成都锦江区妇幼保健院 四川成都 610051
摘要：目的：研究胚胎移植（embryo transfer，ET）14d血清人绒毛膜促性腺激素（β- human chori onic gonadotrophin，β- HCG）、雌二醇（Estradiol，E2）、孕酮（Progesterone，P）值与辅助生殖技术（assisted rep roductive techniques，ART）治疗后患者早期妊娠结局的关系。方法：对2014年1月至2014年8月在锦江区妇幼保健院生殖中心接受体外受精-胚胎移植（in vitro fertilisation and embryo transfer，IVF-ET）助孕治疗后14d，检测血清β- HCG、E2及P值的妇女共计455个周期的妊娠结局（包括生化妊娠、宫外孕、临床妊娠早期流产、临床单胎妊娠及临床多胎妊娠）进行回顾性分析。结果：①生化妊娠124例（A组，27.3%）；宫外孕24例（B组，5.3% ）；临床妊娠早期流产36例（C组，7.9%）；临床单胎妊娠189例（D组，41.5%）；临床多胎妊娠82例（E组，18.0% ）。②早期妊娠不同结局各组在ET14d，检测其血清β- HCG、E2及P值，多组比较的秩和检验分别为：=33.276（P<0.05），=37.060（P<0.05），=239.271（P<0.05）。两两比较情况如下：血清β- HCG值比较，A组＜B、C组＜D＜E组，差异有统计学意义（P＜0.05），而B、C组差异无统计学意义（P＞0.05）；血清E2值比较，E组高于其他各组，差异有统计学意义（P＜0.05），而其他不同结局组之间的差异没有统计学意义（P＞0.05）；血清P值比较，A、B、C组＜D组＜E组，差异有统计学意义（P＜0.05）。其中A、B、C组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：ET14d血清β- HCG及P值可以预测妊娠结局，特别是β- HCG值能较好的预测ART治疗后早期妊娠结局。
关键词：辅助生殖技术；血清人绒毛膜促性腺激素；雌二醇；孕酮；妊娠结局；
近年来，辅助生殖技术（assisted reproductive techniques，ART）发展非常迅速，是治疗不孕症的最有效的方法之一，已被很多不孕夫妇接受，辅助生殖技术治疗的受孕者中，早期妊娠丢失是常见的并发症；而宫外孕的发生率是自然妊娠的2～5倍[ 1-2 ]，多胎的发生率大约有20% ～25%[ 3 ]。本研究通过分析ART中特定时间的β-HCG、E2及P值与妊娠结局的关系，旨在选择一种简单、有效的预测妊娠结局的指标。
1 资料与方法
1.1 研究对象
对2014年1月至2014年8月在锦江区妇幼保健院生殖中心接受体外受精-胚胎移植（in vitro fertilisation and embryo transfer，IVF-ET）助孕治疗的妇女共计1165个周期，其中标准长方案1111个周期，妊娠579例。对455例随访资料完整的妊娠病例进行回顾性分析。
本研究对象纳入标准：所选患者全部进行标准长方案治疗；所有移植周期为新鲜周期；血清标本均在本中心检测且移植14d血β-HCG大于25U/L；其中继续妊娠者随访到分娩；夫妻双方未发现染色体异常。根据上述标准，共有455个周期纳入本研究，其中不孕原因有盆腔及输卵管因素，子宫内膜异位症，排卵障碍，男性因素，原因不明等；患者平均年龄31.44±4.24岁；不孕年限均小于35年；其中包括原发性不孕191例，继发性不孕264例；常规IVF为361例，单精子卵细胞浆内注射为（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）66例，IVF之后补打ICSI为28例；平均每周期移植胚胎数为1.97个（1～3个），常规在体外受精后第3-5天移植。
1.2 方法
1.2.1 治疗方案 在本研究中所选患者全部采取常规长方案进行治疗，促排卵方案为GnRHa/Gonal- F/HMG/HCG，通过血清内分泌水平和B超监测卵泡发育情况，当有3个以上卵泡直径大于等于18mm时，HCG1万单位肌注后34～36小时B超引导下经阴道取卵，根据患者情况进行IVF、ICSI及IVF+ICSI受精，3～5天后进行移植，自取卵日全部常规给予黄体酮进行黄体支持治疗。
