魏微1 蓝肇熙1,2 冯麟3（通讯作者）
（1成都中医药大学 610072）
（2成都体育学院运动医学系 610041）
（3成都体育学院附属体育医院 610041）
【摘要】目的 观察黄芪对损伤血瘀证早期TNF-α的影响，判断骨骼肌修复的途径。方法 家兔分为21个组，每组8只，分别观察空白组和大腿内侧定量砸伤后1H、8H、24H、48H、72H、120H、168H造模组、灌药造模组TNF-α的变化。结果 黄芪能有效控制损伤早期TNF-α的增长。结论 补气药黄芪通过降低TNF-α的增长达到修复免疫紊乱，促进损伤面愈合的目的。
【关键词】 黄芪 损伤血瘀证 TNF-α
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）02-0257-02
“损伤血瘀证”是中医血瘀证的一种类型，其症状表现是外伤诱发的局部红肿热痛及瘀血反应。临床实践和实验数据表明活血化瘀药物可以有效减轻瘀血反应，并改善免疫状态[1]。黄芪是中药中最常使用的补益类中药，传统中医药认为黄芪具有补中益气，利水健脾，排脓生肌，解毒消肿等功效，对于损伤早期的影响有待实验证明。
1. 实验方法
1.1 实验对象
将168只家兔标记。将家兔随机分为21个组别，每组8只，分别观察空白组和大腿内侧定量砸伤后1H、8H、24H、48H、72H、120H、168H造模组、灌药造模组的TNF-α。
1.2 动物模型
利用动物剃毛机剔除家兔左后肢大腿内侧中上部的兔毛。“定量化重力击打法”：从PVC管上方下落重锤，重锤初速度为0，打击锤质量250g，打击面积2.5cm2，以重力转化的定量动能直接打击家兔的大腿内群肌肉。
1.3标本采集
家兔心脏采血，与第4肋间缝隙插入家兔心脏，采血5ml，收集的血液静置后离心10min，30×100r/min，用移液枪取上层的黄色清亮液至EP管中，编号后放置在－20℃冰箱中备用。
1.4实验步骤
采用ELISA法测定TNF-α，严格按试剂盒说明书进行操作。
2. 结果
表1 TNF-α变化趋势表
.png)
图1 TNF-α变化趋势图
3.讨论
中医临床中治疗损伤早期的瘀血强调凉血活血，因此一般不适用黄芪等补益药物，然而损伤造成的正气打击往往是损伤迁延的根本原因，如果早期使用黄芪等补气药物很可能先期预防或纠正免疫紊乱，以防治损伤的迁延不愈。
通过观察“损伤血瘀证”TNF-α的变化及黄芪的干预作用，发现早期使用黄芪不但有利于免疫紊乱的纠正，也促进了瘀血和水肿的快速代谢，使用黄芪的灌药造模组在宏观瘀血修复方面的速度远远超过了未干预的造模组。同期的实验亦发现TNF-α在受损细胞凋亡方面存在核心型调控作用，是损伤修复重建的关键性指标，对于启动损伤修复机制及促进损伤细胞发生自体性凋亡起到扳机点的重大意义。肿瘤坏死因子TNF[2]主要由活化的巨噬细胞产生，并且是细胞凋亡的主要外在介质，是自体免疫调节凋亡的主要路径之一，一次冲击型的外伤其背后存在多次免疫紊乱造成渐进式伤害，最终导致中医学所称的“血瘀证”，从而产生局部功能下降及疼痛等不适症状长期不愈。早期从免疫系统角度干预外伤将另辟蹊径，为损伤后的快速修复提供了新的药物路径和值得深入探索的科研空间。
参考文献
[1] 蓝肇熙,李红果,张进陶,等. 桃红四物汤对大鼠损伤血淤证的影响. 华西药学杂志,2008,23(3):286-287.
[2] Chen G, Goeddel DV. TNF-R1 signaling: a beautiful pathway. Science，2002，296(5573):1634-1635.
项目来源：国家自然科学基金损伤血瘀证细胞凋亡、免疫状态变化规律及黄芪对其干预作用研究81072725
论文作者:魏微1,蓝肇熙1,2,冯麟3（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2014年第2期供稿
论文发表时间:2014-4-16