赵颖
黑龙江省第二医院 150010
【摘 要】目的：观察血培养的三种方法并进行比较，评价临床常用的3种血液培养方法的应用价值。方法：3种不同浓度的4种细菌各70株，接种到3种不同的培养瓶中进行培养，对其阳性检出时间、阳性检出率及相关因素进行综合性评估。结果：miniVITAL系统对所测试的3种不同浓度的细菌（苛养菌除外）阳性检出时间3.5～28.6h；对浓度为100CFU ml的苛养菌A群链球菌，miniVITAL48h阳性检出率可达100%，双相血培养瓶阳性检出率为17.1%，自制血培养瓶的阳性检出率为0%。结论：miniVITAL全自动荧光血培养仪可缩短培养时间，结果快速准确；双相血培养瓶对苛养菌和低浓度的细菌阳性检出率明显高于自制血培养瓶。
【关键词】血培养；三种方法；观察比较；
【中图分类号】Q461【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-04-129-01
血培养是将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。用于菌血症、败血症及脓毒败血症的病因学诊断。血培养是临床诊断败血症的重要方法，阳性结果对明确诊断、对症治疗有极高的应用价值。但据文献报道目前国内的血培养阳性率仅为17。8%和18.4%。为了提高血培养的阳性率，客观的反映出败血症患者血内存在病原菌的实际状况，临床医生精确选用血培养，检验科室精心分离鉴定。本文就血培养的三种方法进行观察，做出比较结果。
1.资料与方法
1.1 仪器
miniVITAL全自动荧光血培养仪，法国生物梅里埃公司产品；HZQ2X100振荡培养箱，中国哈尔滨乐联公司产品。
1.2 培养瓶
标准血培养瓶、双相血培养瓶购自法国生物梅里埃公司，在有效期内使用，自制血培养瓶按照全国临床检验操作规程配制1，高压灭菌后备用。
1.3 方法
金黄色葡萄球菌（SAU）、铜绿假单胞菌（PA）、大肠埃希菌（Eco）和A群链球菌（STR）各70株均来源于本院检验科微生物室，为临床鉴定中的最终浓度为102CFU 10CFU ml、ml和1CFU ml接种于3种血培养瓶中；标准血培养瓶放入miniVITAL全自动荧光血培养仪内培养，培养温度设置为35℃，记录培养开始时间及阳性结果出现时间；双相血培养瓶和自制血培养瓶放入HZQ2X100振荡培养箱，35℃下振荡培养，前10h，每1h观察1次结果，以后每8h观察1次，以培养液浑浊和变色判定阳性结果，并记录出现阳性结果的时间。
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2.结果
2.1miniVITAL系统对4种细菌的检出结果
在菌液浓度为100CFU ml时，阳性自动报警时间最快的是大肠埃希菌（Eco），仅需3.5h，铜绿假单株。将以上4种菌株分别配制成悬液，按在血培养瓶胞菌（PA）需6.4h，金黄色葡萄球菌（SAU）需7.5h，A群链球菌（STR）需24.2h；在菌液浓度为1CFU ml时，阳性报警时间分别为大肠埃希菌11.6h、铜绿假单胞菌需18.4h、金黄色葡萄球菌需25.5h、A群链球菌需40.4h。
2.2双相血培养瓶和自制血培养瓶对3种不同浓度的4种细菌检出结果
在菌液浓度为100CFU ml时，双相血培养瓶组24h内阳性检出率大肠埃希菌100%，铜绿假单胞菌80%，金黄色葡萄球菌94.3%，而自制血培养瓶为大肠埃希菌100%，铜绿假单胞菌45.7%，金黄色葡萄球菌71.4%；在菌液浓度为1CFU ml时，双相血培养瓶组48h内阳性检出率为大肠埃希菌100%、铜绿假单胞菌85.7%、金黄色葡萄球菌65.7%，自制血培养瓶组阳性检出率为大肠埃希菌60%、铜绿假单胞菌0%、金黄色葡萄球菌22.9%。苛养菌A群链球菌在菌液浓度为100CFU ml时，72h内双相血培养瓶组阳性检出率为100.0%，自制血培养瓶组阳性检出率为74.3%，其余浓度组则均需>72h方可检出。
3.讨论
3.1 检出时间
人体血液中的细菌感染由菌血症到败血症，其死亡率随病程而增加2，因此，尽快从ChinJNosocomiolVo.l13No.12003血液培养中检出致病菌对患者的诊断和治疗至关重要。miniVITAL系统为连续振荡培养，并采用同源荧光技术每15min对血培养瓶自动进行一次检测，因此能在第1时间检测到细菌的生长情况。结果表明miniVITAL系统检出细菌较之其他两种方法所需时间最短（P<0.01），检出阳性结果最短仅需3.5h，并且在48h内检出了全部所测试的3种不同浓度的4种细菌，对低浓度的苛养菌A群链球菌48h内阳性检出率为100%。采用该方法可快速、准确地检出致病菌，为患者的抢救和治疗赢得了时间。
3.2 阳性率
双相血培养瓶和自制血培养瓶，在培养方法上都属于手工培养，肉眼观察，对营养要求不高、较易生长的细菌如大肠埃希菌的检出两种方法差异不明显（P>0.05），而对苛养菌如A群链球菌的检出时间上差异有显著性（P<0.01）。双相血培养瓶对浓度为100CFU ml。
3.3 3种血培养方法的观察与比较
A群链球菌48h内阳性，检出率为17.1%，72h内阳性检出率可达100%，而自制血培养瓶48h内阳性检出率为0%，72h内阳性检出率74.3%。这与双相血培养瓶的营养条件、液相和固相透明度有较大关系。对3种血培养瓶的检出时间有较大的影响，同种细菌因菌液浓度不同，检出的时间可相差2～3d，血培养结果与取血量有直接的关系，每增加1ml血液可使血培养敏感性提高3%，10ml和20ml血样培养所分离的致病菌差别可高达40%3，因此采集足够的血量，一般不低于10ml，最好20ml，可检出血液中很少的细菌。绝大多数菌血症引起的败血症，其细菌感染量<1CFU ml血液。血培养各种方法的核心是如何在最短的时间内检测到最小量的细菌，全自动血培养系统能在最短的时间内检测到最小量的细菌，但因其价格昂贵，成本高，难以在基层单位普及。双相血培养瓶与自制血培养瓶比较在检出时间和阳性率上都有明显的优越性。双相血培养瓶的细菌培养无需特殊的仪器，价格便宜，成本低，易于在基层单位实验室推广应用。
4.结语
血培养是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物（如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。了解引起菌血症的不同途径有助于诊断和解释血培养结果。菌血症通常来源于以下部位的感染，其中泌尿生殖道为25%，呼吸道为20%，脓肿为10%，外科伤口为5%，胆道感染为5%，其他已知部位的感染为10%，未知部位的感染为25%。本文就血培养的三种方法进行观察与比较，希望对医患有所帮助。
参考文献：
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[3]陈咪味.血培养细菌L型的观察[J].中华医学检验杂志.2013（05），67-68.
论文作者:赵颖
论文发表刊物:《系统医学》2016年第2卷第4期
论文发表时间:2016/5/11
标签：检出论文; 阳性论文; 细菌论文; 浓度论文; 菌血症论文; 方法论文; 时间论文; 《系统医学》2016年第2卷第4期论文;