1.2.2 实验室检测方法 患者于ET14d上午8～10点抽取静脉血3mL，孵育后高速离心分离获得血清，采用化学发光法对β-HCG、E2及P进行检测；本研究中诊断试剂盒由德国西门子公司提供，化学发光分析仪为Centaur XP型。
1.2.3 妊娠结局的判定 ET14d血清HCG＞25 IU/L，继续黄体支持，28d行阴道B超检查确定妊娠情况、宫内孕囊个数及胎心搏动情况。生化妊娠组（A组）ET14d尿/血HCG值阳性，ET28d阴道B超检查在宫腔内外均未探及孕囊；宫外孕组（B组）血清β-HCG阳性，不规则阴道流血伴或不伴下腹部疼痛，阴道B超在宫内未探及孕囊，在宫外探及孕囊或附件包块，或者手术及病理检查确诊为宫外孕；临床妊娠早期流产组（C组）B超确定宫内妊娠，但出现胚胎停育或流产，阴道排出物或刮宫物病检有绒毛结构；临床妊娠单胎组（D组）B超确定为宫内孕囊一个，内可见胎心胎芽；临床妊娠多胎组（E组）B超确定为宫内2个及以上孕囊，内可见胎心及胎芽。
1.3 统计学方法
在本研究中采用 SPSS 19.0统计软件进行检验，以P＜0.05表示有显著性差异。计量资料满足正态分布方差齐性时，采用单因素方差分析one-way ANOVA；当指标不满足正态分布方差齐性时，采用多组比较的秩和检验，秩变换后作两两比较。
2 结果
2.1 周期临床的一般资料
455个周期患者平均年龄31.44±4.24岁。其中生化妊娠124例（A组，27.3%）；宫外孕24例（B组，5.3% ）；临床妊娠早期流产36例（C组，7.9%）；临床单胎妊娠189例（D组，41.5%）；临床多胎妊娠82例（E组，18.0% ），宫外孕及多胎妊娠均明显高于自然妊娠。5组的年龄、不孕年限、原发/继发、启动量、天数、总剂量别均无统计学意义（P＞0.05），见表1。
3 讨论
HCG是一种由ɑ和β亚单位组成的糖蛋白激素，由于β- HCG特异性强，检测血清β- HCG可以准确反映HCG的浓度并预测妊娠。对于ART治疗患者，由于受精及ET时间确定，在胚胎发育同一时间的β- HCG值具有可比性[4]。此外有报道在ET14d进行血清HCG检测，既避免了黄体支持时应用外源性HCG的干扰，也防止了由于过早检测HCG预测不准确的风险[5]。因此ET14d血清β-HCG值亦适合各种ART治疗方案后妊娠结局的预测。本研究455个周期在ET14d血清β-HCG水平分别为：A组（113.30±275.41）IU/L；B、C组（277.42±272.69）IU/L、（284.71±302.96）IU/L；D组（505.36±475.35）IU/L；E组（986.75±761.09）IU/L。HCG是由滋养层细胞分泌，作用于月经黄体使之继续发育为妊娠黄体，并通过与胎盘血窦接触后进入血液循环，多胎妊娠可能在妊娠早期多部位滋养细胞分泌血清β- HCG并入血，导致血清β- HCG水平高[6]；而异位妊娠患者因滋养细胞发育不良，合体滋养细胞合成的β- HCG量显著减少，故血清β- HCG的含量低于正常妊娠，本研究对早期妊娠不同结局各组在ET14d血清β- HCG进行两两比较为，A组＜B、C组＜D组＜E组，差异有统计学意义（P＜0.05），而B、C组差异无统计学意义（P＞0.05）。提示着床的胚胎越多，血清β-HCG水平越高；而不良妊娠则可能是由于某些因素使滋养细胞分泌HCG不足，或者是胚胎着床部位异常致血供差，缺乏蜕膜组织而滋养细胞发育欠佳，同时说明β-HCG值越高，其继续妊娠的可能性大，而β-HCG低水平则与不良妊娠的发生密切相关。
E2在孕早期明显增多，主要来自于卵巢和胎盘，随后由胎儿-胎盘合成，本研究中的不良妊娠（包括生化妊娠、宫外孕、临床妊娠早期流产）在ET后，由于受精卵没有着床、受精卵着床的输卵管肌层薄、因为胎盘和免疫等因素的作用，导致异常妊娠组的E2水平低于正常妊娠组，本研究455个周期ET14d血清E2水平与妊娠结局关系表明，E组E2高于其他各组，差异有统计学意义（P＜0.05），其中D组的E2值也比异常妊娠组要高，只是通过两两比较，他们之间没有统计学差异（P＞0.05），提示胎数越多，E2值越高。
