【摘要】 目的:观察分析负性共刺激分子在慢性乙肝患者外周血Treg的表达特性.方法:选择我院收治的２３例慢性乙肝患者及２３例健康体检者作为本次观察对象,对两组观察对象采用ELISA 检测方式对其e抗原等血清标志、肝功能、外周血淋巴细胞等进行检验,观察两组观察对象之间的差异及其表达特性. 结果:对照组健康体检者与实验组慢性乙肝患者之间对比的观察指标存在显著差异(p＜０．０５),统计学有意义;PD－L１在慢性乙肝患者Treg中的表达相对于健康人群有所上调,但与HBVDNA 无相关性.结论:慢性乙肝患者外周血Treg数量的增加与肝损伤指标呈现正相关性. 【关键词】 负性共刺激分子;慢性乙肝;外周血Treg;特性NegativetotalstimulusmoleculesinperipheralbloodinpatientswithchronichepatitisbTregexpressioncharacteristicsanditsclinicalvalue CuiZhoongFengLiGeLiYangying WangXueXia (１Zhengzhousixthpeople??shospitalclinicallaboratory４５００００China;２．PingdingshancoalgroupoftwelveminehospitalcliniＧcallaboratory ４６７０１３China)【Abstract】Objective:ToinvestigatetheexpressionprofileanalysisofnegativecostimulatorymoleculesinTreginperipheralbloodofpatientswithchronichepatitis．Methods:２３patientsadmittedtoourhospitalwithchronichepatitisBpatientsand２３healthyvolunteersastheobjectofthisobservation,thetwogroupsobservedobjectdetectedbyELISAapproachtotheireantigenandotherserum markersofliverfunction,peripheralbloodlymphocytestest,differenceswereobＧservedbetweentheobservedobjectandExpression．Results:IncontrolgroupandtheexperimentalgrouphealthycontrastbetweentheobservedindicatorsofchroＧnichepatitisBpatientsweresignificantlydifferent(p＜０．０５),statisticallysignificant;PD－L１expressioninTreginpatientswithchronichepatitisBwithrespecttohealthypeoplehaveraised,butnocorrelationwithHBVDNA．Conclusion:ChronichepatitisBpatientswithperipheralTregincreaseinthenumberofliverinjuＧryind【iKcaetyorwsorsdhso】wapositivecorrelation． Negativecostimulationmolecule;ChronichepatitisB;PeripheralbloodTreg;Characteristics 【中图分类号】R５１２．６【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－００１７－０１
慢性乙肝即慢性乙型病毒性肝炎,主要是指由于乙型肝炎病毒持续感染所引起的疾病,随着人们生活习惯及环境的变化,慢性乙肝的发病率呈现逐年增长的趋势,在乙型肝炎病毒感染过程中,T 淋巴细胞作为主要效应细胞,直接参与病毒的清除工作[１].我院为了分析负性共刺激分子在慢性乙肝患者外周血Treg的表达特性及临床意义,针对收治的慢性乙肝患者及健康体检者进行了各项检测,报告如下.
１ 资料和方法
１．１ 临床资料 选择我院收治的２３例慢性乙肝患者及２３例健康体检者作为本次观察对象,收治时间及体检时间为２０１４年２月至２０１５年５月,将２３例健康体检者作为对照组,男女比例为１２∶１１,年龄均分布在２８至６８岁之间,年龄均值为(４８．５２±３．６１)岁;将２３例慢性乙肝患者作为实验组,男性患者与女性患者的比例为１３∶１０,年龄均分布在２５至６５岁之间,年龄均值为(４７．６３±３．５４)岁.对两组观察对象的临床资料进行均衡性检验后发现,统计学无意义(p＞０．０５),可对比.
