王璐
（靖江市中医院 江苏 泰州 214500）
【摘要】 目的：分析探讨活血药、益气活血药对肿瘤生长转移过程中调节性T细胞介导的免疫逃逸影响。方法：本文选择了对小鼠肺癌肺转移干预作用较大的活血药和益气活血药（苏木和苏木黄芪），全程记录小鼠自肿瘤接种到死亡的全过程，动态观察肿瘤生长不同时间点小鼠的体重、瘤重、荷瘤小鼠脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞表达、肺转移等，并记录其生存期。结果：调节性T细胞具有独特的免疫抑制作用，在肿瘤的免疫逃逸中发挥着十分重要的角色，能影响机体的抗肿瘤免疫应答及肿瘤的发生发展及转归。结论：活血药、益气活血药对机体调节性T细胞具有一定的调节作用，能改善机体的免疫耐受状态，逆转免疫逃逸现象。
【关键词】 益气活血药；活血药；调节性T细胞；肿瘤
【中图分类号】R25 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）11-0323-02
活血化瘀法常用于治疗肿瘤，治疗恶性肿瘤常用活血药，很多研究者认为活血药用于治疗恶性肿瘤大有裨益，但也有部分学者认为活血药会促进肿瘤发生转移[1]。益气活血药与单纯的活血药相比可以降低CD4+ CD25+调节性T细胞表达。CD4+ CD25+Treg是近年来发现的具有免疫无能和免疫抑制作用的细胞群，是健康个体细胞库的组成成分。有学者认为肿瘤的免疫逃逸与CD4+ CD25+Treg引起的免疫抑制和免疫耐受具有一定相关性[2]。本文选择了活血药和益气活血药（苏木和苏木黄茂），研究苏木、苏木黄茂对小鼠肺癌生长转移的干预作用，成效不错，现报告如下。
1.资料和方法
1.1 材料
本文选择了清洁级C57BL/6小鼠，皆为雄性，周龄为6至8周，体重为20g±2g。
1.2 药物
给予小鼠丹参浸膏，每克含生药1.78克；苏木浸膏，每克含生药4.5克；水蛙粉，每克含生药1克；黄茂浸膏，每克含生药2.56克；注射用环磷酞胺粉针。
1.3 细胞株
Lewis肺癌荷瘤鼠。
1.4 方法[1-2]
1.4.1动物模型复制 取传代第12天的Lewis肺癌荷瘤小鼠，剥离瘤组织，选取生长良好的肿瘤组织，制备肺癌细胞悬液，每只小鼠右腋皮下接种0.2毫升。
1.4.2分组及给药 对小鼠进行接种后，随机分成荷瘤对照组、苏木组、苏木+黄芪组3组，各组的给药方法及给药量详见表1。
表1 3组的给药方法及给药量
1.5 观察指标
对小鼠的体重、瘤重、抑瘤率、荷瘤小鼠脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞表达等进行动态观察，给药至小鼠死亡，记录生存天数。
1.6 统计学方法
对上述各组数据进行分类和汇总处理，运用统计学软件SPSS19.0进行数据处理。计量资料用平均数加减标准差表示，并采用t检验，计数资料采取率用卡方检验。
2.结果
①随着荷瘤天数的增加，3个小组小鼠的体重均呈下降趋势，且在荷瘤晚期两个中药组小鼠的体重都高于对照组小鼠的体重，但各组比较无显著性差异，P>0.05。②无论在哪个时间，两个中药组小鼠的瘤重均低于对照组。经观察发现，比较第6天3个组小鼠的瘤重，苏木组与荷瘤对照组相比，差异显著，P<0.05，有统计学意义；比较第10天3个组小鼠的瘤重，苏木+黄芪组与荷瘤对照组相比存在显著性差异，P<0.05，有统计学意义。③此外，随着荷瘤天数的增加，3个实验组小鼠的抑瘤率总体上体现为下降趋势。④随着荷瘤天数的增加，对照组小鼠的脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞百分比体现为上升趋势，而其余两个中药组小鼠在肿瘤病程中其脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞百分比都存在降低阶段，其中苏木组的降低阶段为接种后的第10到15天这一阶段，苏木组+黄芪组降低阶段为接种后第10到20天这一阶段。接种后的第20天比较小鼠的脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞百分比，苏木+黄芪组显著低于苏木组和荷瘤对照组，P<0.05，有统计学意义。
3.讨论
通过动物实验发现，由于和正常小鼠的脾脏细胞CD4+ CD25+Foxp3+数量相比，Lewis肺癌移植鼠显著升高，故有利于肿瘤耐受的形成，同时免疫系统对肿瘤的免疫应答也被降低，从而促进了肿瘤的发生和发展。对于有关CD4+ CD25+Foxp3+细胞表达在荷瘤小鼠自然病程中的变化报道虽不多，但大量的临床实验表明随着实体瘤病期的发生和发展CD4+ CD25+Foxp3+细胞数量呈增加趋势。本文的实验研究以动态观察为特色，结果表明苏木、苏木-黄芪在肿瘤发展的不同阶段对荷瘤小鼠的体重、抑瘤率、肺转移抑制率等方面显示出不同的特点。在肿瘤早期，活血药苏木具有较强的抑瘤作用，而益气活血药苏木-黄芪在提高肺转移抑制率及延长生存期方面的作用均优于苏木。随着荷瘤天数的增加，3个实验组的抑瘤率总体呈下降趋势，两个中药组在肿瘤早期，当瘤负荷较小时其抑瘤作用更加显著，两中药组在各观察时间点对小鼠体重都没有明显的影响。随荷瘤天数的增加，3个小组小鼠的体重均呈下降趋势，且在荷瘤晚期两个中药组小鼠的体重都高于对照组小鼠的体重，但各组比较无显著性差异。
随着荷瘤天数的增加，对照组小鼠的脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞百分比体现为上升趋势，而其余两个中药组小鼠在肿瘤病程中其脾CD4+ CD25+Foxp3+细胞百分比都存在降低阶段。以上结果表明，中药可通过调控荷瘤小鼠脾细胞中Treg表达而改善其体内的免疫耐受状态，益气活血药苏木黄芪的作用比其单纯的活血药成分更好。
【参考文献】
[1]刘声,杨国旺,韩冬等.益气活血药对肿瘤转移中Treg/Th17细胞漂移所致免疫编辑重塑的调控研究[J]. 中华中医药杂志, 2014,29(6):1822-1826.
[2]樊敏,霍介格等.调节性T细胞与肿瘤免疫逃逸相关性及中医药治疗研究进展[J]. 浙江中医药大学学报, 2013,37(6):826-829.
论文作者:王璐
论文发表刊物:《医药前沿》2016年4月第11期
论文发表时间:2016/5/19
标签：苏木论文; 小鼠论文; 肿瘤论文; 细胞论文; 免疫论文; 黄芪论文; 体重论文; 《医药前沿》2016年4月第11期论文;