生化妊娠在ET后由于受精卵没有着床；宫外孕时，由于输卵管肌层薄，血供欠佳，滋养层细胞较少，且活力低，黄体刺激低下使黄体发育不良；临床妊娠早期流产时，因为一些因素的作用使胚胎发育较差，所以滋养细胞和妊娠黄体产生的P偏低，本研究455个周期ET14d血清P水平与妊娠结局关系表明，A、B、C组＜D组＜E组，差异有统计学意义（P＜0.05），其中A、B、C组差异无统计学意义，从本研究中提示着床的胚胎越多，血清P水平越高；而P值低水平则与不良妊娠的发生密切相关。
综上所述根据血清β- HCG及P值可以鉴别不良妊娠与正常妊娠，特别是血清β- HCG值能较好的预测ART治疗后早期妊娠结局。有研究表明IVF-ET后的临床妊娠流产率、异位妊娠率以及多胎率较自然妊娠增高[7-8]，本研究也发现ART治疗后宫外孕的发生率为5.3%，临床妊娠早期流产为 7.9%，临床多胎妊娠为18%，远高于自然妊娠，因此尽早地预测和发现不良妊娠并及时做好临床处理是十分必要的。
参考文献：
[1]Huang，Yongye，Xie，Wanhua，Yao，Chaogang et al.Pluripotent-related gene expression analyses in single porcine recloned embryo[J].Biotechnology Letters，2014，36（6）：1161-1169.
[2]Toshiya Sakata，Akiko Saito，Jinji Mizuno et al.Single Embryo-Coupled Gate Field Effect Transistor for Elective Single Embryo Transfer[J].Analytical chemistry，2013，85（14）：6633-6638.
[3]Bastu，E.，Celik，C.，Keskin，G. et al.Evaluation of embryo transfer time （day 2 vs day 3）after imposed single embryo transfer legislation：When to transfer?[J].Journal of obstetrics and gynaecology：the journal of the Institute of Obstetrics and Gynaecology，2013，33（4）：387-390.
[4]Mu?oz，M.，Galindo，N.，Pérez-Cano，I. et al.Successful twin delivery following transmyometrial embryo transfer in a patient with a false uterine cavity[J].Reproductive biomedicine online，2014，28（2）：137-140.
[5]陈彩蓉，全松，王秋香等.胚胎移植术后9和11d血清β-HCG值对妊娠结局的预测价值[J].南方医科大学学报，2015，（7）：1050-1054.
[6]王爱利，刘彬，关源源等.检测双次血β-HCG及其倍数对胚胎移植后妊娠结局的预测价值[J].实用妇产科杂志，2012，28（11）：942-946.
[7]赵琰誉，刘英，张军等.经阴道超声子宫内膜分型对体外受精-胚胎移植妊娠结局的预测价值[J].中华超声影像学杂志，2014，23（4）：325-328.
[8]孔娜，刘景瑜，王玢等.移植术后第14天血清β-HCG对辅助生育妊娠结局的预测[J].生殖医学杂志，2015，24（9）：727-731.
基金项目：四川省医学科研青年创新课题 编号 Q15056
作者简介：曾泳梅（1981-），女，湖南娄底人，硕士，主治医师，研究方向：辅助生殖技术。
通讯作者：耿丽红，E-mail：redlily68.163.com
论文作者:曾泳梅,孟祥黔,王琪,耿丽红
论文发表刊物:《健康世界》2016年第9期
论文发表时间:2016/7/22
标签：血清论文; 统计学论文; 胚胎论文; 结局论文; 宫外孕论文; 周期论文; 差异论文; 《健康世界》2016年第9期论文;