类茶植物显齿蛇葡萄化学成分的分离鉴定与DMY提制技术研究

类茶植物显齿蛇葡萄化学成分的分离鉴定与DMY提制技术研究

张友胜[1]2001年在《类茶植物显齿蛇葡萄化学成分的分离鉴定与DMY提制技术研究》文中研究表明随着现代科学技术的飞速发展及社会经济和人们生活水平的不断提高,“健康”便成了当今世界研究的主题。开发为人类健康造福的天然野生植物已被认为是世界上最有前途,最有生气的行业之一。其中,类茶植物的研究与开发尤为特别,类茶植物的产品日益受到医药行业、消费者青睐,成为全球需求的热点。 作为一种典型的类茶植物——显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)近年来已引起了人们极大的关注。显齿蛇葡萄系葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物,为粤蛇葡萄的变种A.cantoniesis(H.et A.)Pl.var.grossedentata Hand-Mazz.,全株药用,味甘、淡、性凉,具清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效。自古以来,壮族和瑶族人民将其嫩幼茎叶制成保健茶,用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疽型肝炎、疮疖等症,夏天泡茶数日不馊,有“神茶”之称。该植物在湖南、湖北、江西、广东、广西、四川、云南、贵州等省份大量分布,同时易于人工栽培,在短时内扩大生产量,且在我们的系列研究中证实栽培种与野生种的主要内含成分相差不大,实属可以直接开发利用的天然野生植物资源。前人对此进行过初步的研究,目前已开发了“茅岩莓茶”、“藤茶”、“甘露茶”等初级类茶产品,但纵观所有实验,研究主要停留在对显齿蛇葡萄粗提物的药理功能研究上,既缺乏对其化学成分的系统分离、鉴定,又缺乏对其主要化学成分的提取、分离、纯化技术等方面的研究,致使该植物至今未能得到迅速、有效、合量、全面的开发与利用。 故此,本课题直接针对目前显齿蛇葡萄研究中亟待解决的几个问题,周密设计、利用薄层层析(TLC)、系列柱层析、HPLC、DSCCC等国内外研究天然野生植物活性成分中最先进的方法,并在实验中首次提出并成功采用“加温溶解保温过柱温水解吸”提制天然野生植物活性成分的新方法,同时运用UV、IR、’HNMR、‘CNMR和MS、LC-MS、GC-MS等国内外鉴定化合物结构中最先进仪器,就植物中主要黄酮类、多酚类以及挥发性化学成分的提取、分离、鉴定;DMY的RP-HPLC检测方法的建立以及植物中DMY含量的测定;提取、分离、纯化DMY的条件优选等内容进行了研究。数据可靠、结论准确。既为研究天然野生植物活性成分提供了新的方法和研究思路,又为全面、系统、合理地开发显齿蛇葡萄植物提供了大量有益的理论和实用参数。实验研究结果表明:1、用丙酮:水(1:1)溶剂回流浸提显齿蛇葡萄植物幼嫩茎叶,提取液用无水乙醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取、在滤渣和乙酸乙酯浸膏部分,鉴定其中存在二氢杨梅树皮素一 (简称DW人杨梅素(简称W人懈皮素、芦丁四种对人体的生理功能起着非常重要作用的黄酮类化合物,其中懈皮素和芦丁存在于本植物为首次报到。在水相部分首次鉴定其中存在没食子酸、没食子酸乙酯、没食子阶卜卜葡萄糖叁种对人体的生理功能具一定作用的多酚类化合物。2、首次建立Nova-PakCl。不锈钢柱(3.9。X 150。)作色谱柱、甲醇/水(36:64、0.1%磷酸)作流动相、二.oml/min流速、进样量为 10 ul、柱温为 30‘C、UV-250urn作检测波长的色谱分析条作下,准确快速地同时测定显齿蛇葡萄中DMY和y含量的HPLC方法,其中RSD分别为5.2 l队3.23%。结果显示:该植物系自然界中黄酮类化合物分布的一种特例,其中Dy含量特高,占幼嫩叶干重的27WeZWh,占茎干重11ng右;y含量占幼嫩叶干重的二.n*.现占茎干重的1.2%左右,不同季节、不同产地的样品中Dy和y含量有一定差别。Dy系黄酮类化合物中重要的一元,具祛痰、消炎、止咳、降脂、保肝护肝等等非常重要的生理活性作用,该结果进一步证实,该植物是一种开发前景非常广泛的天然野生植物。 3、Dgy提制条件研究结果显示: (1)用水或乙醇浸提显齿蛇葡萄春、夏季样,一次浸提后干燥物中DMY含量为40% 左右,秋季自然落叶样中不含Dr,结果预示植物中化学成分的转变非常活跃,从现 有的研究结果看,植物原料以春、夏两季为有用原料。 (2)应用目前工业化生产中提制天然植物活性成分的最先进的大孔吸附树脂法提制Dy。在水溶液状态下,物理化学性质各有特点的m、NKA{、ABS等9种大孔吸附树脂对杂质的吸附比率要大于对Dgr的吸附比率;提纯、精制DMY宜利用大孔吸附树脂吸附杂质的能力优于吸附DMY的能力的特点而实现;首次注意水和温度的综合作用在提纯、精制Dy时起重要影响。 (3)本实验首次提出并采用“增温溶解保温过柱温水洗脱”方法纯化Dy,且获得成功,为快速、有效地提取天然野生植物中不同活性成分增加了新的方法。“增温溶解保温过柱温水洗脱”方法即人为地提高水温,以此增加e在水中的溶解能力;趁热保温过大孔吸附树脂,利用大孔吸附树脂吸附杂质的能力优于吸附Dy的能力,以此提纯DWi;最后,用一定温度的水洗脱被吸附在树脂上的Dr和杂质,既可减少Dy的损失,又可保证树脂的重复使用。结果显示:该方法能快速、有效地提Dgr。提制Dgy时,溶解、过柱温度宜为50-70℃,最好为60℃;用水解吸时,其温度可在60t以上。 N)提纯Dny时,“增温溶解?

