA定量分析有用，对化疗中肿瘤DNA的分布直方图的变化也可以起到评估疗效，了解细胞的动力学改变，在肿瘤化疗中的应用意义尤其显著。临床工作者可以根据细胞各时期分布的情况，与化疗药物对细胞动力学的干扰理论相结合，设计出最佳的治疗方案，再根据DNA直方图可以直接地看出肿瘤细胞的杀伤改变，及时对治疗方案进行调整改进，选取更有效的药物以使对肿瘤细胞达到最强的杀伤效果。
总之，FCM在肿瘤的早期诊断、预后检测及疗效评估等方面己显示出明显的优势。
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论文作者:石静怡
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第36期
论文发表时间:2017/2/6
标签：细胞论文; 肿瘤论文; 免疫论文; 淋巴细胞论文; 患者论文; 机体论文; 流式论文; 《医药前沿》2016年12月第36期论文;