刘光久[1]2001年在《大鼠坐骨神经损伤与再生中神经元GAP-43mRNA表达和蛋白合成的研究》文中认为目的：通过研究周围神经损伤与再生过程中神经元生长相关蛋白（Growth-associated protein，GAP-43）mRNA表达和蛋白质合成的变化规律，为进一步阐明GAP-43mRNA的表达调控机制及该蛋白质在神经再生中的作用提供理论依据。 方法：1.建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤动物模型，术后分别存活1、2、4、7、14、30、60天。动物经主动脉灌注固定后，取脊髓L_4—L_6节段、与坐骨神经相连的背根神经节（L_5、L_6）和坐骨神经纤维进行冰冻切片。2.将切片用原位杂交法检测神经元GAP-43mRNA表达，进行图像分析。3.GAP-43多克隆抗体免疫细胞化学染色后图像分析，观察GAP-43合成的变化规律。4.光镜观察坐骨神经损伤后的再生情况；透射电镜观察神经损伤再生过程中，脊髓腹角、背根神经节和神经纤维的超微结构变化。 结果：1.原位杂交法显示：①正常成年大鼠脊髓和背根神经节中GAP-43mRNA表达阴性。②坐骨神经损伤后2天开始，神经元GAP-43mRNA表达开始增加，脊髓和背根神经节可见少量阳性细胞；伤后4天，GAP-43mRNA表达明显增强；伤后7天，GAP-43mRNA表达达高峰，光镜下清晰可见脊髓腹角大型运动神经元胞浆及突起染成棕黄色，胞核无色，主要表达区域在右侧腹角外侧（板层IX）。背根节感觉神经元胞浆和胞膜呈棕黄色，胞核呈空泡状。伤后14天GAP-43mRNA表达稍下降，③伤后30天，GAP-43mRNA表达明显下降，至伤后60天，GAP-43mRNA已降至正常水平。2.免疫细胞化学染色显示：①正常成年大鼠的脊髓、背根神经节和坐骨神经纤维呈GAP-43阴性。②坐骨神经损伤后4天开始，GAP43合成增加，脊髓灰质呈GAP一3阳性，以背角胶状质处最为明显，白质染色浅淡。背根神经节阳性神经元胞浆呈棕黄色而胞核无色，小神经元免疫阳性反应比大神经元强。伤后7天阳性反应达高峰，伤后14天稍下降，伤后30天显着下降，至伤后60天，GAP－43也降至正常水平。③坐骨神经损伤后一天开始，神经纤维呈GAP＊3阳性并逐渐升高，伤后7天至14天达高峰，伤后30天下降，至伤后60天，神经再生基本完成时转为阴性。3恍镜观察：①坐骨神经钳夹伤后1天，神经轴突完全断裂，神经外膜完整，局部有红细胞浸润。②损伤7天时，远端神经仍可见瓦勒氏变性。③14天，损伤近端可见新生神经纤维。④30天，再·生的神经纤维已长过钳夹处至远测端，新生纤维较细，数量增多。⑤60天，神经再生已基本完成，坐骨神经恢复正常。4．透射电镜观察：坐骨神经损伤后，脊髓腹角大运动神经元粗面内质网减少，游离核糖体增多，线粒体肿胀，高尔基复合体囊泡扩张。背根神经节细胞粗面内质网和游离核糖体移向细胞边缘，胞浆内溶酶体增多，线粒体崎紊乱断裂，卫星细胞肿胀明显，出现空泡。坐骨神经轴突断裂后，远侧端轴突溃变，髓鞘塌陷，变性髓鞘呈“洋葱样”改变，雪旺细胞活跃，胞核增大胞浆增k宽。伤后30天可见新生轴突周围包裹有簿层髓鞘。 结论：1．神经元GAP43mRNA表达受轴突断裂诱导显着升高并与神经元再生状态密切相关。2．GAPA3表达升高，与神经轴突再生过程基本一致，提示GAP＊3调节神经元内部活动，可能对促进神经再生有重要作用。3．GAP43mRNA表达先于蛋白合成，持续时间基本一致，提示活体条件下GAP43mRNA表达受转录水平和转录后调节机制共同调控。4凋围神经损伤后，神经元的超微结构变化与GAP一3mRNA表达和蛋白合成变化相符。