林淑英[2]2004年在《显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的提取纯化及抗氧化活性研究》文中研究指明二氢杨梅素具有多种生理活性,来源广泛,在显齿蛇葡萄中具有很高的含量,目前对其的研究主要为药理方面,为了真正实现物尽其用,进一步系统研究其提取纯化和应用性质等是非常必要的。目前对二氢杨梅素纯化的研究集中在色谱法,此法在生产上投资大,制备规模小,不利于工业化。因此本研究以显齿蛇葡萄幼嫩芽头干叶为原料致力于易于工业化生产二氢杨梅素的结晶条件研究。并对其抗氧化机理、应用条件、稳定性及分子修饰进行了系统的研究。1. 首先鉴定了显齿蛇葡萄芽头干叶中二氢杨梅素化学结构,其化学命名为3,5,7,3',4',5'六羟基二氢黄酮醇。在此基础上,建立了高效液相色谱法测定二氢杨梅素的操作条件。色谱柱为Symmetry 300~(TM) C_(18) 3.5×150mm;流动相:乙腈:水:乙酸=1:9:0.1,pH 值为3.5;柱温:25℃;流速:1.0mL/min;检测波长:288nm;进样量:10μL。样品浓度在10μg/mL~100μg/mL 范围内呈现良好的线性相关性。2. 本研究所采用的原料显齿蛇葡萄幼嫩芽头干叶中二氢杨梅素含量高达20.27%;总黄酮含量为30.22%。蛋白质含量为8.69%;可溶性糖为9.10%;总灰分6.52%。含有氨基酸种类达17 种以上。采用水热提取法分离制备显齿蛇葡萄幼嫩芽头干叶中的二氢杨梅素,料水比为1:20,100℃下提取30min 为较好的制备条件,提取率可达22.00±0.99%;纯度为51.60±1.21%。3. 二氢杨梅素在水中的溶解度随温度变化非常大, 100 ℃溶解度为1.5900g/100g 水,25℃下溶解度为0.0691g/100g 水。二氢杨梅素在乙醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸以及正己烷等常用有机溶剂中的溶解度较高;在乙醇溶液中的溶解度随温度变化较小,随浓度变化较大。4. 采用水重结晶法以15:1000 的料水比进行等溶质浓度重结晶,5 次重结晶后产率为10.83±0.36%;浓度梯度重结晶法较等溶质浓度重结晶法产率提高5%以上,产品纯度均可达到95%以上。产品外观为黄白色细针状晶体,无味。有机溶剂重结晶法,选择60%浓度乙醇为适合的二氢杨梅素结晶体系,经过5 次重结晶后,产品的纯度可达98%,晶体为黄色、棒状,长度可达3mm,结晶产率为30.01±1.26%,较水重结晶法高2 倍左右。水重结晶法和60%乙醇温度梯度重结晶法得到的二氢杨梅素结晶产品晶形不同,均具有较高的结晶度。5. 固态二氢杨梅素具有良好的热稳定性,加热到245℃才发生分解。但在水相中随时间和温度的增加会变得不稳定。pH 值是影响二氢杨梅素稳定性的重要因素。碱性条件下(pH>8.0),二氢杨梅素结构发生变化,达到pH=9.0 后二氢杨梅素分子结构彻底被破坏。酸性和中性条件(pH<7.0)下,二氢杨梅素则表现出良

