天津尖峰弗兰德医药发展有限公司 天津市 300457
1、实验材料
1.1
2.2.1超高效液相色谱条件
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18（1.7μm，2.1X100mm）；柱温30℃；进样量4μL；流动相：乙睛（A），0.1%（V/V）甲酸水溶液（B），梯度洗脱，流动相流速为0.4ml/min，流动相洗脱表1-1
2.2.2质谱条件
本实验使用Waters Synapt G2 HDMS质谱仪，测量采用电喷雾离子源（ESI），数据采集采用Masslynx4.1工作站。
正离子模式：毛细管电压3.0kV；离子源温度为110℃；锥孔电压为30V；锥孔气流量为50L/h；脱溶剂雾化氮气温度为350℃；脱溶剂雾化氮气流量为600L/h；检测器电压为1900V；采样频率为0.1s，扫描间隔延时0.02s；质量数据检测范围100-1500Da；内参校准液采用亮氨酸脑啡肽（LEA），内参设定为【M-H】=553.2775.
负离子模式：毛细管电压2.5kV；离子源温度为110℃；锥孔电压为45V；锥孔气流量为50L/h；脱溶剂雾化氮气温度为350℃；脱溶剂雾化氮气流量为600L/h；检测器电压为1900V；采样频率为0.1s，扫描间隔延时0.02s；质量数据检测范围100-1500Da；内参校准液采用亮氨酸脑啡肽（LEA），内参设定为【M-H】=553.2775.
2.2.3色谱峰的结构解析
采用UPLC/Q-TOF对红酒泥进行了一级质谱和二级质谱实验分析，并通过查阅文献确定样品中所含化合物的信息。由以及质谱分析可以得到化合物的准分子离子峰的信息，通过小数点后四位的精确质量数确定其可能的元素组成，然后根据二级质谱图中的离子碎片信息，分析其碎片裂解规律，将精确质量数和其裂解规律与参考文献进行分析对比，再参考色谱峰的相对保留时间以及化合物的洗脱规律，综合考虑分析进而确定色谱峰的机构信息。
3、实验结果
3.1红酒泥UPLC/Q-TOF图谱
本试验采用UPLC/Q-TOF对红酒泥中所含化合物进行分析，首先是对流动相的选择，在流动相的有机相选择时发现，有机相选用乙腈与选择甲醇相比，乙腈的洗脱能力更强，可以达到更好的分离效果；在水相中加入0.1%会有更平稳的基线和更好的峰型，因此流动相最终确定为乙腈-0.1%甲酸水溶液。采用梯度洗脱可以达到更佳分离效果，并确定了流动相的洗脱条件（表2-1）能更好的表征红酒泥中主要色谱峰
3.2红酒泥中化合物的结构鉴定
UPLC分离后，通过四级杠杆-飞行时间质谱对红酒泥中的化学成分进行结构分析。由于不同的化学成分在不同的模式下响应度不同，因此本实验分别在正、负两种离子模式下分别对红酒泥进行分析。一级质谱测定得到化合物的【M+H】或【M-H】等准分子离子峰的相关信息，通过这些物质的精确分子量，结合二级质谱中的碎片信息和已报道的成分结构信息，推测化合物可能的结构式。通过上述分析方法，在红酒泥中共鉴定出23种化合物成分。各成分具体结构见图3-2.
从图谱中可以看出，儿茶素，表儿茶素，矮牵牛素，槲皮素等黄酮成分在红酒泥中的含量较高，可能作为红酒泥中的主要成分。
其次，红酒泥中含有大量的邻二酚羟基，间二酚羟基结构，除了槲皮素，儿茶素等成分，原花青素，白藜芦醇等也具有强还原性，能够将活性氧自由基还原成水分子，从而达到抗氧化作用，这些成分可能在红酒泥的抗氧化效果中起主要作用。
论文作者:吕建营,魏洪君
论文发表刊物:《健康世界》2017年第6期
论文发表时间:2017/6/7
标签：红酒论文; 化合物论文; 儿茶素论文; 色谱论文; 离子论文; 电压论文; 质谱论文; 《健康世界》2017年第6期论文;