许鸿昌
（许昌市中心医院检验科 河南 许昌 461000）
【摘要】目的：通过三种丙肝抗体检测方法的特异性和灵敏度比较，寻找特异性和灵敏度高的筛查的方法，以减少临床的漏诊和误诊。方法：采用金标法，酶联法，电化学发光法检测79例临床标本，通过检测结果比较方法学的差异。结果：金标法特异性为95.5%灵敏度为93.6%，酶联法特异性为97.0%灵敏度为97.5%，电化学发光法特异性为98.5%灵敏度为100%，结论：电化学发光检测丙肝抗体的特异性、灵敏度明显高于金标法和酶联法，可作为体检、临床输血、术前筛查丙肝抗体的筛查。
【关键词】丙肝抗体；a金标法；酶联法；电化学发光法
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）22-0193-02
丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒引起的一种主要经血液传播的疾病，50%～85%的HCV感染者会进展为慢性肝炎。慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞肝癌。对患者的健康和生命产生危害。我国(HCV)感染率在0.9%～5.1%。[1]HCV感染者自然阴转率低，治疗效果差，病程迁延，未经治疗的丙肝慢性硬化率为50%～85%；肝癌发生率1%～5%。[2]早期诊断和治疗尤为重要。所以丙肝抗体筛查试剂要具有高度的灵敏性和特异性，以减少误诊和漏诊。丙肝的诊断目前主要靠实验室抗HCV抗体检测，HCV-RNA诊断。HCV-RNA需要特殊实验室所以受到很大限制，HCV-RNA定量有较高的特异性和灵敏度，但其标准化和高成本问题尚待解决[3]，不宜作为常规筛查；抗-HCV抗体检测因其操作简单，易于标准化，成为主要的实验室检测方法，目前实验室检测抗-HCV抗体的方法主要有；胶体金免疫层析法(GICA）、酶联法（ELISA)、电化学发光法(ECLI)、化学发光(CL IA）检测法。笔者应用胶体金免疫层析法、酶联法、电化学发光法等方法对丙肝抗体进行了比较，结果报告如下：
1.材料方法：
1.1 检测对象
标本来源：我院2012年10月～2013年12月间4126例门诊及住院患者,抗-HCV阳性标本79例，男性37例，年龄26～80岁，年龄中位数42.3岁，女性42例，年龄27～76岁，年龄中位数52岁，作为阳性组。另选健康体检抗-HCV阴性为正常对照组67例，男29例，女性38例，年龄中位数45岁，丙肝抗体阴性样品67例和79例丙肝抗体阳性结果均以免疫印记(WB)为标准进行确认。
仪器：瑞典MK-III酶标仪,上海科华生物KHB ST-12B型洗板机罗氏电化学发光仪-601
试剂：胶体金试剂-杭州艾康生物，酶联试剂-北京万泰生物，罗氏丙肝配套进口试剂
1.2 实验方法
清晨空腹采集静脉血3ml，静置30min后，3000r/min速率离心10min分离血清,对血清标本分别标号,保存于-20℃待检。
1.3 测试
对血清标号，分别用胶体金免疫层析法，酶联法、电化学发光法法，三种方法对阳性对照组和正常对照组共计146例同时进行了丙肝抗体进行了检测（电化学发光测量值大于0.9为阳性，测量值小于0.9为阴性），仪器操作和结果判断严格按照仪器和试剂说明书进行。
1.4 统计学方法
三种丙肝抗体检测方法比较采用ｘ2检验。
2.结果
2.1 金标法、酶联法、电化学发光三种检测结果及比较见表1，金标法、酶联法检测阳性，电化学发光检测均为阳性，而金标法有5例假阴性、酶联法有2例假阴性，而电化学发光检测无假阴性，本试验结果表明，金标法、酶联法，电化学发光同时检测抗-HCV，敏感性分别为93.6%、97.5%、100%。特异性分别为 95.5%、97.0%、98.5%。电化学发光法特异性和敏感性都明显优于金标和酶联法。
2.2 几种方法检测丙肝抗体结果比较见下表。
表 三种方法丙肝检测结果比较如下
*
2.3 统计学分析
采用是行×列表χ2检验的统计学方法，计算出χ2=33.68，查χ2界值表，得P＜0.05，三种检测方法有统计学意义。
3.讨论
通过几种方法检测丙肝抗体显示电化学发光技术检测法在检测丙肝抗体中具有极高的敏感性100%(79/79))和特异性98.5%(66/67) ，金标法人眼判断结果，易出现假阳性或假阴性，酶联吸附试验只能作为定性实验，还受酶、加样、温度、洗板等多种因素影响，而电化学发光技术法检测丙肝抗体的灵敏性和特异性显著高于ELISA法、胶体金法[4],与ELISA法,金标法有很好的可比性，而且自动化程度高，是一种自动化、定量检测方法，用于临床实验室丙肝的筛查具有一定优势，能够用于丙肝的快速准确的诊断。电化学发光法用于检测丙肝抗体的灵敏度和特异性均优于胶体金免疫层析法和酶联免疫法,显示出很好的应用前景[5]。
电化学发光技术作为新的高灵敏的实验技术，虽然大大提高误诊率，笔者发现当测量值在0.8～1.2时，检测结果有假阳性。检测结果测量值在0.8～1.2时用HCV-RNA确认为阴性。为了更准确的做出丙肝的诊断，需对电化学发光测量值在0.8～1.2样本作进一步的复检确认，同时排除药物干扰和自身免疫病引起的假阳性结果[6]还要综合考虑患者的年龄、病史，以及临床表现，可再用另外一种方法学的试验做复检，复检时应两种方法同时检测，复检均阴性即报告抗-HCV阴性。假如复检结果阳性或一阴一阳，需做补充试验，补充实验选用免疫印迹试验，阴性反应就报告抗-HCV阴性，若补充实验两者均为阳性报告抗-HCV阳性，若不确定就报告抗-HCV不确定。这样大大减少了假阳性的发生，降低了医疗纠纷的可能。对于复检后结果不相吻合的标本可建议患者2～4周后再进行复检，或作HCV-RNA确诊，以防丙肝误诊或漏诊。综上所述电化学发光技术在检测抗-HCV抗体有较好的特异度与灵敏度，可作为体检、临床输血、术前筛查丙肝抗体的筛查和临床研究。
【参考文献】
[1]邢文革，郑怀竞.必须提高丙型肝炎病毒实验室检验结果的可信度.中华肝脏病杂志,2004年3月第12卷第3期170-172.
[2]马文昭.丙型肝炎病毒抗体的检测及临床意义[J].中国现代医生，2008.46（13）：159-159.
[3]魏来，杨瑞峰.丙型肝炎病毒实验室诊断的现状与存在的问题 [J].中华检验医学杂志2008,31（8）：845-848.
[4]张立营,刘国凤,李克峰.电化学发光法检测丙型肝炎病毒的临床应用《肝脏》,2004年06期63-64.
[5]李倩，高学慧等.电化学发光与酶联免疫检测血清甲胎蛋白的比较.中华检验医学杂志，2001年24.期243.
[6]许方，李晓兰，祝琳.丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值 [J].中国实验诊断学，2010，14（5）：713-715.
论文作者:许鸿昌
论文发表刊物:《医药前沿》2016年8月第22期
论文发表时间:2016/8/4
标签：丙肝论文; 电化学论文; 抗体论文; 阳性论文; 阴性论文; 特异性论文; 层析论文; 《医药前沿》2016年8月第22期论文;