路晓琳
河北省邯郸市中心医院 河北 邯郸 ０５６００１ 路晓琳女１９８４年１１月,汉族,河北省邯郸市,单位:
河北省邯郸市中心医院;研究方向:妇科肿瘤.
【摘要】 目的 研究卵泡刺激素(FSH)对上皮性卵巢细胞株增殖、凋亡的影响,并通过医疗实验来深入的探讨分析FSH 在女性卵巢上皮性肿瘤(OET)中的发生机理,重点包括在其发生、发展过程中所存在的潜在的生物学作用机制.方法 培养人卵巢癌细胞株SKOV３、３AO,并将其分别分为FSH 组(研究组)和对照组.通过采用不同浓度(１０/２０/４０/８０/１６０mIU/ml)的FSH 来作用于SKOV３、３AO 细胞,之后分别观察不同时间(１２h/２４h/４８h/７２h)后的发生状态.结果 ① FSH 组的SKOV３、３AO 细胞的凋亡率明显低于对照组,其差异显著,→ (P＜０．０５).② 如图２－３所示,β－catenin在两株细胞中均可进行表达,当经过FSH 刺激后,两株细胞中的β－catenin均表达增强,其表现为P＜０．０５.结论 FSH 与卵巢癌的增殖凋亡有着密切的关联性.FSH 通过改变或者促进卵巢癌细胞生命周期而实现卵巢癌细胞增殖以及抗凋亡的效果作用,并且在当FSHR 呈阳性时,患者卵巢癌细胞的活动周期及其发生规律更为明显. 【关键词】 卵泡刺激素;上皮性卵巢癌;细胞增殖;细胞凋亡【中图分类号】R７３７．３【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０４８５－０２
卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官三大恶心肿瘤之一,随着社会时代的发展,医疗技术水平的进步,关于卵巢恶性肿瘤手术的研究探索工作取得了新进展、新成果,包括在手术技术方法的改进方面、放射治疗、化学药物治疗等,但是就目前形势来看,仍然不容乐观.最新研究成果显示,卵巢恶性肿瘤通过传统的化学药物治疗、放射治疗、手术治疗,对于卵巢恶性上皮性肿瘤———(epithelialovariancancer,EOC)的治疗效果及其功能改善影响还是微乎其微.最新权威资料显示,该病症患者５年生存率为(３０％－－－４０％),其不治死亡率已然位居妇科恶性肿瘤首位.基于上述严峻的问题,国内外医学界学者、专家都加大了对卵巢癌的发病机理进行研究,经过最近几年的不断研究,让人们重新认识到了卵巢癌的发生及其进展与它在发病机理过程中所处的环境有着比较密切的联系.
１ 一般资料与方法１．１ 资料(实验材料) 针对此次卵泡刺激素对上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡影响的医学性问题研究,我院主要选用了人卵巢浆液性囊腺癌细胞株→ SKＧOV３,以及人卵巢黏液性囊腺癌细胞株→ ３AO .实验注射使用的FSH 购置于瑞士→LaboratoiresSeronoSA 公司;实验应用材料当中的兔抗β—action多克隆抗体,主要来自于→ 圣克鲁斯生物技术“SantaCruz”公司.１．２ 方法(实验方法) 细胞培养→选择卵巢癌细胞株SKOV３,将两者分别培养于→ PRMI１６４０(内含１０％的FBS)的培养液当中,之后再将其放置到空气成分为５％Co２的培养箱中,箱内的温度要设置为３７℃,湿度要饱和.该步骤环节完成之后,将其取出,首先选用０．２５％胰蛋白酶－EDTA 消化液来进行消化与传代.所取出对数生长期细胞应用于此次实验研究当中,并将其进行分组,分别设立为研究组、对照组,其中研究组就是FSH 组.FSH 组分别选择１０/２０/４０/８０以及１６０mIU/ml的FSH 来进行干预,分别等置１２、２４/４８/７２h;将不同浓度FSH 分别置于培养下的SKOV３细胞与HO８９１０细胞.同理,对照组与FSH 组实验方法相同,上述实验操作反复实验并重复三次及其以上,得出结果后取平均值.除此之外还可采用免疫荧光法或者MTT－－－(四甲基偶氮唑蓝)比色法进行检测.关于FSHR 的实验研究操作,首先就是对上述两组实验病例进行基因组DNA 的抽提,主要采用PCR－RFLP 方法来对FSHR Ala３０７Thr基因分型.实验过程中所有使用到的引物均来自于上海晶鉴实业有限公司合成,其中,PCR的反应体系→２０μL,反应条件→ 首先,９５℃预变性５min,之后将９５℃ 继续变性３０s,第三步则是５０℃退火３０s,最后则是７２℃ 延伸３０s.再操作经历四十个循环之后,将之前的７２℃再接着继续延伸１０min的时间.实验结果出来之后,观察分析FSHR的蛋白表达.
１．３ 统计学处理方法 此次关于卵泡刺激素对上皮性卵巢细胞增殖凋亡影响作用效果的实验研究,在统计学处理方法上主要采用SPSS１３．０统计处理软件,其相关实验数据均通过(X±s)来表示,通过对实验各组数据均数进行对比分析,得出P＜０．０５为差异性有统计学意义.２ 结果
①β－catenin在两株细胞中均可进行表达,当经过FSH 刺激后,两株细胞中的β－catenin均表达增强,其表现为P＜０．０５.② FSH 对上皮性卵巢的促进细胞分裂作用明显高于SKOV３,表现为差异有统计学意义→ (P＜０．０５).③ 通过上述实验研究,其结果充分表明,FSH 组的SKOV３、３AO 细胞的凋亡率明显低于对照组,其差异显著,→ (P＜０．０５).
３ 讨论卵巢癌病因其分子结构过于复杂,一直都是妇科疾病中的一个医学难点, 同时也是国内外医学专家研究的重点.针对卵巢癌这一疑难杂症,在国内传统医学有很多种不同的说法,有持续排卵学说、有遗传学说等.但是,我们已经清楚的认识到卵泡激素———(folliclestimulatinghormone,FSH)是由腺垂体的促性腺细胞分泌的一种重要的女性促性腺激素,也就是我们医学上所称作的卵泡发育所必需的一种激素.FSHR———(folliclestimulatinghormonereＧceptor)是一种靶细胞膜上的促卵泡激素受体,FSH 卵泡激素促进上皮性卵巢癌细胞生长、增殖等机制作用很大程度上依赖于FSHR.FSH 基本上是与FSHR 特异性结合在一起并实时发挥着活性作用.本文关于卵泡刺激素对上皮性卵巢细胞增殖凋亡临床实验效果研究,通过建立了FSH 来作用于SKOV３、３AO 细胞模型,根据实验数据结果表明了,FSH 与FSHR两者均与卵巢癌的增殖凋亡有着密切的关联性.同时,FSH 通过改变或者促进卵巢癌细胞生命周期而实现卵巢癌细胞增殖以及抗凋亡的效果作用,并且在当FSHR 呈阳性时,患者卵巢癌细胞的活动周期及其发生规律更为明显.
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论文作者:路晓琳
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/3/4
标签：卵巢论文; 卵泡论文; 刺激素论文; 癌细胞论文; 细胞论文; 细胞株论文; 凋亡论文; 《中国综合临床》2015年12月供稿论文;