刘光久, 李振强, 殷玉芹, 宋林, 孙建森[2]2002年在《神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究》文中认为目的 研究周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白 (Growth associatedprotein ,GAP 43 )mRNA表达和蛋白质合成的变化规律。方法 建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型 ,用原位杂交和免疫组化技术观察大鼠腰髓和背根神经节的GAP 43mRNA表达和蛋白质合成变化。结果 大鼠坐骨神经损伤后 ,腰髓腹角运动神经元和背根节感觉神经元GAP 43mRNA表达和蛋白质合成增强。结论 周围神经损伤与再生中GAP 43mRNA表达显着增强 ,神经再生完成后表达减弱 ,表明GAP 43在神经再生过程中起重要作用
熊华花[3]2006年在《NGF缓释系统促进大鼠坐骨神经电损伤后再生的研究》文中指出研究背景与总体思路 现已证实，神经生长因子(nerve growth factor，NGF)具有明确的促进周围神经损伤后再生的作用，但在实际应用中，由于NGF活性半衰期较短，在水溶液中易失活，且易受湿度、酸碱度等多种因素的影响，因而限制了其临床应用。为此，寻找合理有效的给药途径及制剂已成为当务之急。 近年来神经电损伤发病率越来越高，其损伤机制较复杂，目前临床无合适有效的治疗方法，多为保守疗法，愈后较差，因而采取积极的治疗手段介入，促进受损神经尽快修复，缩短其功能恢复时间，将具有重要意义。 为此，我们设想：制备一种NGF缓释系统，这种系统能延缓释放NGF，且释放的NGF具有生物活性，将其应用于周围神经电损伤段局部，使其在局部缓慢释放活性NGF，可能在神经再生过程中维持较长时间的作用，促进周围神经再生。 据此，本工作的总体研究思路为： 首先，制备β-NGF缓释系统，用ELISA、DRG培养技术验证该系统能否延缓释放β-NGF，释放的β-NGF是否具有生物活性，并检测该系统中各种成分的作用和必要性。 其次，设计并制备一种稳定的能尽量模拟临床以“真性电损伤”为主的坐骨神经电损伤动物模型，通过光镜、电镜、坐骨神经功能指数、运动神经传导速度等观察其相应的形态、功能学改变，客观评价神经电损伤后的相应变化及再生能力，探讨其影响神经再生能力的可能机制，为下一步的实验研究提供参考。 最后，将β-NGF缓释系统应用于大鼠坐骨神经电损伤段局部，应用
刘光久, 李振强, 殷玉芹, 肖桃元, 宋林[4]2002年在《周围神经损伤诱导的GAP-43 mRNA表达及神经元超微结构变化》文中进行了进一步梳理目的 :研究周围神经损伤与再生过程中神经元GAP 4 3mRNA表达及细胞超微结构变化。方法 :原位杂交组织化学法 ,超薄切片透射电镜观察。结果 :坐骨神经损伤后 ,神经元GAP 4 3mRNA表达增加 ,神经再生完成后表达下降。运动神经元粗面内质网减少 ,游离核糖体增多 ,感觉神经元粗面内质网移向细胞边缘。结论 :神经元GAP 4 3mRNA表达受轴突断裂诱导显着升高 ,并与神经元再生状态密切相关。周围神经损伤后 ,神经元的超微结构变化与GAP 4 3mRNA表达增加相符。
王知非[5]2011年在《BDNF促脊髓前角神经元存活、再生、重塑作用的研究》文中认为目的：本研究通过构建大鼠坐骨神经损伤动物模型,同时给予BDNF抗体中和内源性BDNF,观察内源性BDNF对脊髓前角神经元的影响,探讨内源性BDNF对脊髓前角神经元保护的可能作用机制。方法：通过构建大鼠坐骨神经损伤动物模型,设立假手术组、对照组和实验组,实验组腹腔注射BDNF抗体,对照组腹腔注射等量生理盐水,每周2次。每组取6只大鼠分别于7d和14d处死,采用尼氏体染色、TUNEL染色观察处死的大鼠脊髓前角神经元细胞功能及凋亡的情况,并同时采用Western blot检测大鼠脊髓前角神经元Bax、Bc1-2、 Caspase-3蛋白表达水平的改变,结果：术后7d,尼氏体染色显示假手术组神经元呈正常神经元形态,对照组神经元呈圆形肿胀,尼氏小体减少；实验组大量尼氏体溶解,并可见明显的胞核移位。