广东湛江中心人民医院检验科 广东湛江 524037
血小板数量是血液检查中的一个常规指标，因仪器法快速、重复性好、准确性高、多参数等特点而在大小医院得到普遍使用，但在使用中发现一些特殊因素会影响它的准确性，其中一些体积与血小板大小相近的颗粒如小红细胞、细胞碎片、真菌、免疫复合物等就会影响血小板计数的准确性，血小板直方图也相应出现异常。MCV（红细胞平均体积）和RDW（红细胞体积分布宽度）是两个反映红细胞体积的参数，MCV主要用于贫血的分类，RDW反映红细胞体积异质性的参数，RDW升高（正常参考范围：11-16%）表示RBC大小不均[1]，贫血病人如果MCV<80fl（正常参考范围80-94fl）属于小红细胞性贫血。日本Sysmex XE-2100型全自动血细胞分析仪采用电阻法及流式细胞激光技术两种方法来测定血小板。本文比较SYSMEX XE-2100血细胞分析仪两种血小板计数方法的准确性。
1 材料与方法
1．1 材料
1.1.1 仪器 日本sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪。
1.1.2 试剂 稀释剂、校准物、溶血剂、质控品、清洗剂均为Sysmex公司原装配套产品。血小板计数使用Olympus双目显微镜。EDTA-K 2真空抗凝管由上海科华公司生产。草酸铵血小板稀释液按《全国临床检验操作规程》第三版的要求配制。
1．1.3 标本来源 20例MCV正常标本及52例小红细胞性贫血标本均来自本院就诊病人，其中男42例，女30例，年龄8～68岁。受检者早晨空腹，抽血2mL置EDTA-K2真空抗凝管，混匀，室温放置，所有检测均在采集标本后2h内完成。
1．2 方法
1．2.1 仪器定期保养，性能稳定，质控在控，仪器操作严格按说明书进行。电阻抗法（PLT-I）、激光法（PLT—O）均以自动模式进样。PLT手工计数法（PLT—M）计数由两个经验丰富的工作人员按双盲法进行计数，取均值，具体操作按《全国临床检验操作规程》第三版的要求进行。
1.2.2 分别采集20例MCV正常（94fl≥MCV≥80fl）标本和52例MCV<80fl的标本进行电阻抗法（PLT-I）、激光法（PLT—O）、PLT手工法计数血小板。
1.2.3 对其中18例血小板直方图正常组（血小板曲线拟合回归）和34例血小板直方图异常组（血小板曲线不拟合回归）两组标本进行电阻抗法（PLT-I）、激光法（PLT—O）和手工计数法（PLT-M）计数血小板。
1.2.4 统计学处理 所有数据采用SPSS1 10软件进行统计分析，配对资料差异比较用卡方检验。
2 结果
2.1 表1结果显示，MCV、RDW正常组标本电阻抗法、激光法与手工法血小板计 数结果
之间比较差异无统计学意义（P>0.05），MCV<80fl及RDW>16%组（血小板直方图异常）标本电阻抗法与手工计数法比较差异有统计学意义（P<0.05），激光法与手工法比较差异无统计学意义（P>0.05）；MCV<80fl及RDW<16%组（血小板直方图正常）标本电阻抗法、激光法与手工计数法比较差异均无统计学意义（P>0.05）。
直方图正常组：血小板曲线拟合线回归 直方图异常组组：血小板曲线拟合线不回归 ▲：与PLT-M比较 p＜0.05，▲▲：与PLT-M比较 p＞0.05
3 讨论
sysmex XE一2100全自动血细胞分析仪计数血小板有电阻抗法和激光法两种方法，可根据需要分别选择使用，激光法使用成本较电阻法高，检测速度稍慢。电阻法使用RBC／PLT通道，采用液路聚焦鞘流／DC检测法，避免了细胞并行而产生血小板重叠的脉冲信号，重复性好，同时给出直方图报告。激光法使用专用的RET／PLT—O通道，通过半导体激光和流式细胞仪流式细胞技术，主要通过检测血小板DNA和RNA的染色强度来进行计数血小板，同时得出光学法散射图。激光法对血小板的形态鉴别能力强，是染色后通过激光辨认的，可排除小红细胞、细胞碎片等的干扰【2-3】，而电阻法计数血小板常受到上述因素干扰，造成结果假性增高。
本文实验结果显示．MCV、RDW正常组标本电阻抗法、激光法与手工法血小板计数结果一致，而MCV<80fl及RDW>16%组（血小板直方图异常）标本电阻抗法与手工计数法比较差异有统计学意义（P<0.05），激光法与手工法比较差异无统计学意义（P>0.05）；MCV<80fl及RDW≤16%组（血小板直方图正常）标本电阻抗法、激光法与手工计数法比较差异均无统计学意义（P>0.05）。造成以上结果主要因为PLT—I法采用电阻抗原理计数．无法区分血小板与小红细胞、红细胞碎片等，造成血小板假性升高。当上述干扰血小板计数的因素存在时会造成血小板直方图尾部曲线不能回归X轴，实验结果也显示该类标本血小板计数假性增高。另外对于MCV<80fl及RDW<16%组的标本，因红细胞体积虽然小，但RDW值不高，血小板曲线回归X轴，说明小红细胞没有对PLT计数造成影响，所以此类标本血小板计数PLT-O法、PLT-I法均与PLT-M法结果一致。
参考文献：
[1]朱忠勇．准确计数血小板方法学研究进展[J]．国外医学•临床生物化学与检验学分册，2004，23（3）：131—132．
[2]张翠玲，马晓露，王贞，等．血细胞分析仪计数血小板结果异常的原因及纠正[J]．大连医科大学学报，2009，31（6）：710—713．
[3]李果，高兵，彭政，等．光学法计数在低值血小板检测中的研究应用[J]．临床血液学杂志，2009，22（4）：189—190
[4]邢 辉，吴健民． EDTA-K2依赖性血小板假性减少症分析[J]．临床检验杂志，2004，22（4）：227-228．
论文作者:黄胜,梁华英
论文发表刊物:《健康世界》2015年30期供稿
论文发表时间:2016/4/15
标签：血小板论文; 标本论文; 直方图论文; 电阻论文; 激光论文; 细胞论文; 统计学论文; 《健康世界》2015年30期供稿论文;