易诚[3]2004年在《显齿蛇葡萄研究进展》文中指出从显齿蛇葡萄的化学成分、药理功能及作用机理、抗氧化作用、有效成分提取工艺、加工利用和生态及繁殖6个方面总结了显齿蛇葡萄的研究进展情况,旨在为其进一步开发利用提供依据。

易诚[4]2005年在《显齿蛇葡萄繁殖技术及产品加工工艺研究》文中认为显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)的嫩叶经过杀青、揉捻、烘干而成的类茶制品称为藤茶,因药理作用显着及良好的经济效益,资源受到严重的破坏。为进一步开发利用野生显齿蛇葡萄资源,防止因过度采摘造成的资源破坏,解决发展藤茶产业的资源与技术问题。通过选择显齿蛇葡萄嫩茎,采用不同培养基质(细炉灰渣、洁净河沙、湿锯末),不同浓度(500、300、200、100mg.L~(-1))、类型的生长调节剂(NAA、IAA、IBA、ABT)处理,对显齿蛇葡萄绿枝扦插繁殖技术进行了研究。选择不同的培养基(MS、N_6),不同浓度(0.10、0.15、0.20、0.25、0.00 mg.L~(-1))、类型的激素(6-BA、NAA),在不同条件下进行显齿蛇葡萄组织培养育苗试验的研究。在此基础上,以显齿蛇葡萄叶为原料进行藤茶手工加工和藤茶机械加工工艺的研究;以加工的藤茶为原料,进行藤茶袋泡茶及藤茶饮料生产工艺的研究。结果表明: 1.显齿蛇葡萄绿枝扦插繁殖以使用NAA、浓度为300~500 mg.L~(-1)、处理时间为3~5s、湿锯末作基质为宜。 2.显齿蛇葡萄组培育苗以0.1%的升汞消毒2~3min、MS培养基、1.5mg·L~(-1)的6-BA的愈伤组织生长最快;分化芽处理以MS+1.5 mg.L~(-1)6-BA+0.05 mg.L~(-1)NAA表现最好;生根培养以1/2N_6+1.5 mg.L~(-1)6-BA+0.15 mg.L~(-1)NAA表现最好。 3.藤茶手工加工工艺中,通过对显齿蛇葡萄鲜叶分级后,在150℃~160℃的温度杀青,再经手工揉捻20~25min,40~50℃下焖青6~12h,太阳光下晒至产品呈白霜状,可得到高质量的藤茶产品。 4.藤茶机械加工工艺中,经清洗后摊青8h、烫青2.5min,再经揉捻出汁后解块、理条、初烘、摊凉、复烘等工艺加工成外形细紧钩曲、绿起白霜、香味高浓、色泽黄明亮、滋味浓醇回甘持久、叶底黄亮细嫩连枝的优质藤茶。 5.藤茶袋泡茶生产,通过藤茶成品去杂质、粉碎和筛分,定量包装,生产成茶包外形完整无破损,汤色黄明清澈,香气纯正,滋味醇厚回甘,茶袋完整,叶质柔软的藤茶袋泡茶产品。 6.藤茶饮料,通过在70℃下40min的100倍水提取、过滤,按藤茶提取液∶蔗糖∶食盐∶柠檬酸为300∶10∶0.4∶0.3比例调配,添加0.001%的单宁酶和0.2%β-环状糊精作为防混浊剂,再经过排气、杀菌、装瓶、冷却即成色香味俱佳的藤茶饮料成品。 7.显齿蛇葡萄繁殖技术及产品加工技术通过在衡东县天然藤茶有限公司试验推广,获得了巨大的经济效益。

