1遵义医学院免疫学教研室 贵州 遵义 563000 2遵义医学院医学与科技学院2011级美容专业 贵州 遵义563099
基金项目：本文受国家自然科学基金地区项目（81460249）资助。
作者简介:李姗姗(1990年－)，女，主要从事感染免疫学的研究
通讯作者及指导教师:罗军敏(1970 年－)，女，教授，硕士生导师，主要从事感染免疫学的研究
【摘要】 目的：探讨结核性胸膜炎外周血和胸水中CCL16的表达水平及其临床意义。方法：收集30例住院收治的结核性胸膜炎患者(入院、规则治疗7-10天)和30例细菌性肺炎并发胸腔积液患者的外周血及胸水，另选30例健康体检人员为正常对照组。采用ELISA检测各组血清及胸水中CCL16的含量。用ROC曲线确定CCL16在结核性胸膜炎诊断中的的最佳临界值。结果：结核性胸膜炎组血清中CCL16的含量高于正常对照组和细菌性肺炎并发胸腔积液组（P<0.05）；结核性胸膜炎组胸水中CCL16的含量高于细菌性肺炎并发胸腔积液组（P<0.05）；结核性胸膜炎组患者在规则治疗7-10天后，血清和胸水中CCL6的含量均下降（P<0.05）。CCL16血清诊断结核性胸膜炎价值分析结果显示：其ROC曲线下面积为0.813，灵敏度为53.0%，特异度为100%，最佳临界值为3.88pg/ml。结论：CCL16可能参与了结核性胸膜炎的发病机制，在抗结核治疗过程中CCL16的表达受到了影响。ROC曲线所得到的CCL16的界限值可作为结核性胸膜炎的辅助诊断指标。
【关键词】 CCL16；结核性胸膜炎
【中图分类号】R491.48【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)09-0284-01
结核性胸膜炎是结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）及其代谢产物进入人体的胸膜腔所引起的炎症反应，属于4型结核病[1]。炎症反应使胸膜血管通透性增高，富含蛋白质和特异性白细胞的液体聚积在胸膜腔，产生结核性胸腔积液（Tubereulous pleuralesion，TPE）[2]。结核性胸膜炎患者治疗不彻底和诊断延误都会导致病情进一步发展, 形成胸膜肥厚粘连、包裹性积液，导致限制性肺功能下降, 从而影响患者的生活质量[3]，为此需要加强对结核性胸膜炎的发病机制及过程的研究。有研究发现，趋化因子在结核性胸膜炎中有着一定的作用。趋化因子是一类小分子细胞因子，能使细胞发生趋化运动，主要参与白细胞投递和依赖过程，如免疫监视、先天性和过继性的免疫应答以及各种形式的病理性炎症[4]。有研究发现，肺结核患者CCL16水平显著高于结核菌素试验阳性者，且与肺部病灶范围有较高的相关性，因此猜测CCL16可能与结核免疫发病关系密切。为此，本研究拟检测结核性胸膜炎患者血清和胸腔积液CCL16表达水平，初步探讨CCL16在结核性胸膜炎发病、治疗及诊断方面的意义。
1 对象和方法
1.1 研究对象 选取在遵义医学院附属医院呼吸内科住院治疗的结核性胸膜炎患者30例。纳入标准：①临床结合辅助检查诊断为结核性胸膜炎伴或不伴肺结核；②有中等至大量胸腔积液；③初治，临床上抗结核四联化疗；④不合并其他肺外结核，半年内未接受免疫增强剂或免疫抑制剂治疗，无心、肝、肺、肾等严重并发症，无干扰素过敏史。其中男性22例，女性8例，年龄18-65岁，平均年龄（42.1513.27）岁。选择同期在遵义医学院附属医院呼吸内科住院治疗的30例细菌性肺炎并类肺炎性胸腔积液，其中男性19例，女性11例，年龄23-68岁，平均年龄（44.3612.65）岁。选择同期在遵义医学院附属医院体检科体检健康者30例，其中男性20例，女性10例，年龄20-65岁，平均年龄（43.6711.84）岁。三组研究对象年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义，具有可比性。本文涉及的所有实验都经过患者或家属同意，并签署知情同意书。
1.2 仪器与试剂 CCL16用双抗体夹心法进行检测。ELISA 检测试剂盒购置于美国eBioscience公司。严格按照试剂盒说明书进行操作。每次实验均做标准曲线，细胞因子单位为pg/mL。
1.3 实验方法 所有结核性胸膜炎患者均接受正规抗结核化疗（抗结核治疗：按卫生部规定的四联抗结核化疗：异烟肼、利福平、砒嗪酰胺、乙胺丁醇），于入院时和规则治疗7-10天抽取清晨空腹静脉血5mL和胸水10ml；细菌性胸膜炎患者入院时清晨空腹静脉血5mL和胸水10mL；体检健康者清晨空腹静脉血5mL。将所有标本1000rpm，10min，离心后收集胸水上清和血清，-20℃保存备测。
