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【摘 要】目的：探究六味地黄丸中主要有效成分是丹皮酚和马钱苷溶出度的测定方式；方法：主要采用小杯法。首先将0.2L的人工胃液物质作为溶出介质，选用HPLC方式来标定六味地黄丸中有效物质的溶出度；结果：实验结果表明马钱苷和丹皮酚的成分在4.05-36.26μg/mL 和 3.03-27.19μg/L 范围内呈现出良好的线性关系。结论：这种方法比较简单，并且实验数据准确度高，是一种理想的测定六味地黄丸有效成分的方式，值得进行推广。
【关键词】高效液相色谱法；六味地黄丸；溶出度
六味地黄丸顾名思义，其主要成分是六味中药材，包括熟地黄、山药、茱萸和茯苓以及牡丹皮，并且是六味地黄这味药方制剂的主要形式。对于药品来说，其溶出度直接决定其在人体内的吸收情况，所以溶出度测定是一种非常可靠的体外实验方法，通过这种方式可以很好地模拟药物在体内的溶出和吸收情况，充分反映药物的疗效。所以目前来看，针对六味地黄丸这种药物进行溶出度测试对于其疗效的确定有着很重要的意义，并且也给品控工作提供有效依据。
一、仪器与试药
相关仪器主要包括：十万分之一电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；高效液相色谱仪（瑞士步骑仪器有限公司）；高效液相色谱仪工作站（浙江智达N2000工作站）；色谱柱（HypersilC18）；智能溶出试验仪（天津天大天发科技有限公司）；双光束紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。相关试药包括了：六味地黄丸（北京同仁堂）；丹皮酚对照品的（中国药品生物制品检定提供）；马钱苷对照品（中国药品生物制品检定提供）；色谱纯为乙腈。
二、试验方法和试验结果
（一）色谱条件与溶液制备
0.05%的膦酸溶液为流动相A，流动相B为乙腈，梯度的洗脱标准为0-15min，86%A；15-40min，50%A；色谱柱温度与体积流量分别为25℃和1.0mL/min；DAD二极管列阵检测器检测的马钱苷与丹皮酚波长分别为234nm和274nm。去对照品与样品溶液进行出液进样，结果显示，两个成分同其他成分的分离效果较好，且理论的塔板数要大于3000。在溶液制备方面，首先，是对照品溶液，称取丹皮酚对照品4mg和马钱苷对照品3mg，将其置于容量为100ml的量瓶当中，向其中加入甲醇溶解，并加水稀释至量瓶刻度，将其摇匀，得到对照品储备液]。其次，是供试品溶液，以200ml、0.1mol/l的烟酸溶液作为释放介质（转速100r/min），相应的温度为（37.0±0.5）℃，分别间隔一定时间进行取样，取样标准为单次5mL，并以0.45um微孔滤膜对所取样品进行过滤，待过滤结束后，取续滤液作为供试品溶液。
表1 丹皮酚与马钱苷线性关系测定结果
三、试验结果
（一）关于精密度和稳定性的实验
在精密度实验中，我们已经得到了确定的结果：六味地黄丸中两种有效成分，丹皮酚的相对标准偏差为0.67%、马钱苷的相对标准偏差为1.11%。在稳定性试验过程始终，选取已经溶出4h的六味地黄丸溶液，将其在多个时间点测定其进样情况，最终结果表明，丹皮酚的相对标准偏差为0.96%、马钱苷的相对标准偏差为1.99%。
（二）加样回收实验与结果
对峰面积进行测定，以回归方程为依据，对其中丹皮酚和马钱苷的量和回收率进行计算，相关结果如表2和表3所示。
表2 丹皮酚加样回收实验结果（n=5）
表3 马钱苷加样回收实验结果（n=5）
其次是关于含量和溶出度之间的测试。试验首先区六味地黄丸样品共计8粒、5份来进行试验，在操作方式中，选择供试品溶液配置的方式来进行，并且在多个时间点来进行取样，每次取样5ml，在过滤工具上选用0.45μm的滤孔膜，之后在滤液中补充溶出介质，继续取20μl滤液，之后测定其峰值的总面积，通过这样的方式来算出药物的浓度。使用具体算法来将其进行换算，得出不同时间内的溶出比例，进而算出其中的平均值。回收实验的结果总结为表4。
表4 样品溶出度
从表1中我们可以知道，丹皮酚和马钱苷之间的现行关系上，其质量浓度和和峰面积的关联性较强，其相关系数都已经超过了0.9990，和1非常接近。在样品回收试验中，丹皮酚的回收率大约为99.5%，马钱苷的回收率大约为98.5%，相对标准偏差也控制在2.以下，分别是1.5和1.8；其溶出度会随着时间的变化而变化，丹皮酚在274mm处吸收最为明显，马钱苷在234mm处吸收最为明显，并且丹皮酚的溶出度也在4-36μg/l之间，而马钱苷的溶出度在3-27μg/l之间，线性关系比较明显。
三、结论
本文选用HPLC的方式来测试六味地黄丸的溶出度，在试验过程中，将其中的两项有效成分，即马钱苷和丹皮酚作为主要指标，来检测六味地黄丸的溶出度。根据实验结果的总结我们可以发现，这两个成分具有较好的分离效果，并且试验方式比较简单，实验结果具有较强的复现性，所以可以认为其具有较高的稳定度，可以作为一种质量控制方式加以推广。
参考文献
[1]李春兰, 王建强, 陈辉生. 高效液相色谱法测定六味地黄丸的溶出度[J]. 中国战略新兴产业, 2017(16).
[2]白昱旸, 陈强, 梁丽娜,等. 祛风及开窍类引经药对六味地黄丸有效成分眼内分布的影响[J]. 中国中医眼科杂志, 2017, 27(3):141-145.
[3]赵唐娟, 陈娟, 师彦平. 超声细胞粉碎萃取结合超高效液相色谱用于六味地黄丸的整体分析[J]. 色谱, 2017, 35(1):32-46.
[4]叶英响, 冯超, 翁夏蒙,等. 六味地黄丸粉体粒径与其破壁率和溶出度的相关性研究[J]. 中草药, 2016, 47(12):2108-2112.
[5]萧红, 徐国钧, 金蓉鸾,等. 基于多指标成分同时检测的六味地黄浓缩丸溶出度测定[J]. 中国中药杂志, 1988, 13(10).
论文作者:郎咸明
论文发表刊物:《世界复合医学》2017年第9期
论文发表时间:2018/1/30
标签：地黄丸论文; 溶液论文; 丹皮论文; 色谱论文; 高效论文; 方式论文; 偏差论文; 《世界复合医学》2017年第9期论文;