向博文[5]2010年在《显齿蛇葡萄微繁殖体系的建立》文中提出为了建立显齿蛇葡萄植株再生体系,本研究以湖南农业大学资源资源圃栽植的显齿蛇葡萄为材料,以长约1.0 cm左右的第10至第15节茎段和第1至第5节茎段作茎段外植体(简称P1、P2),以剪除叶尖以下2/3叶片具有小叶叶柄的叶片为叶外植体(简称P3)。研究了影响其植株再生的因素,结果如下:1.显齿蛇葡萄组织培养最佳灭菌方案为:茎叶材料用70%酒精浸泡10S左右后,P1的材料采用0.25%HgCl2水溶液浸泡25min灭菌,P2、P3的材料用0.15%HgCl2水溶液浸泡15 min灭菌。2.P3在添加IBA 0.05 mg/L+BA 2.0 mg/L的MS(含20%蔗糖)培养基培养,愈伤组织诱导率较高;P1、P2在IBA 0.05 mg/L+BAl.5 mg/L的MS(含20%蔗糖)培养基培养,愈伤组织诱导率较高;P1、P2诱导的愈伤组织分化出了畸形胚,但未能直接进一步分化出芽。3.具有腋芽的茎段外植体在培养中,只诱导出了腋芽萌发生长,不产生丛芽;木质化程度高的腋芽萌发率高于木质化程度低的。不具腋芽、具有腋芽基部细胞的茎段外植体,容易诱导出丛生芽,木质化程度低的外植体的丛生芽诱导率显着高于木质化程度高的外植体。4.具小叶叶柄的叶外植体在附加TDZ 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L的BM(2%蔗糖)培养基培养,诱导出了不定芽。5.具成熟叶的试管苗茎段在MS+IBA 0.05 mg/L培养基上培养较容易诱导生根。6.显齿蛇葡萄的小苗栽至黄泥:细沙=2:1的土壤中,在温度25℃,75%以上湿度下,成活率为93%。

易海燕[6]2011年在《藤茶总黄酮及二氢杨梅素的提取分离纯化研究》文中指出藤茶,植物学名显齿蛇葡萄[Ampelopsis grossedentata (Hand—Mazz)w. T. Wang],葡萄科(VitaceaeMiehx)蛇葡萄属(Ampelopsis),野生藤本植物。显齿蛇葡萄全株药用,味甘、淡,性凉,具有清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效。用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疱疖等症。化学成分研究表明,显齿蛇葡萄中黄酮类成分含量高达30%左右,其中二氢杨梅素(dihydromyricetin, DMY)含量20%左右。从藤茶茎叶中提取的总黄酮具有抗血栓、降脂、保肝、降血糖、抗炎、镇痛和提高免疫功能的作用。二氢杨梅素(dihydromyricetin, DMY)是其中最重要的黄酮类化合物,据报导DMY具有消炎、止咳、祛痰、镇痛、抑菌、抗高血压、消脂以及解乙醇中毒等药理作用。所以藤茶总黄酮和DMY在食品、保健品以及医药方面有广泛的应用前景。目前关于藤茶深加工方面尚未见到商品化产品的报道,选择和确立适用于藤茶总黄酮类成分和DMY提取分离纯化工艺与藤茶资源的深度开发利用密切相关。这将有利于藤茶总黄酮及DMY的充分开发利用,减少环境污染。本课题在前期研究的基础上做了以下方面研究:1.建立了藤茶总黄酮及DMY含量测定方法。以DMY为对照品,采用紫外分光光度法对DMY对照品溶液在200-800nm进行波长扫描,确定290nm为最大吸收波长。通过考察5%AlCl3乙醇溶液、2%ZrOCCl2乙醇溶液和不加显色试剂对紫外吸收的影响,发现叁种方法结果相差不大,所以采用不加显色剂的紫外分光光度法测定藤茶中总黄酮的含量。以DMY为对照品,色谱柱系为sinochrom ODS-BP (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(27:73:0.1),流速为1.0mL·min-1,进样量为20μL,柱温:25℃,检测波长:290 nm的高效液相方法测定藤茶中DMY的含量。2.明确了新鲜藤茶的不同炮制加工及不同产地的含量差别。考察阴干、晒干、50℃烘干、70℃烘干、90℃烘干、110℃烘干130℃烘干对藤茶总黄酮及DMY的影响,总结出最佳的藤茶干燥方法以70℃烘干较为适宜,确定藤茶的最佳干燥温度为70℃。3.优选了藤茶总黄酮提取工艺。通过比较总黄酮提取率、总黄酮中DMY提取率、紫外分光光度测定总黄酮含量、高效液相测定总黄酮中DMY含量为参考指标,利用正交实验法优选藤茶总黄酮的提取工艺。优选出最佳传统提取工艺为物料比10倍用量,乙醇浓度70%,提取温度70℃,提取2次的提取方法。本研究为设计中药罐组式动态逆流提取方法提供了基本的理论参数。4.藤茶总黄酮及DMY的纯化方法研究通过考察甲醇、乙醇、丙酮、水四种不同溶剂以及最佳溶剂的用量和活性碳吸附剂的用量对DMY纯度及得率的影响。优选出最佳的纯化工艺:用90倍水加1%的活性炭进行重结晶,在0-4℃放置24h再过滤,重复10次以上DMY纯度可达98%以上。5.大孔吸附树脂对重结晶母液中总黄酮的富集工艺研究通过静态吸附考察四种大孔吸附树脂HPD-100、NKA-9、AB-8、D-101对藤茶总黄酮的吸附和解吸附性能,优选出富集效果最佳的HPD-100大孔吸附树酯,并对HPD-100大孔吸附树脂动态吸附参数、放大试验、循环使用等进行了考察,结果表明HPD-100大孔吸附树脂可用于富集藤茶总黄酮,富集工艺为:重结晶母液PH=3,流速2BV/h,柱1吸附的穿透点在6BV,吸附重结晶母液20BV;柱2吸附柱1的漏’出液后,再吸附12BV重结晶母液;柱3吸附柱2的漏出液后,再吸附重结晶母液12BV;柱3的漏出液被再生的柱1继续吸附,由3根树脂柱组成一个串联系统,如此循环操作,吸附30min后用蒸馏水洗脱至溶液无色,再用40ml/g(干树脂)的70%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,回收乙醇,干燥,即得大孔树脂富集的藤茶总黄酮,再用水反复重结晶进行纯化。

