李星洁
（河南省安阳市中医院 河南 安阳 455000）
【摘要】 目的：建立HPLC法测定熄风通络胶囊中天麻素的含量。方法：色谱柱采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6×25mm，5μm)，以乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）为流动相，检测波长为220nm。结果：天麻素进样量在0.05～1.25μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.8%，RSD=1.48%(n=5)。结论：该方法简便、准确、专属性强，可作为控制熄风通络胶囊质量的方法。
【关键词】 HPLC；熄风通络胶囊；天麻素；含量测定
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）05-0391-02
熄风通络胶囊系安阳市中医院协定处方.参照《中国药典》2010年版一部“天麻”与“天舒胶囊”项下[含量测定]方法，采用高效液相色谱法建立含量测定的方法如下。
1.仪器与试药
1.1 仪器
SY-5100型高效液相色谱仪，BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6×25mm，5μm)，ANASTAR色谱工作站（天津奥特赛恩斯仪器有限公司），赛多利斯BT125D分析天平，KQ-50B型超声波提取器。
1.2试药
天麻素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110807-201306，供含量测定用）；熄风通络胶囊（安阳市中医院生产、提供，批号：20120601、20120602、20120603）；乙腈、磷酸（色谱纯）；乙醇（分析纯）；纯化水。
2.方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6×25mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）；检测波长：220nm；进样量：10μl；流速：1.0ml/min；柱温：室温。按本品控制指标天麻素峰计算理论板数，应不得低于5000。
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2.2 对照品溶液的制备
取天麻素对照品（批号：110807-201306）适量，精密称定，加乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）制成每1ml含50μg天麻素的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取熄风通络胶囊（批号：20120601）20粒内容物，研细，取约2g，精密称定，放入100ml具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，置水浴锅上加热回流3小时，放冷后，再次称定重量，加稀乙醇补至上次称定的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置水浴锅上浓缩至近干，残渣加乙腈-水（3:97）溶液溶解，转移至25ml量瓶中，用乙腈-水（3:97）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 测定法
精密吸取对照品溶液10μl、供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.5 专属性考察
2.5.1阴性对照溶液的制备 按本制剂处方比例，制备缺天麻的阴性样品，按“2.3”项下方法制备阴性对照溶液。
2.5.2阴性对照试验 依照“2.3”项下色谱条件，精密吸取对照品溶液10μl、供试品溶液10μl、阴性对照溶液10μl，依次进样测定，在天麻素色谱峰相同保留时间处，熄风通络胶囊供试品有色谱峰出现，缺天麻的熄风通络胶囊阴性样品无色谱峰出现，表明阴性样品无干扰。
2.6 线性关系考察
取天麻素对照品溶液分别进样1μl、5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，按拟定的色谱条件测定，以峰面积积分值（Y）为纵坐标，天麻素进样量（X）为横坐标，进行线性回归，得出回归方程以及线性范围。回归方程Y=2.59×101X+844，r=0.9995，天麻素进样量在0.05～1.25μg范围内呈良好的线性关系。
2.7 精密度试验
精密吸取对照品溶液，重复进样5次，每次进样量10μl，测定天麻素峰面积，其RSD为0.66%(n=5)，表明仪器精密度良好。
2.8 重复性试验
精密称取熄风通络胶囊（批号：20120601）内容物适量，按照“2.3”项下供试品溶液制备方法制备供试液，按“2.1”项下色谱条件分别测定，进行5次平行试验，以共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD为考察指标，结果相对保留时间的RSD=0.73%，相对峰面积RSD=2.63%(n=5)，表明该方法重复性良好[1]。
2.9 稳定性试验
取熄风通络胶囊（批号：20120601），按照“2.3”项下供试品溶液制备方法制备供试液，按“2.1”项下色谱条件分别测定，分别在0、2、6、12、24小时测定其峰面积，RSD=2.33%(n=5)，表明熄风通络胶囊供试品溶液在24小时内基本稳定[2]。
2.10 加样回收率试验
取已知含量的熄风通络胶囊（批号：20120601）5份，每份取样约2g，精密称定，依次精密加入已配制好的天麻素对照品溶液（0.05mg/ml）1ml，蒸干，按2.3项下的方法制成供试品溶液并依法测定，计算回收率，平均回收率为99.8%，RSD=1.48%(n=5)。
3.小结与讨论
本方法流动相和检测波长的选择参考了2010年版《中国药典》一部天麻及天舒胶囊项下天麻素的含量测定方法，结果天麻素与杂质峰分离度良好，峰形对称，经系统适用性试验，均能符合要求，且阴性样品无干扰[3]。
试验结果表明，应用HPLC法测定熄风通络胶囊中天麻素含量，具有较好的准确度和重复性，且方法简便易行，可做为该制剂的质量控制指标。
【参考文献】
[1] 马虹，毛午佳，刘冬.高效液相色谱法测定全天麻泡腾颗粒中天麻素含量[J].中国药业，2012，21(10):24-25.
[2] 胡顺波，赵晓荣，郭洪丽.高效液相色谱法测定天麻头风灵胶囊中天麻素含量[J].中国药业，2011，20(16):34.
[3] 曾玉梅，陈繁华.八宝惊风散中天麻素的鉴别及含量测定[J]. 解放军药学学报，2013，29(1):63-65.
论文作者:李星洁
论文发表刊物:《医药前沿》2016年2月第5期
论文发表时间:2016/5/24
标签：天麻论文; 溶液论文; 熄风论文; 色谱论文; 胶囊论文; 精密论文; 阴性论文; 《医药前沿》2016年2月第5期论文;