实验组TUNEL染色阳性神经元数、Bax和Caspase-3蛋白表达水平显着高于对照组(NS)和假手术组(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平显着低于对照组(NS)和假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后14d,假手术组无显着性变化,对照组胞质内可见有空泡变性,但仍可见少量正常的神经元。实验组神经元尼氏体崩解,甚至消失,神经元结构模糊,存活神经元极少。实验组TUNEL染色阳性神经元数增加了35%,显着高于对照组和假手术组(P<0.05)。对照组和实验组Bax和Caspase-3蛋白表达较7d组同时显着增加(P<0.05),且实验组Bcl-2蛋白表达显着低于对照组,Bax和Caspase-3蛋白表达显着高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：BDNF可能参与了坐骨神经损伤后神经元的抗凋亡反应过程,对损伤的神经元有保护作用。目的：通过构建大鼠坐骨神经损伤模型,研究分析BDNF是否可以影响、调节脊髓前角神经元GAP-43、突触素工和SYN的表达,初步探索内源性BDNF促进神经损伤再生与重塑可能的机制。方法：通过构建大鼠坐骨神经损伤动物模型,设立假手术组、对照组和实验组,实验组腹腔注射BDNF抗体,对照组腹腔注射等量生理盐水,每周2次。每组取6只大鼠分别于7d和14d处死,分别采用RT-PCR和Western blot观察脊髓前角神经元内GAP-43、突触素Ⅰ以及SYN RNA及蛋白表达的变化。结果：假手术组大鼠脊髓前角见可见少量GAP-43RNA的表达,但未见GAP-43蛋白表达,对照组可见大量GAP-43、突触素I、SYN RNA及蛋白的表达；实验组脊髓前角内GAP-43、突触素I、SYN RNA及蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05),实验组GAP-43、突触素I、SYN RNA及蛋白表达水平显着高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05),7d与14d的结果一致。对照组损伤14d后GAP-43蛋白表达显着高于7d组(P<0.05)。各组之间脊髓前角神经元突触素工、SYN RNA及蛋白表达水平7d与14d比较无显着性差异(P>0.05)。结论：BDNF可通过影响脊髓前角神经元内GAP-43、突触素工与突触囊泡素(SYN)的合成及磷酸化,有助于受损神经元功能的修复,促进神经元的再生和重塑。目的：通过无血清体外培养胎鼠脊髓前角神经元细胞,研究BDNF对体外培养的脊髓前角神经元的影响。方法：取孕15天的Wistar大鼠,取出大鼠子宫内胚胎,分离脊髓腹侧,制成单细胞悬液,无血清培养。在细胞体外培养7d时,随机将培养的细胞分为实验组BDNF组、BDNF抗体组和对照组,分别在培养液内加入BDNF(终浓度为40ng/ml), BDNF抗体(终浓度30μg/ml)以及等量的PBS液。继续培养5d,利用免疫组化测定NF-200、MAP-2与NSE等神经元特异性标志物对神经元细胞鉴定,并在显微镜下计数存活的神经元细胞数量并观察神经元形态(细胞计数为镜下计数30个视野,取平均值)。采用RT-PCR检测体外培养的神经细胞突触素I.SYN RNA表达水平,采用Western blot对突触素I、SYN、GAP-43、 Akt、磷酸化Akt、bcl-2、caspase-3以及bax蛋白表达水平进行检测。结果：免疫细胞化学结果发现培养的细胞90%以上NF-200、MAP-2与NSE免疫反应呈阳性。显微镜下计数,对照组、BDNF抗体组以及BDNF组存活神经数分别为42.23±3.26、32.32±2.35、49.23±3.12,BDNF组存活细胞数显着高于BDNF抗体组和对照组(P<0.05),对照组细胞数显着高于BDNF抗体组,差异有统计学意义(P<0.05)。