陈玉琼[7]2007年在《藤茶中黄酮、二氢杨梅素的提取分离、降血脂作用及藤茶安全评价的研究》文中研究指明藤茶为我国特有茶用、药用植物,富含二氢杨梅素等黄酮类物质。有关藤茶的研究主要集中在藤茶活性成分的分离鉴定及黄酮抗菌、抗氧化、降血糖作用等方面。本文在对藤茶饮用的安全性进行评价的基础上,以活性为跟踪,采用二次正交旋转组合设计法研究了藤茶主要活性成分黄酮及二氢杨梅素的提取条件,比较了不同藤茶原料黄酮含量及其活性的变化,筛选了利用大孔树脂纯化藤茶黄酮的分离条件,对藤茶水提物、黄酮及二氢杨梅素的降血脂作用及其机理进行系统研究,以期为藤茶的开发应用提供理论基础。1藤茶黄酮提取条件的研究在单因素实验的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计方法研究了温度、时间、料液比、乙醇浓度对藤茶黄酮和二氢杨梅素(DHM)提取率、黄酮纯度及其对O_2~(·-)自由基清除率的影响。结果表明,温度、时间、料液比极显着影响藤茶黄酮及二氢杨梅素的提取率,建立的回归模型显着性检验达极显着水平,回归模型的预测值与实测值能较好地拟和。结合黄酮的纯度和对O_2~(·-)自由基清除率活性分析,藤茶黄酮的最佳浸提条件:乙醇浓度在-0.8~1水平(67%~85%),浸提温度在0~1水平(65℃~77.5℃),浸提时间在-1~0.3水平(60min~100min),料液比在0~1水平(1∶30~40)。根据二氢杨梅素的提取率和含量分析,其最佳提取条件为:提取温度在-0.8~-0.03水平(55℃~65℃),时间在-0.1~0.1水平(86min~93min),料液比在0~0.5水平(1∶30~35),乙醇浓度在0.5~-0.1水平(74%~80%)。2不同藤茶原料黄酮含量及活性的研究2.1生育期的影响。对藤茶不同嫩度以及新梢不同部位原料的黄酮、二氢杨梅素含量及黄酮清除O_2~(·-)自由基的活性进行分析,表明随着原料的老化,黄酮含量及其清除O_2~(·-)自由基的能力呈下降趋势。二氢杨梅素的变化趋势与黄酮基本相同。与叶片相比,藤茶梗中黄酮和二氢杨梅素的含量最低,但活性却相对较高。提示一方面藤茶中的活性黄酮主要集中在叶片,尤其是生育旺盛的部位积累最多,另一方面茎梗与叶片黄酮的组成可能存在较大差异。2.2栽培条件的影响。分别对栽培型、野生型、仿野生型藤茶的黄酮和二氢杨梅素含量以及清除O_2~(·-)自由基的活性进行分析。结果表明,黄酮和二氢杨梅素含量以及清除O_2~(·-)自由基的活性大小依次为野生型>仿野生型>栽培型。提示藤茶生长条件的改变已对体内生理生化变化产生了较大影响。2.3产地的影响。分析了全国主要藤茶产地湖南、湖北、广东、广西、江西、福建等地所产藤茶原料中黄酮、二氢杨梅素含量及其活性变化。结果表明,以广东连南、福建武平、江西定南所产藤茶的黄酮及二氢杨梅素含量最高,湖南桑植、茶陵、恩施来风所产藤茶的黄酮及二氢杨梅素含量相对较低。各地藤茶黄酮清除O_2~(·-)自由基的能力与其含量的相关性不明显(r=0.2769),但与二氢杨梅素的含量呈极显着的正相关(r=0.8330)。由此说明,藤茶黄酮的活性主要与其组成有关,而二氢杨梅素是黄酮活性的主体成分。2.4叶型的影响。对大、中、小叁种不同叶型的藤茶黄酮进行分析,表明黄酮和二氢杨梅素含量高低依次为中叶>小叶>大叶,黄酮清除O_2~(·-)自由基的活性大小依次为小叶>中叶>大叶,但小叶和中叶型藤茶黄酮的活性变化差异不显着。说明在进行品种选育时应以中、小叶型藤茶为主。3藤茶中黄酮的分离纯化及结构鉴定选用11种大孔树脂对藤茶黄酮进行了静态吸附与解吸附实验。结果表明,1号树脂适宜于藤茶黄酮的分离纯化,对黄酮的吸附量可达41.41mg/g,解析率达到89.2%。通过动态吸附实验对1号树脂有关参数进行了优化。