１．２ 方法 采用酶联免疫吸附测定法对乙型肝炎血清学标志主要包括乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗体及乙型肝炎表面抗体等进行检测,采用罗氏全自动生化分析仪检测肝功能,采用荧光定量PCR法对患者HBVDNA 进行检测.取两组观察对象４毫升新鲜外周血, 采用PBS进行稀释、混匀,先将淋巴细胞分离液按照稀释后的全血１∶２的比例加入到离心管内,将稀释后的全血缓慢加入至淋巴细胞分离液上方,离心分离２０分钟,采用无菌吸管将呈白色雾状的淋巴细胞层吸出放置于另一无菌离心管内,将１０毫升PBS稀释液加入后进行混匀,离心后弃去上清,将细胞弹起成细胞悬液,再加入５毫升PBS混匀再洗涤一次,最后加入０．５毫升PBS进行细胞计数. １．３ 观察指标 观察两组观察对象之间的差异及其表达特性.
１．４ 统计学处理 采用SPSS２０．０软件对两组观察对象的观察指标进行统计学处理.计数资料采用X２ 检验,计量资料采用t检验,P＜０．０５代表统计学具有意义. ２ 结果两组观察对象之间对比的CD４＋CD２５＋Foxp３＋Treg占CD４＋T 细胞的比例存在显著差异(p＜０．０５),统计学有意义;具体结果如表１所示:
３ 讨论
慢性乙肝患者外周血细胞毒性T 细胞活性受到损伤,降低了抗病毒细胞因子的水平(可能由于表面抗原及e抗原的大量表达使得T 细胞出现免疫耐受[２],慢性乙肝患者对细胞毒性T细胞的负性调控分子大量表达,使得抗病毒能力下降),机体Treg细胞的升高,明显抑制了细胞毒性T 细胞的增殖[３].Treg细胞是免疫系统中一类有着负性调控作用的T 细胞亚群,在维持机体自身免疫耐受及抑制自身免疫疾病发展中具有极为重要的地位,Treg细胞参与HBV 持续感染,其数量的增高可能对机体抗病毒免疫应答产生抑制作用[４],利于感染的慢性化.若出现Foxp３ 基因突变或缺失现象,Treg 表面CD２５、CTLA－４及GITR等表达出现下调,降低了其抑制功能,且会伴随自身免疫性疾病出现,由此可见,Foxp３对Treg发育及免疫抑制功能有着较为重要的调控作用.Treg细胞减少能增加动脉粥样硬化的机率,加重局部损伤炎症的反应, 慢性肝炎患者外周血中的表达明显升高.本次观察的结果数据中可以得出, 慢性乙肝患者CD４＋CD２５＋Foxp３＋Treg数量明显高于健康人群,这说明了Treg可能对乙型肝炎慢性化具有较为重要的临床意义.且Treg数量的增加导致其对HBV 特异性CTL的免疫抑制作用增强,使得HBV 持续感染并出现恶化,但观察得出,Treg数量与HBVDNA 载量并无相关性,这说明了乙肝病毒的数量及抗原的释放量对Treg数量不是唯一的影响因素,CD４＋CD２５＋Foxp３＋Treg数量的增多,促进了免疫抑制功能.综上所述,本次观察分析了负性共刺激分子在慢性乙肝患者外周血Treg 的表达特性及临床意义. 参考文献[１] 王爱珍,彭国平．慢性乙肝患者外周血Treg/Th１７及相关细胞因子的变化[J]．中国现代医生,２０１３,５１(４):１０８－１１０． [２] 邓茜,肖影群,邹正宇等．慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后CD４＋CD２５＋Foxp３＋调节性T 细胞的变化[J]．广东医学,２０１２,３３(１７):２５９２[ －２５９５． ３] 庄鹏,王湘郴,罗国辉等．慢性乙肝患者外周血CD４＋CD２５＋FOXP３＋Tregs及HBV 抗原特异性CTLs的检测和分析[J]．中国病理生理杂志,[ ２０１１,２７(９):１７８６－１７８９． ４] 余灵祥,李志伟,张培瑞等．Treg细胞在慢性乙肝患者外周血中的表达及其对DC 细胞的抑制作用[J]．现代生物医学进展,２０１５,１５(１１):２０５３－２０５５．
论文作者:崔中锋１ 李格１ 李洋莹１ 王雪侠２
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/2/26
标签：细胞论文; 乙型肝炎论文; 乙肝患者论文; 外周血论文; 淋巴细胞论文; 统计学论文; 对象论文; 《中国综合临床》2015年12月供稿论文;