形态观察发现与BDNF抗体组相比,对照组以及BDNF组神经元胞体大、丰满,细胞突起明显增粗增多,可见到较粗轴突。RT-PCR和Western blot结果发现BDNF组突触素I、SYN mRNA及蛋白水平显着高于对照组和BDNF抗体组(P<0.05),对照组突触素I、SYN显着高于BDNF抗体组,差异有统计学意义(P<0.05)。叁组之间Akt蛋白表达无显着差异,BDNF组磷酸化Akt、bcl-2蛋白水平显着高于对照组和BDNF抗体组(P<0.05),bax和caspase-3蛋白显着低于对照组和BDNF抗体组(P<0.05),对照组磷酸化Akt、bcl-2蛋白水平显着高于BDNF抗体组,bax和caspase-3蛋白显着低于BDNF抗体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：BDNF一方面能上调体外培养的大鼠脊髓前角神经元内突触素1与SYN的表达,促进神经元突触的发育、成熟,参与突触重建,有利于受损神经元功能的修复。另一方面可通过活化PI3K/Akt信号途径,有效阻止神经元细胞凋亡,促进体外培养脊髓前角神经元的存活。
赵东波[6]2010年在《移植神经远端吻合口再处理后相关神经元GAP-43、Bcl-2和Bax的表达》文中研究表明神经缺损同手内在肌功能恢复、臂丛神经根性撕脱伤一样是至今尚未有效解决的难题。自体神经移植仍是目前临床治疗的首选方法,也是其他研究周围神经缺损治疗方法的“金标准”。移植神经存在经过缺血性改变,易形成瘢痕,再生神经纤维需经过两个吻合口,易使再生神经纤维错长或被阻断在远端吻合口等缺点。除了继发性损害的不断加重,移植的神经同样面临着中枢神经元的再生修复,然而关于移植神经远端吻合口对神经元再生影响的研究,国内外报导较少。本实验在国内外研究的基础上,利用大鼠坐骨神经移植模型,以GAP-43、bcl-2和bax作为观察指标,通过免疫组化、RT-PCR、western-blot以及TUNEL技术,研究二次处理移植神经远端吻合口对感觉和运动神经元再生的影响。实验结果显示:移植神经远端吻合口二次处理后,实验组GAP-43在相应脊髓和背根神经节中再次出现表达高峰,与对照组有明显差异;实验组bcl-2和bax的比值在相应脊髓和背根神经节中的表达再次达到低值,与TUNEL检测相一致,但与对照组相比无统计学意义。本实验可以得出如下结论:通过二次处理移植神经远端吻合口,轴突的延长和重建可被重新诱导,给神经元提供了二次再生的能力;二次处理虽然引起了神经元的再次凋亡,但是影响较小,形态学上观察没有统计学意义。
蒋茂荣[7]2012年在《壳寡糖促外周神经损伤修复及作用机制初探》文中研究表明目的：观察壳寡糖促坐骨神经损伤后修复作用，并探讨其作用机制。第一部分壳寡糖促坐骨神经损伤修复作用的研究方法：1.制备大鼠坐骨神经损伤模型：SD大鼠40只，雌雄各半，行左侧坐骨神经夹伤术。术后，随机分为4组：壳寡糖低、高剂量组（剂量分别为：3、6mg/kg），弥可保组（阳性对照，剂量为：130μg/kg），及对照组（给予等体积的生理盐水）。腹腔注射给药，每天一次，共21天。2.检测大鼠术后4、8、12、16天热刺激撤回反射(WRL)。3.分别于术后8、12、16、20天行足迹实验，计算坐骨神经功能指数（SFI）。4.术后21天，所有大鼠行电生理学检测。记录复合肌动作电位(CMAPs)，计算CMAPs恢复指数（recovery index）。5.术后21天，每组随机选取2只大鼠，处死后取损伤段坐骨神经，固定、包埋和电镜观察再生有髓神经纤维直径和髓鞘厚度。6.术后21天，剩余各组大鼠经灌流固定，取双侧腓肠肌，计算腓肠肌湿重比；损伤侧腓肠肌，进行石蜡包埋、切片，HE染色后测定肌纤维横截面积（CSA）。7.取损伤段坐骨神经，行NF-200免疫组织化学染色，检测再生神经纤维形态和再生神经纤维数。