结果表明,黄酮上样浓度6-7mg/ml,上样体积为柱体积的1/3,流速1.8ml/min,用95%的乙醇进行洗脱,可达到较好的洗脱与纯化效果,黄酮的洗脱率可达90%左右,洗脱出的黄酮纯度达65%左右。进一步利用重结晶方法得到纯度为98.7%的纯品,经紫外可见光谱,红外光谱、LC-Ms分析表明,黄酮中的主要成分为二氢杨梅素。4藤茶安全性毒理学实验研究根据保健食品检验与评价技术规范对藤茶安全性进行了评价。急性毒性试验结果表明,受试藤茶属无毒级;3项致突变试验结果均为阴性。大鼠90天喂养试验中,藤茶各剂量组动物生长发育良好,对体重、食物利用率无不良影响。各剂量组血常规、白细胞分类结果与对照组无显着差异。大鼠血清ALT、AST、BUN、TC、TG、CRE、GLU、ALB、TP测定结果与对照组比较无显着差异。脏器系数与对照差异不明显。肝、心、脾、肾、胃肠、睾丸、卵巢等器官外观和组织切片与对照相比均未发现实质性病理改变。说明饮用藤茶安全无毒。5藤茶提取物降大鼠及人体血脂作用研究用大鼠脂质代谢紊乱模型法研究藤茶提取液对大鼠的降血脂作用。结果表明,与高脂模型组比较,藤茶高剂量组(4.5g/Kg.bw)大鼠血清TC显着降低,高、中剂量组(3.0g/Kg.bw)血清TC下降>10%;高、中剂量组TG显着降低,其中,高剂量组TG下降>15%;高、中、低剂量组(1.5g/Kg.bw)HDL-C显着升高,其中,高剂量组HDL-C升高值>0.12mmol/L。人体临床试验表明,服用藤茶组降TC有效率为42.0%,降TG有效率为72.0%,降血脂有效率为28.0%,极显着高于对照组。服用藤茶组血清TC、TG明显降低,与试用前及对照组比较差异极显着。试验组实验前后血液学指标及血生化指标检验结果无显着变化。提示藤茶提取物对大鼠及人体都有辅助降血脂的作用。6藤茶中黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究对藤茶中主要活性成分黄酮及二氢杨梅素对高血脂症小鼠的降血脂效果进行了研究。结果表明,与高脂模型组比较,0.5g/kg.bw灌胃(ig)剂量的二氢杨梅素能明显减轻小鼠体重;各剂量黄酮都能显着降低小鼠血清TG含量;0.3g/kg.bw ig剂量二氢杨梅素能显着降低小鼠血清TC、TG、LDL-C含量,0.5g/kg.bw ig剂量二氢杨梅素能极显着提高血清HDL-C含量;黄酮及二氢杨梅素都能明显提高小鼠血清SOD活性,降低血清MDA含量及肝系数。肝脏病理学观察表明,藤茶黄酮及二氢杨梅素能降低肝细胞变性、肿胀的程度。说明藤茶黄酮及二氢杨梅素能降低小鼠血脂,增强机体抗氧化能力,减轻高脂对肝细胞的损伤作用。7二氢杨梅素发挥生理活性的机理研究结合药代动力学原理,应用紫外吸收光谱、荧光光谱等方法对二氢杨梅素与牛血清白蛋白(BSA)相互作用机理进行了研究。结果表明,在弱碱性条件下,二氢杨梅素易解离成为阴离子,紫外吸收峰发生明显红移;在生理pH(7.4)下,BSA中加入不同浓度的二氢杨梅素后,吸收峰发生了红移。二氢杨梅素对BSA的内源荧光强度有较强的猝灭作用,属静态猝灭类型,猝灭速率常数Kq=3.97×10~(12);二氢杨梅素与BSA之间结合位点数n=1.97,结合常数K_A=5.04×10~9。Ca~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)金属离子的存在会使二氢杨梅素与BSA的速率猝灭常数增大,结合常数和结合位点数降低,减小了二氢杨梅素与BSA的结合,而Fe~(3+)使二氢杨梅素与BSA的结合位点数和结合常数都增加,提高了二氢杨梅素与BSA的结合。说明二氢杨梅素在机体内易与生物大分子结合而发挥其活性功能,金属离子的存在直接影响二者的结合,从而影响其活性的发挥。

