金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征分析论文_颜雯雯,张红,张涛,高小洁,贾勇(通讯作者)

金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征分析论文_颜雯雯,张红,张涛,高小洁,贾勇(通讯作者)

颜雯雯 张红 张涛 高小洁 贾勇(通讯作者)

(四川省资阳市疾病预防控制中心 四川 资阳 641300)

【摘要】目的:探究金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征。方法:选择时间段为2011—2017年我市的金黄色葡萄球菌58株食物中毒株遗传特征进行分析。研究遗传表现,采用MLST检测技术研究金黄色葡萄球菌的分子结构类型,利用ABCDE分析检测试剂盒完成对金黄色葡萄球菌以及葡萄球菌肠毒素的分离。进行药敏试验,研究金黄色葡萄球菌的耐药以及药敏特性。结果:检测金黄色葡萄球菌食物中毒株敏感度、耐药性、抗生药物使用特点,了解到金黄色葡萄球菌在食物中毒中发生频率较高,其它葡萄球菌株所占的比重较小。结论:对金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征进行溯源分析,对找准药敏性高的药物有很大的帮助。

【关键词】金黄色葡萄球菌;食物中毒;遗传特征

【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)20-0355-02

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的常见毒素之一,这类毒素的理化性质稳定,在水溶液中和盐溶液中可以稳定存在。人体内的胃蛋白酶、胃酸和胰蛋白酶也不能将金黄色葡萄球菌完全降解。金黄色葡萄球菌是引起食物中毒中的常见致病菌,细菌侵入人体后,会产生多少毒素,危害人们的健康。金黄色葡萄球菌入侵人们都肠道之后,可以在低营养的环境下进行生存,期间对人体造成持续伤害。引发金黄色葡萄球菌入侵因素主要是食物中毒,据食品检测报告显示,食品中金黄色葡萄球菌检出率很高,远远大于它引发的中毒事件。本文研究2011年—2017年我市发生的58株金黄色葡萄球菌,通过MLST分型分析菌株耐药性以前产毒特点,进而推测金黄色葡萄球菌在食物中的分布状态及其耐药特征。为了更好的对金黄色球葡萄菌耐药状况进行监测,需要了解菌株的遗产特征[1]。

1.材料准备和检测方法

1.1 菌株准备

将58例菌株进行分离。

1.2 仪器试剂准备

准备仪器和试剂,包括Crystal-SpecTM比浊计,鉴定肉汤管,药敏肉汤管,亚碲酸钾卵黄增菌液金,黄色葡萄球菌肠毒素,ABCDE分型检测试剂盒,溶葡萄球菌酶基因提取试剂盒的等[2]。

1.3 检测方法

药敏实验和细菌复苏鉴定是较为常见的检测方式,检测期间会用到单菌落接种营养平板、鉴定肉汤管。将培养后的菌株制成菌悬液,将鉴定肉汤管进行震荡摇匀,滴入AST药敏指示剂,利用鉴定系统化验检测菌株的药物敏感性,确保操作规范度,保证鉴定精度。检测葡萄球菌的内酰胺酶活性成分。

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进行药品实验时,选择实验药物,完成对菌株的鉴定和检测。对葡萄球肠菌进行检测和分型,选择合适的营养平板,将培养温度控制在37℃,当菌株分泌完金黄色葡萄球菌以后,提取菌液、进行离心分离操作,检测菌株毒性,规范操作试剂盒,辨析450nm波长下测定样品的吸光度[3]。

2.结果

研究金黄色葡萄球菌的耐药性,检测药物包括替考拉宁、利奈唑烷、硝基呋喃妥因、利福平和万古霉素等抗生素,金黄色葡萄球菌对这类药物的耐药性较强,敏感菌株为46(79.31%)株。分析金黄色葡萄球菌对抗生素的敏感度,研究甲氧西林对金黄色葡萄球菌的作用效果,敏感菌株为50(86.21%)株、耐药菌株为8(13.79%)株、环丙沙星敏感敏感54(93.10%)、耐药4(6.90%,),氨苄青霉素敏感56(96.55%)、耐药2(3.45%)。

肠毒素检测,对肠毒素检测数据做出分析,确定葡萄球菌类型,计算比例。共有16株葡萄球菌中检测出了葡萄球菌肠毒素,其中包含了金黄色葡萄球菌毒素14株。

MLST分子分型,58株金黄色葡萄球菌中包含了14个ST型,ST5以及ST398是所有菌株引发食物中毒概率最高的菌种。针对实验数据对中毒事件进行分析,了解到金黄色葡萄球菌在中毒事件中占有较大的比重,其它葡萄球菌株所占的比重较小。

3.讨论

MLST分子分型方法适用于金黄色葡萄球菌的检测,帮我检测管家基因的方式,完成对碱基序列的分类。分析序列的组成,包括aroe、arcc、gmk、pta、yqii、tpi、glpf。监测期间,设立目标菌株,研究管家基因序列、分析基因的变异性差异,研究基因长度和变异位点,记录信息数据库中的基因信息。找准基因位点,了解这些数据库中的引物对管家基因的影响,分析PCR扩增现象。了解ST型基因的变化现象,将研究资料进行提取,完成对数据信息的比对分析,作出对金黄色葡萄球菌珠的遗传性判断。MLST这一检测方式检测周期较长,需要对多项数据信息进行核验矫正。因此MLST检验方式适用于检验范围大的、检测周期长对疾病调查。调查数据信息时,需要研究菌株的起源和进化,分析菌株的爆发特点以及分子结构,研究实验数据,完成菌株溯源。解析金黄色葡萄球菌的实验数据以及遗传信息。

观察MLST菌株型别的同时,还需要分析金黄色葡萄球菌的耐药特征,分析耐药状况,药物敏感性。对食物中毒事件进行分析,可以判定较多的食物中毒事件主要由金黄色葡萄球菌引起,少数中毒事件责由其它类型的菌株影响,所以在对中毒事件进行分析时,则需要对爆发菌株对分子类型做出分析。之后对菌株进行溯源识别,进而完成对金黄色葡萄球菌的溯源分析以及特征识别,分析菌株对繁衍状况以及遗传特征,完成对污染责任区域的划分。

【参考文献】

[1]吕国平,李亚子,郭玉梅,等.金黄色葡萄球菌食物中毒株遗传特征分析[J].中国病原生物学杂志, 2018(2).

[2]王冰,扈庆华,张锦周,等.深圳市食物中毒来源金黄色葡萄球菌的分子流行病学分析[J].中国热带医学,2015,15(2):151-154.

[3]朱海明,陈秋霞,杨冰,等.一起食物中毒事件金黄色葡萄球菌肠毒素及肠毒素基因检测与分析[J].华南预防医学,2015(6):583-586.

作者简介:颜雯雯(1985-),女,汉族,本科,主管技师,研究方向:微生物检验.

通讯作者:贾勇(1964-),男,汉族,本科,主任技师.

论文作者:颜雯雯,张红,张涛,高小洁,贾勇(通讯作者)

论文发表刊物:《医药前沿》2018年7月第20期

论文发表时间:2018/7/31

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