结果：1. WRL结果显示：4组所有大鼠在术后第4天，WRL值之间没有显着性差异（P>0.05）。壳寡糖高剂量组在术后的第8、12天的WRL值显着低于对照组（P<0.05）。2. SFI结果显示：4个实验组的SFI值在术后第8天，没有显着性差异（P>0.05）。壳寡糖低、高剂量组在术后第16、20天的SFI值均显着高于对照组（P<0.05）。3.电生理学检测结果显示：壳寡糖高剂量组的大鼠坐骨神经夹伤处近侧段和远侧段的复合肌动作电位恢复指数均显着高于对照组（P<0.05）。4.腓肠肌湿重比结果显示：壳寡糖高剂量组的大鼠腓肠肌湿重比与对照组相比有显着性差异（P<0.01）。5.肌纤维横截面积结果显示：壳寡糖高剂量组的大鼠腓肠肌肌纤维CSA与对照组相比有显着性差异（P<0.05）。6. NF-200免疫组化结果显示：壳寡糖低、高剂量组大鼠坐骨神经损伤段平均再生神经纤维数显着高于对照组（P<0.01）。7.电镜结果显示：高剂量壳寡糖组大鼠坐骨神经夹伤段再生有髓神经纤维结构致密均匀，板层结构完整、清晰，板层数较多。壳寡糖高剂量组大鼠坐骨神经损伤段再生有髓神经纤维髓鞘平均厚度显着高于对照组（P<0.01）。第二部分壳寡糖促神经损伤修复作用机制的研究（一）壳寡糖促神经元生长的作用方法：1.体外DRG植块培养和DRG神经元分离培养，通过NF-H免疫荧光细胞化学法观察在不同浓度壳寡糖（0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml）作用下植块培养的DRG和分离培养的DRG神经元生长情况。2. Western blot方法检测不同浓度壳寡糖（0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml）对DRG神经元NF-H和GAP43蛋白表达的影响。结果：1. NF免疫组化结果显示：与对照组相比，中、高剂量壳寡糖（0.1mg/ml、0.2mg/ml）可以有效地促进DRG突起的生长（P<0.01）。2.壳寡糖对消化培养的DRG神经元突起生长的作用与其对DRG生长作用相似。与对照组相比，0.2mg/ml剂量壳寡糖可以有效地促进DRG神经元突起的生长（P<0.05）。3. Western blot检测结果显示：与对照组相比，0.2mg/ml高剂量壳寡糖组NF-H和GAP43的表达量显着增加（P<0.05和P<0.01）。（二）壳寡糖对施万细胞活性和增殖的影响方法：1.体外原代培养大鼠施万细胞并纯化，免疫细胞化学荧光染色对细胞进行纯度鉴定。2.采用MTT比色法，检测不同剂量壳寡糖（0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml）分别作用施万细胞24h和48h后，对细胞活力的影响。3.采用Hoechst标记细胞核，分别观察计数不同剂量的壳寡糖（0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml）在不同时间（24h、48h）对细胞生长的影响，绘制生长曲线。4.采用EdU标记和流式细胞仪分析方法，检测壳寡糖对施万细胞增殖的影响。5.通过Western Blot方法，检测壳寡糖作用施万细胞后，对细胞中Cyclin D1、N-Cadherin和β-catenin表达的影响。6.采用RNA干扰技术，进一步验证壳寡糖是否通过N-Cadherin来促进施万细胞的增殖。结果：1. S100免疫荧光细胞化学染色结果显示：培养的原代施万细胞纯度可达90%以上。2. MTT结果显示：与对照组相比，1.0mg/ml壳寡糖作用施万细胞48h后能明显提高细胞活力（P<0.05）。3.生长曲线结果显示：与对照组相比，0.5mg/ml壳寡糖剂量组施万细胞数在48h时明显增多（P<0.05），而1.0mg/ml壳寡糖剂量组施万细胞在作用24h和48h后，细胞数显着高于对照组（P<0.05和P<0.01）。