陈业, 罗祖友, 向东山[8]2008年在《藤茶黄酮类化合物的提取分离与定量方法研究进展》文中认为藤茶黄酮的主要成分为二氢杨梅素(DMY)和杨梅素(MY),以热水提取和乙醇回流提取为主;分离纯化主要采用重结晶和柱层析法;紫外光度法(292 nm)、A1Cl3显色法(294 nm和314 nm)和反相HPLC(290~294 nm检测)等方法用于藤茶黄酮含量的测定.为了给藤茶资源的深度开发提供系统适用的方法,对藤茶黄酮类化合物的提取分离与定量方法的研究进行了综述.

参考文献:

[1]. 类茶植物显齿蛇葡萄化学成分的分离鉴定与DMY提制技术研究[D]. 张友胜. 湖南农业大学. 2001

[2]. 显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的提取纯化及抗氧化活性研究[D]. 林淑英. 华南理工大学. 2004

[3]. 显齿蛇葡萄研究进展[J]. 易诚. 经济林研究. 2004

[4]. 显齿蛇葡萄繁殖技术及产品加工工艺研究[D]. 易诚. 湖南农业大学. 2005

[5]. 显齿蛇葡萄微繁殖体系的建立[D]. 向博文. 湖南农业大学. 2010

[6]. 藤茶总黄酮及二氢杨梅素的提取分离纯化研究[D]. 易海燕. 湖南中医药大学. 2011

[7]. 藤茶中黄酮、二氢杨梅素的提取分离、降血脂作用及藤茶安全评价的研究[D]. 陈玉琼. 华中农业大学. 2007

[8]. 藤茶黄酮类化合物的提取分离与定量方法研究进展[J]. 陈业, 罗祖友, 向东山. 湖北民族学院学报(自然科学版). 2008

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类茶植物显齿蛇葡萄化学成分的分离鉴定与DMY提制技术研究
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