颜雯雯 张红 张涛 高小洁 贾勇（通讯作者）
（四川省资阳市疾病预防控制中心 四川 资阳 641300）
【摘要】目的：探究金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征。方法：选择时间段为2011—2017年我市的金黄色葡萄球菌58株食物中毒株遗传特征进行分析。研究遗传表现，采用MLST检测技术研究金黄色葡萄球菌的分子结构类型，利用ABCDE分析检测试剂盒完成对金黄色葡萄球菌以及葡萄球菌肠毒素的分离。进行药敏试验，研究金黄色葡萄球菌的耐药以及药敏特性。结果：检测金黄色葡萄球菌食物中毒株敏感度、耐药性、抗生药物使用特点，了解到金黄色葡萄球菌在食物中毒中发生频率较高，其它葡萄球菌株所占的比重较小。结论：对金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征进行溯源分析，对找准药敏性高的药物有很大的帮助。
【关键词】金黄色葡萄球菌；食物中毒；遗传特征
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）20-0355-02
金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的常见毒素之一，这类毒素的理化性质稳定，在水溶液中和盐溶液中可以稳定存在。人体内的胃蛋白酶、胃酸和胰蛋白酶也不能将金黄色葡萄球菌完全降解。金黄色葡萄球菌是引起食物中毒中的常见致病菌，细菌侵入人体后，会产生多少毒素，危害人们的健康。金黄色葡萄球菌入侵人们都肠道之后，可以在低营养的环境下进行生存，期间对人体造成持续伤害。引发金黄色葡萄球菌入侵因素主要是食物中毒，据食品检测报告显示，食品中金黄色葡萄球菌检出率很高，远远大于它引发的中毒事件。本文研究2011年—2017年我市发生的58株金黄色葡萄球菌，通过MLST分型分析菌株耐药性以前产毒特点，进而推测金黄色葡萄球菌在食物中的分布状态及其耐药特征。为了更好的对金黄色球葡萄菌耐药状况进行监测，需要了解菌株的遗产特征[1]。
1.材料准备和检测方法
1.1 菌株准备
将58例菌株进行分离。
1.2 仪器试剂准备
准备仪器和试剂，包括Crystal-SpecTM比浊计，鉴定肉汤管，药敏肉汤管，亚碲酸钾卵黄增菌液金，黄色葡萄球菌肠毒素，ABCDE分型检测试剂盒，溶葡萄球菌酶基因提取试剂盒的等[2]。
1.3 检测方法
药敏实验和细菌复苏鉴定是较为常见的检测方式，检测期间会用到单菌落接种营养平板、鉴定肉汤管。将培养后的菌株制成菌悬液，将鉴定肉汤管进行震荡摇匀，滴入AST药敏指示剂，利用鉴定系统化验检测菌株的药物敏感性，确保操作规范度，保证鉴定精度。检测葡萄球菌的内酰胺酶活性成分。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
进行药品实验时，选择实验药物，完成对菌株的鉴定和检测。对葡萄球肠菌进行检测和分型，选择合适的营养平板，将培养温度控制在37℃，当菌株分泌完金黄色葡萄球菌以后，提取菌液、进行离心分离操作，检测菌株毒性，规范操作试剂盒，辨析450nm波长下测定样品的吸光度[3]。
2.结果
研究金黄色葡萄球菌的耐药性，检测药物包括替考拉宁、利奈唑烷、硝基呋喃妥因、利福平和万古霉素等抗生素，金黄色葡萄球菌对这类药物的耐药性较强，敏感菌株为46（79.31%）株。分析金黄色葡萄球菌对抗生素的敏感度，研究甲氧西林对金黄色葡萄球菌的作用效果，敏感菌株为50（86.21%）株、耐药菌株为8（13.79%）株、环丙沙星敏感敏感54（93.10%）、耐药4（6.90%，），氨苄青霉素敏感56（96.55%）、耐药2（3.45%）。
肠毒素检测，对肠毒素检测数据做出分析，确定葡萄球菌类型，计算比例。共有16株葡萄球菌中检测出了葡萄球菌肠毒素，其中包含了金黄色葡萄球菌毒素14株。
MLST分子分型，58株金黄色葡萄球菌中包含了14个ST型，ST5以及ST398是所有菌株引发食物中毒概率最高的菌种。针对实验数据对中毒事件进行分析，了解到金黄色葡萄球菌在中毒事件中占有较大的比重，其它葡萄球菌株所占的比重较小。
3.讨论
MLST分子分型方法适用于金黄色葡萄球菌的检测，帮我检测管家基因的方式，完成对碱基序列的分类。分析序列的组成，包括aroe、arcc、gmk、pta、yqii、tpi、glpf。监测期间，设立目标菌株，研究管家基因序列、分析基因的变异性差异，研究基因长度和变异位点，记录信息数据库中的基因信息。找准基因位点，了解这些数据库中的引物对管家基因的影响，分析PCR扩增现象。了解ST型基因的变化现象，将研究资料进行提取，完成对数据信息的比对分析，作出对金黄色葡萄球菌珠的遗传性判断。MLST这一检测方式检测周期较长，需要对多项数据信息进行核验矫正。因此MLST检验方式适用于检验范围大的、检测周期长对疾病调查。调查数据信息时，需要研究菌株的起源和进化，分析菌株的爆发特点以及分子结构，研究实验数据，完成菌株溯源。解析金黄色葡萄球菌的实验数据以及遗传信息。
观察MLST菌株型别的同时，还需要分析金黄色葡萄球菌的耐药特征，分析耐药状况，药物敏感性。对食物中毒事件进行分析，可以判定较多的食物中毒事件主要由金黄色葡萄球菌引起，少数中毒事件责由其它类型的菌株影响，所以在对中毒事件进行分析时，则需要对爆发菌株对分子类型做出分析。之后对菌株进行溯源识别，进而完成对金黄色葡萄球菌的溯源分析以及特征识别，分析菌株对繁衍状况以及遗传特征，完成对污染责任区域的划分。
【参考文献】
[1]吕国平,李亚子,郭玉梅,等.金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征分析[J].中国病原生物学杂志, 2018(2).
[2]王冰,扈庆华,张锦周,等.深圳市食物中毒来源金黄色葡萄球菌的分子流行病学分析[J].中国热带医学,2015,15(2):151-154.
[3]朱海明,陈秋霞,杨冰,等.一起食物中毒事件金黄色葡萄球菌肠毒素及肠毒素基因检测与分析[J].华南预防医学,2015(6):583-586.
作者简介：颜雯雯（1985-），女，汉族，本科，主管技师，研究方向:微生物检验.
通讯作者：贾勇（1964-）,男，汉族,本科,主任技师.
论文作者:颜雯雯,张红,张涛,高小洁,贾勇（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2018年7月第20期
论文发表时间:2018/7/31
标签：葡萄球菌论文; 金黄色论文; 菌株论文; 食物中毒论文; 毒素论文; 基因论文; 特征论文; 《医药前沿》2018年7月第20期论文;