湖北省嘉鱼县疾病预防控制中心 湖北嘉鱼 437200
摘要：目的 建立一种灵敏度高，结果精确，实验方法易于控制，实用性强的血锰分析方法。方法 通过查阅相关参考标准[1]、以及锰分析资料查阅[2]，对职业工作人员进行血锰测量。结果 原子分光光度计石墨炉法测量血锰[3]，血锰浓度在0～20μg/L范围内本方法线性良好。回归方程A=0.0118C-0.0019 相关系数r=0.9999 经过对标准系列零管20次的重复试验，标准偏差Sb=0.0017，检出限DL =0.27μg/L。结论 原子分光光度计石墨炉法测量血锰，该方法各项测量结果达到《生物材料分析方法的研制准则》的要求，适用职业接触者的血锰检测。
关键词：原子分光光度计石墨炉法；血锰；血锰检测
锰主要以粉尘的形式被人体吸入，也可通过胃肠道及皮肤侵入引起以神经系统改变为主的疾病。锰中毒目前尚无特异的化学诊断指标，血锰含量检验国家没有制订相应标准，血中锰含量的检验对预防和治疗锰中毒有一定的参考价值。本文根据《生物材料分析方法的研制准则》的要求，提出了用原子吸收分光光度计石墨炉法测定血中锰的方法。结果证明，该方法具有灵敏度高，准确度好，简便易行等特点。
1 仪器及工作条件
1.1 仪器、
（1）原子吸收分光光度仪（北京普析分析仪器 有限公司）
（2）锰空心阴极灯
（3）离心机
（4）聚乙烯加盖离心管
（5）微量取液器
1.2试剂：
（1）锰标准贮备液：1.00ml=1.00mg，由国家标准物质研究中心提供；
（2）锰标准应用液：1.00ml=0.10μg，临用前用1.0%硝酸溶液稀释贮备液；
（3）硝酸： 优级纯Ｐ20=1.42ɡ／L
（4）硝酸溶液：1.0%（Ⅴ/Ⅴ）
（5）硝酸溶液：0.2%（Ⅴ/Ⅴ）
（6）乙醇溶液：75%（Ⅴ/Ⅴ）
1.3 样品的采集、运输和保存
按顺序0.2%硝酸溶液、纯水、碘酊、乙醇清洁取血区肤，用空腹静脉采血5ml置于EDTA-K2真空管中，并立即摇晃均匀。取0.2ml血浆加入聚乙烯加盖离心管，用1.0%硝酸溶液稀释至1.0ml混匀，冰带运输，离心后4℃下可保存1周。
2 分析步骤
2.1仪器操作条件 参照下列仪器操作条件，将原子吸收分光光度计调整到最佳测定状况。
2.2 空白实验（试剂空白）取1.0ml 1%硝酸溶液加入聚乙烯加盖离心管与样品同时进行测定
2.3 校正曲线配制 取7个2.5ml聚乙烯加盖离心管，编号0~6分别加入0.1μg/ml锰标准应用液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.20ml，再加入健康人血浆0.2 ml，用1.0%硝酸溶液定溶至1ml，混匀离心配成浓度为0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、20.00μg/L的标准系列。按仪器操作条件测定吸光度。
2.3 以1~6号管的吸光度减去0号管的吸光度为纵坐标，锰含量为横坐标，绘制校正曲线
3 样品测定
3.1将离心后的血样从冰箱取出，放置至室温，与试剂空白按仪器操作条件（表1）测定吸光度。
3.2 样品的吸光度减去试剂空白吸光度，从校正曲线查得的锰浓度，即为稀释血样中锰的浓度
3.3 测定前后及每测10个样品后，测定一次空白样品。
3.4计算：
X=5C
式中：X—血样中锰的质量浓度，μg/L
C—标准曲线或回归方程计算的质量浓度，μg/L
5—稀释倍数
3.5 灰化温度的选择 对锰浓度为8μg/L的样品，按表1条件，仅在不同灰化温度下测定锰的吸光度，灰化温度为800℃～1200℃时被测成分没有明显损失的前提下干扰成分已被清除。温度为1000℃时，样品测定值标准偏差小，测定结果重现性较好，本法灰化温度选择1000℃。
3.6原子化温度的选择 对锰浓度为8μg/L的样品，按表1条件，不同原子化温度下测定锰的吸光度，测定原子化温度为1800~2300℃的值。原子化温度在1800℃后锰的吸光度恒定，但过高的原子化温度会缩短石墨炉的使用寿命。高于2200℃时，石墨炉体石墨管发出异常的声音，明显提示温度过高，本法原子化温度选择2000℃。
3.7 基体改进剂的选择 基体改进剂可以减少或消除样品的背景干扰，提高测定的灵敏度和稳定性。本文试验了0.5%H2NO3、1.0%H2NO3、1.5% H2NO3基体改进剂的使用，发现1.0%H2NO3不但能较好处理血液样品，提高灰化温度，而且稳定性好，使用方便。
4.结果与讨论
4.1线性范围 在上述实验条件下，随机制作6条标准曲线，其相关系数均>0.9995。结果表明在0～20μg/L浓度范围内本方法线性良好。回归方程A=0.0118C-0.0019 相关系数r=0.9999。
4.2 经过对标准系列零管20次的重复试验，标准偏差Sb=0.0017，得出方法的最低检出限。DL =0.27μg/L。
4.2方法精密度 分别取4.0、8.0、10.0μg/L 3种浓度标准溶液连续测量15次，用最后的11次吸光度值计算，标准偏差结果分别是0.94%，0.86%、0.88%。符合《生物材料分析方法的研制准则》的要求。
4.3方法准确度 于检测样品中加入相当于2.0、6.0、8.0μg的锰标准溶液，连续测定6次计算均值．回收率98.6%～103.3%。结果见表2
4.4样品测定：
应用本法对嘉鱼县高强锰业有限公司职工进行血锰测定，共测定356人，用本法检测血样浓度范围在0～47.95ug/L，比较血锰检出线范围，本法在实际工作中满足血锰测定要求。
4.5 讨论
目前 国家标准《职业性慢性锰中毒诊断标准计及处理原则》未规定血锰检测项目，而血液中的有毒物质的浓度可以反映近期机体接触该物质的程度，常与体内吸收的毒物呈正相关，由于血样中的锰具有含量稳定，取样污染小，以及不受肾功能的影响等优点，测定血锰有直观的实际意义。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生行业标准 血铅的石墨炉原子吸收光谱测定方法【S】中国标准出版社 1997
[2]杨秀英 石墨炉原子吸收法测定血清中锰【J】光谱实验室 2003，20（3）：361-363
[3]刘建荣，孙卫民 尿锰的石墨炉原子吸收测定法【J】职业与健康，2008，24（16）：1650-1651.
作者简介：夏思红（1972-），男，主管技师，主要从事微生物学及卫生学检验工作。
论文作者:夏思红,张红兵,曾凡魁
论文发表刊物:《健康世界》2016年2期供稿
论文发表时间:2016/4/15
标签：原子论文; 光度论文; 石墨论文; 样品论文; 标准论文; 浓度论文; 溶液论文; 《健康世界》2016年2期供稿论文;