HBsAg检测的胶体金法与ELISA法效果比较论文_曾仕彩

(广东省阳江市中医医院 广东 阳江 529500)

【摘要】 目的:探究HBsAg检测的胶体金法与ELISA法的效果。方法:选取自2013年2月至2014年4月我院收治的438例患者,采用ELISA法检测HBsAg阳性标本,根据S/OD值,将其分为A、B、C、D四组,对两种检测方法的效果进行对比分析。结果:采用ELISA法检测438例HBsAg阳性标本,其中A组(1.0≤S/OD≤6.9)38例,胶体金法法检测出3例,检出率为7.89%;B组(6.9<S/OD≤12.8)40例;C组(12.8<S/OD≤25.0)350例,D组(>25.0)10例,胶体金法均全部检测出,两组方法检测A组的结果比较,差异具有统计学意义,即P<0.05。结论:ELISA法比胶体金法检测HBsAg的灵敏度高,且具有较高特异性,由于胶体金法容易造成漏检,因此ELISA法比胶体金法更适用于临床检测HBsAg。

【关键词】 HBsAg检测;胶体金法;ELISA法

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)36-0141-02

目前临床检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的主要方法就是胶体金法以及ELISA法。莱瓦认为ELISA法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)具有灵敏性以及特异性高的效果[1]。为了进一步探究胶体金法与ELISA法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的效果,本研究选取自2013年2月至2014年4月我院收治的438例HBsAg阳性患者进行研究,现具体报道如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取自2013年2月至2014年4月我院收治的438例HBsAg阳性患者,其中男237例,女201例,年龄8~78岁,平均年龄(47.51±6.89)岁。

1.2 方法

1.2.1胶体金法

选用检测试纸条(英科新创(厦门)科技有限公司),以试剂使用说明书为标准对其进行严格操作,具体操作如下:取出检测试纸条,粘贴于不干胶记录纸上相应位置,水平放置并作好标记。用加样器或一次性采血管取60μL新鲜全血(或血清、血浆)缓慢滴加于试纸箭头下方的垫片上。

1.2.2 ELISA法

选用ELISA检测试剂盒(珠海丽珠试剂股份有限公司),以实验室全面质量管理要求以及试剂说明书为标准对其严格进行操作,具体操作如下:根据检验要求,选择一定量的包被板条固定于板架。加入25μL样品稀释液于反应孔中。每次检验设置3个阴性对照孔、2个阳性对照孔,加阴性、阳性对照各75μL;设1个空白对照孔,不加样品。其余孔加入75μL待测样品,振荡混匀。在37℃下将反应板用封板膜密封孵育60min;空白对照孔不加酶标记物,其余孔加入50μL酶标记物,振荡混匀;在37℃下将反应板用封板膜密封孵育30min。用蒸馏水将30mL浓缩洗液稀释20倍至600mL;使用新波EGATE—2310洗板机对其进行6次洗涤后拍干;每孔加入50μL底物缓冲液,再加入50μL底物液,振荡混匀,在37℃下孵育30min;每孔加入50μL终止液,轻拍混匀,采用空白孔调零将酶标仪设定在450nm处。并对各孔吸光度光度值进行测定。

1.3 判定标准

胶体金标法:为防止弱阳标本的漏检,需于加样后10min对显示结果进行观察并记录。当检测区、质控区各呈现一条紫红色反应线,则判定为阳性;若仅在质控区内呈现一条紫红色反应线,则判定为阴性;质控区没有紫红色反应线,只有检测区呈现一条反应线,则判定为无效[2]。ELISA法:临界值为阴性对照平均光度值加0.09,在计算中如果阴性对照孔LD值小于0.05,则按0.05计算。待测样品的光度值则为S;当样品的S/光度值(OD)大于等于1.0时,则判定为阳性;反之则判定为阴性[3]。

1.4 统计学分析

研究所有数据均采用SPSS16.0统计软件进行数据统计,计量资料用(x-±s)进行表示,采用t进行检验,技术资料用%表示,采用χ2进行检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。

2.结果

两种方法检测438例HBsAg阳性标本结果比较,数据分析见表1。

3.讨论

胶体金法具有一定的结合物免疫以及生物学特性,因此被广泛应用到组织学、病理学以及细胞生物学等领域。但是就目前来看,胶体金法存在一定的漏检风险以及假阳性比例增多等缺点[4]。ELISA法具有较高的灵敏性和特异性,能够检测抗原和抗体的部位,并对其进行定量,从而能够有效地检测HBsAg。

本研究结果表明,A组(1.0≤S/OD≤6.9)38例,胶体金法法检测出3例,检出率为7.89%;B组(6.9<S/OD≤12.8)40例;C组(12.8<S/OD≤25.0)350例,D组(>25.0)10例,胶体金法均全部检测出,两组方法检测A组的结果比较,差异具有统计学意义,即P<0.05。

综上所述,由于胶体金法容易造成漏检,因此ELISA法比胶体金法更适用于临床检测HBsAg。而ELISA法具有较高的灵敏度以及特异性,应在临床检测HBsAg中广泛应用。

【参考文献】

[1] 尤金兰.HBsAg胶体金法与ELISA法对比分析[J].中国误诊学杂志,2012,12(4):827.

[2] 王晓娟,易有峰.ELISA法与胶体金法检测血清HBsAg的比较[J].中国肝脏病杂志:电子版,2010,2(2):30—31.

[3] 郁玲.HBsAg胶体金与ELISA法在献血者体检的应用比较[J].求医问药:学术版,2012,10(5):494.

[4] 李江.胶体金法与ELISA法测HBsAg结果分析[J].按摩与康复医学旬刊,2010,1(17):120—121.

论文作者:曾仕彩

论文发表刊物:《医药前沿》2015年12月第36期

论文发表时间:2016/5/9

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