4.流式细胞仪分析结果显示：1.0mg/ml壳寡糖剂量组施万细胞的增殖指数显着高于对照组（P<0.01）。5. EdU标记结果显示：1.0mg/ml壳寡糖剂量组的EdU阳性细胞数的百分比显着高于对照组（P<0.05）。6. Western Blot结果显示：0.5mg/ml和1.0mg/ml壳寡糖剂量组施万细胞的CyclinD1和β-catenin的表达显着高于对照组（P<0.05和P<0.01）；1.0mg/ml壳寡糖剂量组的施万细胞中N-Cadherin的表达明显高于对照组（P<0.05）。7. N-Cadherin siRNA成功转染施万细胞后，N-Cadherin蛋白的表达明显降低（P<0.05）。采用EdU染色检测壳寡糖对被转染后施万细胞增殖的影响，结果显示：N-Cadherin siRNA转染后EdU阳性细胞百分比明显下降（P<0.05）。结果提示，壳寡糖通过N-Cadherin来促进施万细胞的增殖。（叁）壳寡糖促施万细胞成髓鞘的作用方法：1.采用施万细胞与DRG共培养模型，并通过MBP和MAG免疫荧光细胞化学法观察在壳寡糖作用下，对施万细胞成髓鞘的影响。2. Western blot方法检测壳寡糖对DRG与施万细胞共培养中，对髓鞘形成相关蛋白MBP和MAG表达的影响。结果：1. MBP和MAG免疫组化结果显示：壳寡糖可促进施万细胞成髓鞘，壳寡糖组的MBP和MAG免疫阳性的髓鞘节段数高于对照组（P<0.05和P<0.01）。2. Western blot检测结果显示：与对照组相比，0.2mg/ml壳寡糖可明显促进DRG与施万细胞共培养中MBP和MAG的表达（P<0.05和P<0.01）。结论：1.壳寡糖可促进坐骨神经损伤后修复及功能的恢复。2.壳寡糖可促进DRG及其神经元的生长，和NF-H、GAP43的表达。3.壳寡糖能提高施万细胞活力，促进其增殖，并提高细胞中Cyclin D1、N-Cadherin和β-catenin的表达，壳寡糖促施万细胞增殖可能与提高N-Cadherin的表达相关。4.壳寡糖可促进施万细胞成髓鞘。
黄飞[8]2006年在《联合应用NGF和GM1对神经元损伤保护作用的实验研究》文中指出神经生长因子(nerve growth factor,NGF)不仅对正在发育的神经系统中神经元的存活、分化和成熟等方面产生重要影响，而且在动物的整个生命过程中起着广泛的作用。近年来，有许多研究证明，NGF对受刺激或损伤的背根神经节(dorsal root ganglion，DRG)神经元、脊髓神经元结构及功能的可塑性具有影响，NGF能够介导DRG神经元和脊髓神经元的细胞内事件，如神经元突起内线粒体的运输或聚集以及细胞内钙离子浓度的变化等。神经系统受损伤以后NGF的表达增加，这对于神经系统正常结构和功能的维持是必须的。总之，NGF对受损伤的神经元具有保护作用。单涎性神经节苷脂(monosiaganglioside，GM1)在神经系统发育过程中，在含量上具有显着的变化。体内与体外实验皆表明，神经细胞分化过程中伴随着GM1生物合成的改变。神经细胞诱导分化过程中伴有核膜GM1含量的增高。GM1通过影响由多肽生长因子调控的细胞增殖和促成熟过程而调节细胞生长。在DRG神经元突起的发芽和生长过程中，NGF和GM1共同作用介导了这一过程。联合应用NGF和GM1对神经元的保护作用机制目前尚不清楚。因此，本研究将原代分散培养的胎鼠DRG神经元和脊髓神经元，用谷氨酸(2mmol／L)造成神经元损伤，观察联合应用NGF和GM1对体外培养神经元损伤的保护作用，并探讨其作用机制；将成年大鼠坐骨神经造成缺损，使其相应节段的DRG神经元和脊髓前角神经元产生损伤，探讨联合应用NGF和GM1对在体神经元损伤的保护作用。结果表明联合应用NGF和GM1对DRG神经元和脊髓神经元的保护作用效果明显优于单纯应用
