【摘要】目的：建立反相高效液相色谱法测定喉疾灵片中连翘苷的含量。方法：采用AgilentEclipseXDB-C18色谱柱，以乙腈-水（25:75）为流动相；检测波长为277nm；流速1.0ml/min；进样量10μl；柱温25℃。结果：连翘苷在100.7～2014μg/ml范围内有良好的线性关系,r=0.9998(n=6)。连翘苷平均回收率100.47%，RSD为1.0%。结论：本法可用于喉疾灵片连翘的质量控制。
【关键词】含量测定；连翘苷；HPLC
【中图分类号】R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）11-0373-01
本文建立了HPLC法测定喉疾灵片中连翘苷含量，结果表明，供试品在高效液相色谱中分离效果好，阴性样品溶液对测定无干扰，方法简单，准确，重复性好，可用于喉疾灵片中连翘的质量控制。
1.仪器和试药
HP1100高效液相色谱仪HP1100工作站（自动进样，紫外检测器），德国赛多利斯电子天平，BP221S济宁恒通HT300型超声波清洗机，UV-2550紫外可见分光光度计（苏州岛津）连翘苷对照品，其它试剂均为色谱纯。
2.方法和结果
2.1 色谱条件
采用AgilentEclipseXDB-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱，以乙腈（A）-水(B)（25:75）为流动相；检测波长为277nm；流速1.0ml/min；进样量20μl；柱温25℃。理论板数不低于6000。
2.2 溶液的制备
2.2.1供试品溶液制备：取本品10片，除去糖衣，精密称定（5.7558g），研细，转移置具塞锥形瓶中，加70%甲醇50ml，精密称定，超声提取30分钟，放冷至室温，加70%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液备用。
2.2.2对照品溶液制备 精密称取连翘苷对照品适量（20.14mg），置10ml容量瓶中，加70%甲醇适量，超声使溶解，用70%甲醇稀释至刻度，作为对照品贮备液。
2.2.3空白溶液制备 按喉疾灵片的处方、制法项下不加连翘粉末，制备阴性样品，按2.2.1供试品溶液制备的方法制备空白对照溶液,精取除连翘粉末外的其它药物和辅料，按2.2.1项下方法制成空白对照溶液,按上述色谱条件进样，图谱见图1。
A-对照品 B-样品 C-空白对照
图1 HPLC色谱图
2.3 回收率实验
精密称取已知含量的样品（广东罗浮山国药股份有限公司批号：L151134含量：连翘苷9.1811mg/g，6份，分别置50ml容量瓶中，加70%乙醇溶液适量，超声40分钟，放置室温，分别精密加入对照品溶液：连翘苷对照溶液（1.07μg/ml）1.6ml、1.6ml、2.0ml、2.0ml、2.4ml、2.4ml，摇匀，滤过，精密吸取5ml置20ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜滤过，进样10μl，结果连翘苷平均回收率为100.47%，RSD为1.0%（n=6），结果见表1。
2.4 样品含量测定
取本品10片，除去包衣，精密称定（5.7558g），研细，转移至150ml具塞锥形瓶中，按2.2.1项下的方法制备供试品溶液。精密称取连翘苷对照品（20.14mg）置20ml容量瓶中，加70%甲醇适量，超声使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，按上述色谱条件，进样10μl，按峰面积外标法测定6个厂家10批样品中连翘苷的含量，结果见表2。
表2 样品含量测定结果
3.讨论
3.1 测定波长的选择
分别取对照品溶液A、B、C稀释到一定的浓度，照紫外分光光度法，在200～700nm波长范围内扫描，结果连翘苷的最大吸收波长分别是：228nm，235nm，277nm，为了达到更好的准确性，故将测定波长确定为277nm。
3.2 用拟定的方法对10批市售样品检验
结果表明，很多药品中的连翘苷含量都较低（连翘原料药以干燥品计连翘苷不低于0.15%[5]，折算到喉疾灵片理论上含连翘苷不低于5.2845mg/片），而且不同厂家之间的差异较大，可见对现行质量标准的升级对人们的安全、合理和有效用药大有裨益。
表1 回收率实验测定结果
【参考文献】
[1]中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂）第十四册1997：174.
[2]俞永梅，张平.HPLC-DAD法测定喉疾灵胶囊中连翘苷的含量[J].中国药师，2012年08期.
[3]张玉洁，黄海欣.HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量[J].华西药学杂志.2005(04).
[4]金永新，要林青，杨晓冬，杨春兰.RP-HPLC法同时测定复方鱼腥草片中绿原酸、连翘苷、黄芩苷的含量[J].中国药师.2004(07).
[5]国药典委员会.中华人民共和国药典2015年版（一部）[M].中国医药科技出版社，2015：170.
论文作者:徐占方
论文发表刊物:《医药前沿》2017年4月第11期
论文发表时间:2017/5/3
标签：连翘论文; 溶液论文; 含量论文; 色谱论文; 精密论文; 甲醇论文; 样品论文; 《医药前沿》2017年4月第11期论文;