合江县人民医院检验科 四川泸州 646200
肿瘤标志物，一般指在肿瘤的发生和增殖过程中，肿瘤细胞和机体作用所产生的物质，其可以体现肿瘤的存在和状态。该类物质包括蛋白质、激素、酶等类群，在对于肿瘤的诊断、筛查、预后判断等应用中具有极高的价值。而肿瘤标记物的免疫分析通常是指将抗原与抗体进行免疫结合并进行分析。一般所检测的抗原为体内的激素、酶、小分子多肽等物质。目前在血清肿瘤标志物的检测中常应用的几种免疫分析法为：酶联免疫分析方法、表面增强的激光解析/电离化飞行时间质谱、放射免疫分析法、化学发光免疫分析技术等。
1、酶联免疫分析（ELISA）
免疫酶技术就是将酶催化反应和抗原与抗体的免疫反应进行结合并分析的技术。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆通常的方法是在抗体分子上连接酶分子，之后采用夹心法免疫反应，使基质水解进而显色，之后可使用酶标仪检测，间接反应其含量。该方法可以在细胞或者亚细胞水平上对抗原或抗体部位进行示踪，定量至微克、以至纳克水平。
2、表面增强的激光解析/电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）
SELDI-TOF-MS是蛋白质研究技术常用方法之一，该方法主要是由亲合作用，将蛋白质与芯片的化学或生物位点结合，应用激光脉冲使芯片中的分析物电离，因不同蛋白质的分子量和其所带电荷迥异，因而在仪器场中的飞行时长不同，因此所得的质谱图不同，经软件分析处理后可制成不同的谱图，进而显示蛋白的分子量和含量等数据。
3化学发光免疫分析
发光免疫分析通常是指将免疫反应和发光分析相结合的一种分析技术。该法的灵敏度高、线性范围宽、无需外来光源，且其分析速度较快、设备简单。其主要包含下述三种方法：（1）免疫化学发光分析（CLIA）；（2）化学发光酶免疫分析（CLEIA）。（3）电化学发光免疫分析（ECLIA）。
4放射免疫分析（RIA）
RIA是化学发光法和免疫分析法结合的技术，是利用特异抗体与标记抗原的竞争结合反应，通过测定放射性复合物来计算出非标记抗原量的一种超微量分析技术，将检测限由毫克、微克级提高到纳克、皮克级的水平。在RIA反应系统中，标记抗原、未标记抗原和特异性抗体三者同时存在时，两种抗原互相竞争结合抗体的能力相同，形成标记抗原-抗体和未标记抗原-抗体复合物，标记抗原-抗体复合物形成量与抗原之间呈在一定的函数关系，从而计算出抗原的量。
5流式荧光技术
流式荧光技术是将免疫学、分子生物学、激光检测技术、高分子化学、微流体技术和计算机等先进技术结合而建立起的高通量技术平台，利用细胞大小的塑料颗粒作为载体，以流式细胞术作检测平台，可在较短时间内对核酸、多肽、小分子蛋白质等进行快速检测。主要特点：（1）高通量：仅需微量样本（10μl），可同时检测多个指标；（2）反应时间短，速度快：可达10000测试/h，在35～60min内完成；（3）低成本：流式荧光联检试剂用量少，有效降低检测成本；（4）灵敏度高：低限可至2pg/ml；（5）具有很高的准确性和重复性；（6）线性范围广：检测范围达6个数量级；（7）反应条件比较温和，有利于探针和被检测物的充分反应，大多数反应不需洗涤，反应过程接近天然状态。
6时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）
TRFIA是近年发展起来的无环境污染的高灵敏度免疫标记检测技术，是用镧系元素作为示踪物标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞，与其螯合剂和增强液在待反应体系发生反应后，用时间分辨荧光仪测定最后产物中的荧光强度，荧光强度与待测物的浓度相关，根据荧光强度和相对荧光强度比值，通过计算机数据处理系统可以给出待测物的浓度，达到定量分析的目的。TRFIA通过时间延迟，去除非特异性荧光干扰，解决了自然背景干扰问题，明显提高检测灵敏度。通过激发光与发射光之间较大的位移，明显排除非特异性荧光的干扰，提高了光谱的分辨率，使特异性明显增强。此外，还具有测定范围更宽，试剂寿命长，操作简便和非放射性等特点。
论文作者:何丽
论文发表刊物:《健康世界》2019年6期
论文发表时间:2019/7/22
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