朱春雷[9]2009年在《神经移植后再次处理远端吻合口促进神经再生的实验研究》文中进行了进一步梳理周围神经缺损的治疗一直是外科领域尚未解决的难题之一。自体神经移植是目前最有效的修复中、长段周围神经缺损的治疗方法,但是,其疗效与目标之间仍有较大差距。许多学者研究认为:长段神经移植体的血供较差、再生神经纤维的错误长入、靶肌肉长期失神经后的萎缩等原因,是影响疗效的主要因素。然而,关于长段神经移植体远端吻合口是否影响自体神经修复神经缺损疗效的研究至今未见报道。本课题依据周围神经再生的理论提出:在再生神经纤维到达远端吻合口时,对瘢痕愈合的远端吻合口切断、修整、再吻合,将消除远端吻合口瘢痕组织对再生神经纤维通过的影响。对到达远端吻合口的再生神经轴突的切断修整,将刺激相应的感觉和运动神经元再生能力的增强,同时,激活自身的抗凋亡信号通路,促进神经元的存活。研究结果表明:自体神经移植修复神经缺损后,定时对移植体远端吻合口切断、修整、再吻合能够促进神经纤维的再生;能够增强相应的感觉和运动神经元的再生能力:能够激活相应的感觉和运动神经元自身的抗凋亡信号通路,促进神经元的存活。通过本实验研究,明确了远端吻合口对中长段自体神经移植修复神经缺损具有重要影响,明确了瘢痕愈合的远端吻合口切断、修整、再吻合对促进神经再生具有重要作用,为提高自体神经移植修复神经缺损的临床疗效提供了重要的理论依据。
陈龙菊, 李峰, 刘娜, 吴武田, 陈华云[10]2007年在《臂丛损伤再生中GAP-43 mRNA及其蛋白的表达》文中认为目的:分析臂丛损伤后脊髓前角运动神经元表达GAP-43 mRNA及其蛋白的变化规律,探讨神经损伤再生的机制。方法:建立3种臂丛损伤模型:右C7前根撕脱(A组);右C7前根撕脱+同侧C5-T1后根断离(B组);右C7前根撕脱+右C5与C6之间脊髓半横断(C组)。用荧光定量RT-PCR方法检测术后14 d时C7前角GAP-43 mRNA的表达量。用免疫组化方法检测术后1、3、7、14 d脊髓前角GAP-43免疫阳性运动神经元的表达。结果:对照组C7前角GAP-43 mRNA呈低表达,损伤组GAP-43 mRNA表达显着上调。损伤组术后1 d、3 d时均未见C7前角GAP-43免疫阳性神经元,术后7 d各损伤组GAP-43免疫阳性神经元开始出现,14 d时免疫阳性神经元数目达到高峰。3组间比较,C组表达量最高,B组最低,A组居中。结论:臂丛损伤诱导运动神经元GAP-43mRNA及其蛋白表达上调,GAP-43合成增加是神经元蛋白重组所致,与轴索再生和神经功能重建有关。
参考文献：
[1]. 大鼠坐骨神经损伤与再生中神经元GAP-43mRNA表达和蛋白合成的研究[D]. 刘光久. 第叁军医大学. 2001
[2]. 神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究[J]. 刘光久, 李振强, 殷玉芹, 宋林, 孙建森. 第叁军医大学学报. 2002
[3]. NGF缓释系统促进大鼠坐骨神经电损伤后再生的研究[D]. 熊华花. 南昌大学. 2006
[4]. 周围神经损伤诱导的GAP-43 mRNA表达及神经元超微结构变化[J]. 刘光久, 李振强, 殷玉芹, 肖桃元, 宋林. 解剖学杂志. 2002
[5]. BDNF促脊髓前角神经元存活、再生、重塑作用的研究[D]. 王知非. 中南大学. 2011
[6]. 移植神经远端吻合口再处理后相关神经元GAP-43、Bcl-2和Bax的表达[D]. 赵东波. 吉林大学. 2010
[7]. 壳寡糖促外周神经损伤修复及作用机制初探[D]. 蒋茂荣. 苏州大学. 2012
[8]. 联合应用NGF和GM1对神经元损伤保护作用的实验研究[D]. 黄飞. 山东大学. 2006
[9]. 神经移植后再次处理远端吻合口促进神经再生的实验研究[D]. 朱春雷. 吉林大学. 2009
[10]. 臂丛损伤再生中GAP-43 mRNA及其蛋白的表达[J]. 陈龙菊, 李峰, 刘娜, 吴武田, 陈华云. 中国病理生理杂志. 2007