1.4 统计学分析 应用SPSS11.0软件进行统计学处理, 数据采用均数±标准差（±s）表示，两组之间差异比较采用t检验, 多组差异比较采用F检验。P<0.05为差异有统计学意义。应用受试者工作特征曲线（receiver perating characteristic curve，ROC），以总体诊断符合率最大为标准，确定诊断临界值，计算灵敏度和特异度。
2 结果
2.1结核性胸膜炎组、细菌性胸腔积液组及体检健康者组血清和胸水中CCL16的水平 结核性胸膜炎组血清中CCL16的含量高于正常对照组和细菌性胸腔积液组(P<0.05)；结核性胸膜炎组胸水中CCL16的含量高于细菌性胸腔积液组(P<0.05)。经规则治疗后，结核性胸膜炎组血清和胸水中CCL16含量明显下降（P<0.05）；结核性胸膜炎组血清中CCL16含量仍明显高于正常对照组和细菌性胸腔积液组（P<0.05）；治疗前后血清中CCL16含量均明显高于胸水中含量（P<0.05）（表1，2）。
3 讨论
结核性胸膜炎是临床常见疾病，由MTB引起的结核菌高度变态反应产生的胸膜炎症，可发生于任何年龄，其中儿童和青壮年最常见。结核性胸膜炎是常见的肺外结核，主要表现为胸腔积液，常见的临床表现为胸痛、伴有干咳、全身不适、潮热、盗汗、消瘦等结核中毒症状。结核性胸膜炎会造成胸膜肥厚黏连、限制性肺功能下降[5], 为此加强对结核性胸膜炎的发病机制及过程的研究显得尤为重要。
当患者感染MTB时，趋化因子在其中起到了一定的作用。趋化因子可以促进淋巴细胞、单核巨噬细胞、粒细胞至炎症部位并对结核发生免疫反应。趋化因子根据靠近分子氨基端(N端)的前两个C间是否插入其它氨基酸，将它们分为4个亚类：CXC类，CC类，CX3C类和C类。研究发现，用MTB气道吸入感染CC趋化因子受体(CCR)敲除的老鼠，Thl型细胞因子的产生及肉芽肿形成减少，导致了CCR敲除的老鼠过早死亡，提示CC类趋化因子在结核免疫中具有显著作用。Sectt HM等发现，结核病患者的支气管肺泡灌洗液中的MCP-1，CCL5，CCL7，CCLl2，CXCL8和CXCLl0显著高于未感染结核病的对照组。研究发现，肺结核患者CCL16水平显著高于结核菌素试验阳性者，且与肺部病灶范围有较高的相关性，因此，CCL16与结核免疫发病关系密切。
本研究还发现了入院时和正规治疗7-10天后结核性胸膜炎组血清和胸水中CCL16的含量变化，发现结核性胸膜炎组患者接受正规治疗后,血清和胸水中CCL16的含量均逐渐下降, 提示CCL16不仅参与了结核性胸膜炎的发病过程, 且与其病程、炎症发展及治疗效果密切相关。通过对CCL16血清诊断结核性胸膜炎价值进行分析发现：其ROC曲线下面积为0.813，说明具有诊断价值；最佳临界值为3.88pg/ml，灵敏度为53.0%，特异度为100%，提示CCL16对结核性胸膜炎具有一定的临床诊断价值。但目前关于CCL16在结核性胸膜炎中的作用研究还较少, 许多确切的调控机制等问题都有待于更深入的探讨，在后续的研究中，可加大标本量延长治疗时间并检测在不同治疗时间点CCL16的含量变化，深入探讨CCL16在结核性胸膜炎中是否可以作为早期诊断及观察治疗效果的分子学免疫指标，并探讨其相关机制。
参考文献：
1.JoEK,ParkJK,DockrellHM.Dynamics of cytokine generation in patients with active pulmonary tuberculosis [J].CurrOpin Infect Dis, 2003,16:205-210.
2.Ellner JJ,Bames PF,Wallis RS,et al. The immunology of tuberculous pleurisy[J]. Semin Respir Infect,1988,3(4):335-342.
3.陈建军. 胸腔内注射尿激酶治疗结核性胸膜炎疗效观察[J]. 蚌埠医学院学报, 2009,34(2):146-147.
4.Charo IF, Ransohoff RM. The many roles of chemokines and chemokine receptors in inflammation[J]. N Engl J Med, 2006,354(6):610-621.
5.杨凤,白云,胡建军,等.结核性渗出性胸膜炎患者胸膜增厚对肺功能的影响[ J] .河北医药,2008,30(5):612.
论文作者:李姗姗1 张钰1 易婷2 绍云皓1 朱杰华1 罗军敏1
论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年9月
论文发表时间:2016/11/2
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